青貯飼料中優(yōu)良乳酸菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性研究

何軼群 雷趙民 吳潤(rùn) 萬(wàn)學(xué)瑞 刁小龍 艾文娜

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，蘭州 730070；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，蘭州 730070）

近幾年來(lái)，我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展迅速，動(dòng)物養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)大，但由于我國(guó)耕地面積減少，用于生產(chǎn)飼料的原料嚴(yán)重不足，加之對(duì)秸稈類(lèi)植物的利用率相對(duì)較低，養(yǎng)殖業(yè)和飼料生產(chǎn)的矛盾日益突出，這些問(wèn)題嚴(yán)重制約著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展。因此，發(fā)展飼料工業(yè)以及加大對(duì)秸稈類(lèi)植物飼料化的轉(zhuǎn)化是目前我國(guó)畜牧業(yè)迫切需要解決的問(wèn)題。目前對(duì)秸稈類(lèi)粗飼料的加工處理主要有物理加工法、化學(xué)加工法和微生物發(fā)酵法，其中以微生物發(fā)酵法中的青貯法應(yīng)用最為廣泛。這是因?yàn)榻斩掝?lèi)植物經(jīng)微生物青貯發(fā)酵后具有柔軟多汁、氣味芳香、適口性好、原料營(yíng)養(yǎng)保留較多、胡蘿卜素和蛋白質(zhì)損失少、水分多以及可長(zhǎng)期保存等特點(diǎn)［1-3］。研究發(fā)現(xiàn)，青貯飼料質(zhì)量的好壞又同它所含有的乳酸菌有很大的關(guān)系，但秸稈類(lèi)植物表面附生的乳酸菌數(shù)往往較少，為改善青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，最行之有效的方法是添加優(yōu)質(zhì)乳酸菌生物添加劑，使乳酸菌迅速成為青貯環(huán)境的優(yōu)勢(shì)菌群，迅速降低青貯飼料的pH值，抑制有害菌的生長(zhǎng)，改善青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)、抑制二次發(fā)酵，從而達(dá)到長(zhǎng)期保存飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的目的。并且乳酸菌是動(dòng)物胃腸道的益生菌群，代謝產(chǎn)生的有機(jī)酸、細(xì)菌素、過(guò)氧化氫、雙乙酰等多種天然抑菌物質(zhì)，具有維持腸道內(nèi)菌群平衡，提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收等多種功能［4］。

青貯飼料中含有豐富的乳酸菌，包括腸球菌、乳酸乳球菌、明串珠菌、鏈球菌和乳桿菌等，它們?cè)谇噘A飼料發(fā)酵中起重要作用。本試驗(yàn)旨在從青貯飼料中分離生物學(xué)特性?xún)?yōu)良的乳酸菌，從而為青貯飼料添加劑的研究和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 青貯樣品 玉米秸稈青貯飼料樣品采自甘肅省平?jīng)?、臨洮、康樂(lè)等地青貯窯。樣品采集后迅速置于無(wú)菌自封袋中，4℃保存。

1.1.2 菌株及主要試劑 參考菌株：干酪乳桿菌（Lactobaillus casei）、乳酸乳球菌乳酸亞種（Lactocaccus lactis subsp. lactis）均由甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院甘伯中教授惠贈(zèng)；大腸桿菌（Escherichia coli）、沙門(mén)菌（Salmonella）、蠟狀芽胞桿菌（Bacillus cereus）、金黃色葡萄球菌（Streptococcus aureus）、酵母菌（Saccharomycetes）、青霉菌（Penicillium）、曲霉菌（Aspergillus）、根霉菌（Rhizopus）、E. coli DH5α均由本實(shí)驗(yàn)室保存；細(xì)菌基因組提取試劑盒購(gòu)自北京百泰克生物技術(shù)有限公司；糖微量發(fā)酵管購(gòu)自青島海博生物科技有限公司；其它所需試劑均為進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)分析純產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌分離

