乳腺癌HER2表達狀態(tài)與化療藥敏預測基因表達水平的關系

【摘 要】 目的：探討乳腺癌患者中的HER2表達水平與化療藥敏預測基因的表達水平之間的關系。方法：收集80例乳腺癌組織，采用分支DNA液相芯片技術檢測HER2及化療藥敏預測指標TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A的mRNA表達，分析HER2表達水平與化療藥敏預測基因的表達水平之間的關系。結果：80例乳腺癌患者的HER2表達水平與化療藥物敏感基因的mRNA表達水平可能具有正相關關系，但二者之間無顯著性差異。結論：乳腺癌患者在輔助化療中出現(xiàn)耐藥時，有必要進行HER2及各預測因子的全面基因檢測。

【關鍵詞】 乳腺癌；HER2；化療藥敏預測基因；液相芯片技術

【中圖分類號】 R737.9 【文獻標識碼】 A

Correlation of HER2 Expression with Expression of Chemosensitivity-related Genes in Breast Cancer

Tang Xiaojiang

（Department of Oncological Surgery， First Affiliated Hospital，Xi'an Jiaotong University，Shanxi，Xi'an，710061）

【Abstract】 Objective： To study the relationship between HER2 expression and expression of chemosensitivity-related genes in breast cancer.Methods： The gene expressions of HER2， TYMS， RRM1， TUBB3 and TOP2A were examined by branched DNA-liquid chip in 80 breast cancer patients.Results： High expressions of chemosensitivity-related genes always exist as well as high expression of HER2， but there is no significant difference.Conclusion： There is a need for comprehensively detecting the genes of HER2 and chemosensitivity predictors when drug resistance occurs in breast cancer patients.

【Keywords】 breast cancer； HER2；chemosensitivity-related genes；liquid chip method

據(jù)研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計，17%-30%的乳腺癌患者呈現(xiàn)人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）的高表達或HER2基因擴增[1]，而HER2蛋白高表達或HER2基因擴增的乳腺癌患者普遍預后較差，表現(xiàn)為常在較短的時間內(nèi)復發(fā)和轉(zhuǎn)移[2]。因此，HER2已經(jīng)成為乳腺癌的一種重要分子分型，HER2表達狀態(tài)不僅可預測乳腺癌的預后好壞，而且可預測其靶向藥物曲妥珠單抗的療效，目前在乳腺癌的臨床治療過程中，HER2表達的檢測直接影響整個治療路徑。此外，近年來的國外一些臨床試驗表明，HER2過表達（高表達或基因擴增）也是潛在的化療藥物敏感預測因子[3]，而基于中國乳腺癌人群的HER2表達狀態(tài)與化療藥敏的關系還需驗證。

乳腺癌常用的輔助化療藥物有5-Fu類藥物（氟尿嘧啶、培美曲塞等）、吉西他濱、抗微管類藥物（紫杉醇、多西他賽、長春瑞濱）、蒽環(huán)類藥物（多柔比星、吡柔比星等），以上藥物都是全身化療藥物，主要作用機理是細胞毒作用，通過與DNA或酶發(fā)生相互作用而造成相應DNA表達異?；蜿P鍵酶的失活，進而阻止腫瘤細胞的無限制增殖，最終達到殺死腫瘤細胞的目的。相關研究表明，以上各類細胞毒藥物歸根結底是通過與相應的基因（DNA本身或編碼關建酶的基因）相互作用而發(fā)揮藥效的。臨床試驗結果證實，胸苷酸合成酶基因（TYMS）的表達水平是5-Fu類藥物療效的重要預測因子[4]，核苷酸還原酶基因（RRM1）的表達水平是吉西他濱療效的預測因子[5]，微管蛋白β3抗體基因（TUBB3）是抗微管類藥物療效的預測因子[6]，拓撲異構酶Ⅱ基因（TOP2A）是蒽環(huán)類藥物治療效果的預測因子[7]。本文旨在系統(tǒng)研究乳腺癌患者HER2狀態(tài)與化療藥敏預測基因表達水平的相關性，從而判斷HER2表達水平與化療藥敏的相關性。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2010年-2012年西安交通大學第一附屬醫(yī)院病理科行免疫組化檢查的浸潤性乳腺癌（HER2蛋白表達1+以上）80例，所有病例均經(jīng)病理科確診，病理類型及腋窩淋巴結轉(zhuǎn)移情況經(jīng)病理醫(yī)師復核。

1.2 HER2 mRNA表達與化療藥敏預測基因mRNA表達檢測 顯微鏡下對經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋的腫瘤組織進行腫瘤細胞含量分析，選擇1塊含至少70%的腫瘤細胞進行切片，刮取腫瘤組織用于DNA的提取，采用分支DNA液相芯片技術法（廣州益善醫(yī)學檢驗所）檢測HER2、TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A mRNA表達。

1.3 統(tǒng)計學方法 使用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 臨床資料 80例乳腺癌患者，女性80例，男性0例，年齡29-68歲，中位數(shù)47歲。全為組織標本，病理類型包括浸潤性導管癌73例（其中分化1級4例，2級38例，3級31例），浸潤性小葉癌3例，導管和小葉混合型癌4例。80例患者均可獲知轉(zhuǎn)移情況，其中57例無淋巴結轉(zhuǎn)移，23例有轉(zhuǎn)移。

2.2 分支DNA液相芯片技術檢測mRNA表達 用EXCEL條形圖對80例乳腺癌患者的HER2、TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A mRNA表達進行了頻率分析，將各基因的mRNA表達連續(xù)性劃分為高、中偏高、中、中偏低和低不同水平，各基因表達譜如圖1所示。結果顯示，該80例乳腺癌患者的HER2表達水平整體低于化療藥敏基因的mRNA表達水平。

3 討論

隨著手術及術后多種輔助治療手段的不斷進步，乳腺癌患者的預后得到明顯提高，但復發(fā)率和死亡率仍很高，尤其是HER2高表達的乳腺癌患者由于預后較差而在較短的時間內(nèi)復發(fā)或轉(zhuǎn)移，總生存期也較短。因此，經(jīng)歷近20年的循證醫(yī)學研究，靶向聯(lián)合化療的綜合輔助治療手段目前已成為較為有效的乳腺癌輔助治療方法，而靶點正是HER2，目前已被批準上市的靶向藥有曲妥珠單抗、拉帕替尼，靶向藥物的上市的確讓人歡欣鼓舞，但在臨床實踐中卻沒有在很大程度上提高治療有效率，靶向藥或化療藥的臨床耐藥試驗逐漸受到重視，而靶向與化療之間的關聯(lián)也得到關注。有國外研究顯示，HER2是潛在的化療藥敏預測因子，但HER2在表達過程中有多種分子形式，如DNA、mRNA和蛋白分子，因此HER2過表達包含基因擴增、mRNA高表達和蛋白高表達，而哪種分子形式下的HER2狀態(tài)與化療藥敏基因相關還需進一步研究證實。

通過本試驗，我們發(fā)現(xiàn)HER2 mRNA表達水平與化療藥敏預測因子TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A的整體mRNA表達可能具有正相關關系，但SPSS 21.0統(tǒng)計分析顯示，各預測因子與HER2 mRNA表達水平無顯著性統(tǒng)計學差異，而進一步的分析還需入組患者的治療隨訪數(shù)據(jù)的支持。但可以說明的是基于循證醫(yī)學證據(jù)的乳腺癌標準化治療需要補充化療藥物相關基因的檢測[8]，從而識別患者個體基因差異，更加針對性地用藥，逐步實現(xiàn)乳腺癌的個體化治療，提高整體有效率。

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