噴霧干燥法制備阿奇霉素掩味腸溶緩釋微球*

牟穎林

(青島骨傷醫(yī)院，青島 266021)

阿奇霉素(Azithromycin)為新一代大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，是臨床上治療支原體肺炎的首選藥物。因其抗菌譜廣、耐受性好、副作用小、療程短等優(yōu)點備受市場青睞。但阿奇霉素具有較強的苦味，常需加入大量矯味劑來掩蓋其苦味［1］。微囊、微球化是近年來研究較多的制劑新工藝，不僅可以掩蓋藥物的不良氣味，而且可以提高其穩(wěn)定性，防止藥物在胃內(nèi)失活或者減少藥物對胃的刺激性。

本文采用響應(yīng)面分析法對阿奇霉素掩味微球的制備工藝參數(shù)進行優(yōu)化，噴霧干燥法制備微球進行掩味處理［2］，操作簡單、性質(zhì)穩(wěn)定，適合于工業(yè)化大生產(chǎn)，并為不良味道藥物的掩味技術(shù)提供一個新思路。

1 儀器與試藥

T6 型新世紀(jì)紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，DIS -5 型高速離心噴霧干燥機(無錫富超噴霧干燥機械廠)，Rise -2002 激光粒度分析儀(濟南潤之科技有限公司)，RCZ-8A 型智能溶出儀(天津大學(xué)精密儀器廠)，TG328A 型分析天平(上海精科天平廠)。

聚丙烯樹脂［Eudragit L100 Degussa (China)Co Ltd］，單硬脂酸甘油酯(天津市迪博化工有限公司)，聚乙二醇(PEG -6000 山東聊城阿華制藥有限公司)，95%乙醇(煙臺三和化學(xué)試劑有限公司)，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 微球的制備方法 稱取適量阿奇霉素、Eudragit L100 溶于300 ml 的95%的乙醇中制得囊材濃度為5%的溶液。將PEG -6000 溶于少量水中，充分溶解后加入到上述乙醇溶液中，再加入單硬脂酸甘油脂，充分溶解后進行噴霧干燥，制得阿奇霉素微球［3］。

2.2 評價指標(biāo)的制定

2.2.1 檢測波長的選擇 稱取阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品于少量無水乙醇中溶解，加入0.10 mol/L 的稀鹽酸稀釋成0.05 mg/ml 的阿奇霉素溶液。精密量取5.00 ml，加入75%的濃硫酸溶液5.00 ml，振搖混勻，放置30 min，冷卻至室溫。以溶出介質(zhì)為空白，于190 ～900 nm 范圍內(nèi)進行波譜掃描，阿奇霉素在483 nm 處有最大吸收波長，且其他輔料在此處無干擾。故試驗選擇483 nm 為檢測波長。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱量30 mg 阿奇霉素標(biāo)準(zhǔn)品置50 ml 量瓶中，加少量無水乙醇溶解，0. 10 mol/L 稀鹽酸稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取2、4、6、8 和10 ml 置50 ml 量瓶中，用0.10 mol/L 稀鹽酸稀釋至刻度。精密量取待測溶液各5 ml 置10 ml 量瓶中，加75%硫酸溶液定容，搖勻，放置30 min，冷卻至室溫。以0.10 mol/L 稀鹽酸與75%硫酸溶液的混合液(1∶ 1)作空白溶液，測定吸光度，回歸方程為Y =0.0129 X+0.1223(r =0.9995)，阿奇霉素在12 ～60 μg/ml范圍具有良好的線性關(guān)系。同法得到阿奇霉素在pH 6.8 的磷酸緩沖液標(biāo)準(zhǔn)曲線為Y =0.0002 X -0.0612(r=0.9998)，在28 ～132 μg/ml 濃度范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

2.2.3 回收率試驗 稱取適量空白微球，制成空白樣品溶液。精密稱取0.05 mg 阿奇霉素，以pH 6.8 磷酸鹽緩沖液制備低、中、高三種不同濃度的溶液，測定吸光度，計算質(zhì)量。低、中、高濃度的回收率分別為101.02%、99.88%和100.23%，符合要求，其RSD 值為0.15%。