1.2.1.1 樣品采集處理 樣品經(jīng)四分法處理后，無(wú)菌稱(chēng)取25 g加入225 mL滅菌生理鹽水中，于37℃恒溫?fù)u床搖動(dòng)2 h備用。

1.2.1.2 乳酸菌的分離 用無(wú)菌生理鹽水稀釋樣品溶液，取10-3-10-5三個(gè)稀釋度，各稀釋度取液體0.1 mL分別均勻涂布于含有CaCO3的MRS和M17培養(yǎng)基平板上，將平板置于厭氧培養(yǎng)盒后37℃培養(yǎng)72 h。

1.2.2 乳酸菌分離株的鑒定

1.2.2.1 乳酸菌分離株的初步鑒定 挑取溶鈣圈較明顯的典型菌落，在MRS平板上反復(fù)劃線(xiàn)得到單個(gè)菌落，觀(guān)察記錄菌落形態(tài)，進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，并做觸酶試驗(yàn)。

1.2.2.2 乳酸菌生理生化鑒定 根據(jù)文獻(xiàn)［5］中的方法，對(duì)疑似乳酸桿菌做運(yùn)動(dòng)性、明膠液化、吲哚、H2S產(chǎn)生、硝酸鹽還原和pH4.5生長(zhǎng)試驗(yàn)。對(duì)于疑似乳酸球菌還需要做精氨酸分解、葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、10℃和45℃生長(zhǎng)、pH9.6生長(zhǎng)和6.5% NaCl生長(zhǎng)試驗(yàn)。對(duì)所有菌株采用糖微量發(fā)酵管法進(jìn)行糖發(fā)酵試驗(yàn)。

1.2.2.3 乳酸菌16S rRNA基因序列分析 參考已發(fā)表的乳酸菌通用引物進(jìn)行細(xì)菌16S rRNA基因擴(kuò)增，正向引物5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'［6］；反向 引 物5'-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3'［7］。以 上引物由上海Invitrogen公司合成。細(xì)菌基因組DNA的提取嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。PCR擴(kuò)增體系為25 μL，上下游引物各1 μL、模板DNA 2 μL、預(yù)混酶12.5 μL、水8.5 μL。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5 min；95℃ 45 s，50℃ 45 s，72℃ 1.5 min，35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10 min，4℃保存。預(yù)計(jì)擴(kuò)增片段長(zhǎng)度約為1 500 bp。將PCR產(chǎn)物回收后，連接pMD18-T載體并轉(zhuǎn)化E. coli DH5α，經(jīng)藍(lán)白斑篩選為陽(yáng)性克隆后送上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司測(cè)序。將測(cè)序結(jié)果在GenBank中進(jìn)行BLAST分析。

1.2.3 優(yōu)良乳酸菌的篩選

1.2.3.1 產(chǎn)酸性試驗(yàn) 將活化的乳酸菌分離株按5%量接入MRS液體培養(yǎng)基，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)30 h，每隔2 h無(wú)菌取樣測(cè)pH值，記錄結(jié)果。

1.2.3.2 抑菌試驗(yàn) 乳酸菌分離株發(fā)酵上清液抑菌試驗(yàn)參照文獻(xiàn)［8］進(jìn)行。

1.2.4 乳酸菌生物學(xué)特性測(cè)定

1.2.4.1 乳酸菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)的測(cè)定 將活化的乳酸菌按5%量接入MRS液體培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)30 h。每隔2 h取樣測(cè)各組菌液的OD600nm值，繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖。

1.2.4.2 溫度敏感試驗(yàn) 將活化的乳酸菌按5%量接入MRS液體培養(yǎng)基后分別置于37℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃溫箱，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，恒溫培養(yǎng)15 h，取樣測(cè)各組菌液的OD600nm值，以培養(yǎng)溫度為橫坐標(biāo)，菌液OD600nm值為縱坐標(biāo)制圖。

1.2.4.3 耐鹽性試驗(yàn) 將活化的乳酸菌按5%量分別接入NaCl濃度為（0、0.02、0.04、0.06、0.08和1.0 g/mL）的MRS液體培養(yǎng)基中，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，37℃恒溫培養(yǎng)15 h，取樣測(cè)各組菌液的OD600nm值，以Na-Cl濃度值為橫坐標(biāo)，菌液OD600nm值為縱坐標(biāo)制圖。

1.2.4.4 不同pH值生長(zhǎng)試驗(yàn) 將活化的乳酸菌按5%量分別接入pH為2、4、6、8和10的MRS液體培養(yǎng)基中，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，37℃恒溫培養(yǎng)15 h，取樣測(cè)各組菌液的OD600nm值，以pH值為橫坐標(biāo)，菌液的OD600nm值為縱坐標(biāo)制圖。

2 結(jié)果

2.1 乳酸菌分離

從含有CaCO3的MRS和M17平板上挑取溶鈣圈直徑>4 mm的菌落，在MRS平板上純化后保存。

2.2 乳酸菌分離株鑒定

2.2.1 形態(tài)、染色及培養(yǎng)特性 在MRS培養(yǎng)基上出現(xiàn)乳白色或灰白色、表面光滑、邊緣整齊、大小不一的圓形菌落，經(jīng)革蘭氏染色為陽(yáng)性、無(wú)芽孢、觸酶試驗(yàn)陰性的初步鑒定為乳酸菌，共分離出12株細(xì)菌。

2.2.2 乳酸菌生理生化特性 參考菌株的各生理生化試驗(yàn)均與標(biāo)準(zhǔn)相符，依據(jù)分離株的生理生化特性（表1-表3），結(jié)合形態(tài)和染色特征，12株乳酸菌分離株的運(yùn)動(dòng)性、明膠液化、吲哚形成、H2S試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陰性，其中B1-4、B2-7、B2-8、B2-9、B3-1的pH4.5生長(zhǎng)試驗(yàn)為陽(yáng)性，被鑒定為乳桿菌屬細(xì)菌，除B1-4外上述各菌株在糖發(fā)酵類(lèi)型上與植物乳桿菌非常相似可能為相同的種。B1-7不分解精氨酸，45℃、6.5% NaCl、pH9.6生長(zhǎng)試驗(yàn)均為陰性，被鑒定為明串珠菌屬，B1-3、B1-6、B2-3、B4-5、B5-1、B5-2的各生理生化試驗(yàn)結(jié)果非常相似，但B1-3、B1-6、B2-3、B4-5、B5-1在糖發(fā)酵類(lèi)型上更為相似，通過(guò)生理生化試驗(yàn)暫不能將以上菌株鑒定到屬。B2-7、B2-8、B2-9、B3-1、B1-3、B2-3、B4-5、B5-1、B5-2利用葡萄糖只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，為同質(zhì)型發(fā)酵乳酸菌，B1-4、B1-6、B1-7利用葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，為異質(zhì)型發(fā)酵乳酸菌。

表1 乳酸桿菌生理生化特性

表2 乳酸球菌生理生化特性

表3 乳酸菌糖發(fā)酵結(jié)果

2.2.3 16S rRNA基因序列特征 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)12 g/L的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，12株分離乳酸菌在1 500 bp處出現(xiàn)特異性條帶，與預(yù)期擴(kuò)增大小一致說(shuō)明擴(kuò)增成功。將各菌株的16S rRNA基因測(cè)序結(jié)果在GenBank中進(jìn)行BLAST分析，各菌株與參考菌株的同源性均達(dá)到99%（表4）。菌株B1-3、B1-6、B2-3、B4-5、B5-1被鑒定為戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）、B2-7、B2-8、B2-9、B3-1被鑒定為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）、B1-4被鑒定為發(fā)酵乳桿菌（Lactobacillus fermentum）、B1-7被鑒定為腸系膜明串珠菌腸膜亞種（Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides）、B5-2被鑒定為屎腸球菌（Enterococcus faecium）。

表4 分離菌株16S rRNA序列的 BLAST分析結(jié)果

2.3 優(yōu)良乳酸菌的篩選

表5 乳酸菌分離株的產(chǎn)酸性（pH值）

2.3.1 產(chǎn)酸性試驗(yàn) 由表5可見(jiàn)，菌株B2-8產(chǎn)酸最快，接種4 h后pH降4以下，20 h后降到2.5；菌株B3-1、B1-6、B1-3次之，分別于6 h后降到4以下，20 h后降到3.0；菌株B2-9、B4-5接種8 h后pH下降到4以下，20 h后下降到3.0。以上菌株顯示了較好的產(chǎn)酸能力，具有良好的青貯潛力。菌株B1-7、B2-3、B2-7、B4-5、B5-1、B5-2產(chǎn)酸相對(duì)較慢，但20 h后降到4以下，也具有青貯潛能。

2.3.2 抑菌試驗(yàn) 抑菌試驗(yàn)結(jié)果由表6可以看出，所有測(cè)試乳酸菌分離株上清液對(duì)霉菌均無(wú)抑制作用，其中菌株B3-1抑菌譜寬，抑菌活性最佳，菌株B2-3和B2-8次之。B1-4、B2-9、B4-5、B5-2對(duì)病原細(xì)菌、霉菌、酵母菌均無(wú)抑制作用。

表6 乳酸菌分離株上清液的抑菌效果（mm）

通過(guò)產(chǎn)酸性試驗(yàn)和抑菌試驗(yàn)結(jié)果，再結(jié)合考慮青貯體系生物多樣性和菌種自身特性，初步篩選出B1-6、B1-7、B2-3、B2-8、B3-1和B5-2共6株優(yōu)良的乳酸菌，并進(jìn)一步對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行比較。

2.4 優(yōu)良乳酸菌生物學(xué)特性比較

2.4.1 生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定 由圖1可知，菌株B1-7和B5-2適應(yīng)期較短，在2 h后就進(jìn)入對(duì)數(shù)期，生長(zhǎng)速度較快，8 h后達(dá)到穩(wěn)定期。其余各菌株的適應(yīng)期較長(zhǎng)，4 h后進(jìn)入對(duì)數(shù)期，14 h后進(jìn)入穩(wěn)定期。

圖1 乳酸菌分離株的生長(zhǎng)曲線(xiàn)

2.4.2 溫度敏感試驗(yàn) 由圖2可知各菌株在培養(yǎng)溫度高于55℃時(shí)基本不再生長(zhǎng)。B3-1、B2-8、B1-6和B2-3在培養(yǎng)溫度為50℃時(shí)OD值均較初始值高，說(shuō)明上述菌株具有較強(qiáng)的耐高溫能力，B5-2次之。菌株B1-7對(duì)溫度較為敏感在培養(yǎng)溫度為45℃時(shí)基本不再生長(zhǎng)。

圖2 乳酸菌分離株經(jīng)不同溫度培養(yǎng)15 h后的OD600nm值

2.4.3 耐鹽性試驗(yàn) 由圖3可知，隨著NaCl濃度的增高各菌株的生長(zhǎng)也相應(yīng)的減弱。B1-7和B5-2在NaCl濃度為0.08 g/mL時(shí)基本不再生長(zhǎng)，其余菌株在NaCl濃度為0.1 g/mL時(shí)基本不再生長(zhǎng)。B2-3在NaCl濃度為0.08 g/mL時(shí)較初始值顯著增高，說(shuō)明其具有較強(qiáng)的耐鹽能力。

2.4.4 不同pH值生長(zhǎng)試驗(yàn) 由圖4可知培養(yǎng)基pH過(guò)高或過(guò)低均不利于菌株的生長(zhǎng)。各菌株在培養(yǎng)基pH為6時(shí)OD值最大，說(shuō)明pH6為各菌株的最佳培養(yǎng)條件。B3-1、B2-8、B1-6、B2-3和B5-2在pH為4、8、10時(shí)OD值均較初始值高說(shuō)明有較強(qiáng)的耐酸堿能力，但B1-7在pH為10時(shí)基本不再生長(zhǎng)。

圖3 乳酸菌分離株在不同NaCl含量培養(yǎng)基中培養(yǎng)15 h后的OD600nm值

圖4 乳酸菌分離株在不同pH培養(yǎng)基中培養(yǎng)15 h后的OD600nm值

3 討論

秸稈類(lèi)植物青貯過(guò)程中，其表面帶有的乳酸菌起到不可替代的作用，在青貯飼料中可能存在優(yōu)良的青貯用乳酸菌，且由于其附生于植物表面，更能適應(yīng)青貯環(huán)境。因此，從青貯飼料中分離篩選青貯用優(yōu)良乳酸菌是一條高效、快速的方法。對(duì)分離的細(xì)菌在形態(tài)特征、培養(yǎng)特征和生理生化特征的基礎(chǔ)上，結(jié)合16S rRNA基因核苷酸序列分析方法，從基因水平對(duì)其鑒定是目前較常用的一種方法［9，10］。本研究首先通過(guò)傳統(tǒng)鑒定方法將細(xì)菌鑒定到屬，部分細(xì)菌還可鑒定到種，最后通過(guò)16S rRNA基因序列分析法對(duì)上述鑒定結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證進(jìn)一步說(shuō)明了生化鑒定的準(zhǔn)確性，提高了細(xì)菌鑒定的準(zhǔn)確率。

青貯時(shí)乳酸菌通過(guò)厭氧呼吸將青貯飼料中的碳水化合物轉(zhuǎn)化為有機(jī)酸，使青貯環(huán)境的pH值下降到3.8-4.2，抑制有害菌的生長(zhǎng)，從而實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期保存飼料及其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的目的［11］。因此作為飼料添加劑的乳酸菌的產(chǎn)酸能力和產(chǎn)酸速度直接影響青貯品質(zhì)。通過(guò)產(chǎn)酸性試驗(yàn)對(duì)分離出的12株乳酸菌進(jìn)行初步篩選，菌株B2-8產(chǎn)酸能力最強(qiáng)，接種4 h后pH已降到4以下，20 h后降到2.5，說(shuō)明其能快速繁殖，創(chuàng)造酸性環(huán)境，在青貯初期具有優(yōu)勢(shì)；除B1-4外其余菌株接種20 h后pH值均能下降到3.5以下，也具有良好的青貯潛能。

青貯時(shí)一些病原細(xì)菌、霉菌、酵母均可引起青貯飼料的腐敗變質(zhì)，并且金黃色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎，大腸桿菌和沙門(mén)菌引起的畜禽腸道腹瀉等問(wèn)題至今仍未很好解決。通過(guò)抑菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，所分離的乳酸菌上清液對(duì)霉菌均無(wú)抑制作用，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果較為顯著，其中菌株B3-1抑菌譜寬，抑菌活性最佳，對(duì)供試病原細(xì)菌和酵母菌均有較好的抑菌作用，菌株B2-3和B2-8次之。本試驗(yàn)所分離的乳酸菌對(duì)于改變上述問(wèn)題提供了新的途徑。目前關(guān)于乳酸菌的抑菌機(jī)制主要認(rèn)為是以下兩方面：一是認(rèn)為乳酸菌的代謝產(chǎn)物具有抑菌作用［4］；二是乳酸菌通過(guò)伸出偽足狀絲狀物與小腸上皮細(xì)胞結(jié)合，起占位作用，從而阻擋有害菌的侵襲［12，13］。關(guān)于乳酸菌的抗真菌機(jī)制Anders等認(rèn)為植物乳桿菌的代謝產(chǎn)物3-羥基脂肪酸具有優(yōu)良的抗真菌能力。本試驗(yàn)中所分離出的植物乳桿菌發(fā)酵上清液均無(wú)抑制真菌能力其原因還有待進(jìn)一步的研究。目前青貯飼料添加劑主要是同質(zhì)型和異質(zhì)型乳酸球菌和桿菌的多菌混合應(yīng)用，這是因?yàn)槿樗崆蚓兔鞔榫谇噘A前期迅速發(fā)酵，從而為乳酸桿菌的生長(zhǎng)提供有利條件。本研究所篩選出的B1-7和B5-2生長(zhǎng)速度較快，2 h后就進(jìn)入對(duì)數(shù)期，8 h后達(dá)到穩(wěn)定期，符合上述要求。在此之后，片球菌和乳酸桿菌占主導(dǎo)地位，pH值下降到4.2以下只有乳酸桿菌大量繁殖，因此，篩選了B2-3和B1-6兩株戊糖片球菌以及B2-8和B3-1兩株植物乳桿菌。同質(zhì)型乳酸菌和異質(zhì)型乳酸菌混合應(yīng)用主要是由于同質(zhì)型發(fā)酵乳酸菌主要生成乳酸，營(yíng)養(yǎng)成分損失少，產(chǎn)酸多且快，異質(zhì)型乳酸菌除生成乳酸外還生成乙酸等有機(jī)酸和氣體，并產(chǎn)生熱量，造成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，但其產(chǎn)生的乙酸是一種比乳酸更有效的抗真菌及霉菌的酸類(lèi)物質(zhì)［14-16］，更能有效防止青貯飼料二次發(fā)酵和提高其有氧穩(wěn)定性［17］。本試驗(yàn)所篩選出的B1-6和B1-7為異型發(fā)酵乳酸菌，其余為同型發(fā)酵乳酸菌。青貯時(shí)適量的酵母可以使青貯飼料產(chǎn)生酒香味提高了青貯飼料的適口性，但是當(dāng)青貯飼料開(kāi)窖后酵母和氧氣接觸，大量繁殖并和乳酸菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)引起二次發(fā)酵破壞青貯飼料的有氧穩(wěn)定性［18］。篩選的菌株除B1-7外其余菌株均對(duì)酵母有一定的抑制作用，這對(duì)改變二次發(fā)酵問(wèn)題提供了可能。

本試驗(yàn)篩出的B1-6、B1-7、B2-3、B2-8、B3-1和B5-2共6株乳酸菌有乳酸球菌和乳酸桿菌，有同質(zhì)型乳酸菌和異質(zhì)型乳酸菌，并且篩選出的6株乳酸菌具有較好的產(chǎn)酸能力和抑菌能力，以及具有優(yōu)良的生物學(xué)特性和抗逆性，均為青貯用常見(jiàn)菌種，這對(duì)制備優(yōu)良的青貯飼料添加劑提供了可能，對(duì)于各菌株之間如何搭配以及其添加劑量的確定還需要在后續(xù)試驗(yàn)中做進(jìn)一步的研究。

4 結(jié)論

本研究成功分離出12株乳酸菌，其中桿菌5株，球菌7株。經(jīng)鑒定植物乳桿菌4株、發(fā)酵乳桿菌1株、屎腸球菌1株、腸系膜明串珠菌腸膜亞種1株、戊糖片球菌5株，其中菌株B1-4、B1-6、B1-7為異型發(fā)酵乳酸菌，其余菌株為同型發(fā)酵乳酸菌。菌株B1-6、B1-7、B2-3、B2-8、B3-1和B5-2顯示了較好的產(chǎn)酸能力和抑菌能力，具有良好的青貯潛力。

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