2.2.4 精密度試驗分別配制15、30 和45 μg/ml低、中、高3 個濃度的溶液，測定日內(nèi)及5 d 的日間精密度。低、中、高濃度溶液的日內(nèi)RSD 分別為0.36%、0.28%和0.35%，日間RSD 分別為0.11%、0.25%和0.19%。

2.2.5 包封率的測定 精密稱取0.05 g 阿奇霉素微球樣品置于100 ml 量瓶中，加少量乙醇并以pH 1 的稀鹽酸液定容，搖勻，溶解未包封的阿奇霉素，移取5 ml至25 ml 帶塞比色管中，加入硫酸(75→100)5.00 ml，搖勻，放置30 min 后，搖勻，以pH 1 的稀鹽酸液做對照進行紫外測定，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算未被包封阿奇霉素的量。另精密稱取等量微球樣品以pH 6.8 的緩沖液溶解，同法測定吸光度，計算微球樣品中阿奇霉素總量。

2.2.6 阿奇霉素微球掩味效果的考查 分別取阿奇霉素微球樣品適量，選擇10 名健康志愿者，品嘗微球在口腔中的口感，記錄每名志愿者的對阿奇霉素苦味的測試感受，通過苦、微苦、不苦、甜作為評價。結(jié)果發(fā)現(xiàn)微球掩味效果與包封效果一致。因此選用包封率作為掩味效果的評價指標(biāo)。

2.3 處方及工藝條件的優(yōu)化［4］

2.3.1 星點設(shè)計優(yōu)化微膠囊制備條件 通過單因素試驗確定霧化壓力(X1)、進風(fēng)溫度(X2)、進液速度(X3)是影響包封率(Y)的主要因素。用Statistica 6.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，并作出效應(yīng)面對結(jié)果進行預(yù)測，試驗因素水平及編碼見表1。

表1 星點設(shè)計因素水平表

2.3.2 星點設(shè)計實驗結(jié)果 見表2。

表2 星點設(shè)計實驗結(jié)果

2.3.3 模型建立與方差分析 分別用二項式擬合和線性擬合對表2 實驗數(shù)據(jù)進行處理。比較結(jié)果可知，用二項式擬合所得模型的r 值遠大于用線性擬合回歸所得模型的r 值，因此，選擇二項式擬合模型處理數(shù)據(jù)?；貧w方程為Y=10.636 +59.671 X1+0.242 X2+4.960 X3-412. 404 X12-0. 002 X22-0. 163 X32+1.096 X1X2-5.241 X1X3+0.009 X2X3。

根據(jù)表2，用Statistica 6.0 統(tǒng)計分析軟件進行多元回歸分析，對回歸方程進行顯著性檢驗、方差分析及各因素最佳點值分析，結(jié)果見表3。

表3 回歸方程方差分析表

各變量對效應(yīng)值影響的顯著性可由F 檢驗來判定，概率P 值越小，則相應(yīng)變量的顯著性越高。由表3可知，整體模型的P 值小于0.0001，表明該二次方程模型極顯著，相關(guān)系數(shù)r =0.9551，說明效應(yīng)值的變化有91.23%來源于所選變量。因此，回歸方程可以較好地描述各因素與效應(yīng)值之間的真實關(guān)系，可以用此方程確定最佳條件。

2.3.4 效應(yīng)面優(yōu)化與預(yù)測 應(yīng)用Statistica 6.0 軟件分別繪制阿奇霉素微球包封率與各因素的三維效應(yīng)面圖，三維圖可以直觀反映各因素間的交互作用對微球包封率的影響，結(jié)果見圖1。

綜合各圖分析可知，各參數(shù)對微膠囊包封率的影響順序為:進液速度＞霧化壓力＞進風(fēng)溫度。經(jīng)分析得，包封率最大估計值為89.8%，霧化壓力0.27 MPa，進風(fēng)溫度135 ℃，進液速度15 ml/min。

圖1 不同因素對微球包封率的效應(yīng)面的影響

2.3.5 驗證實驗 在保證包封率的情況下，根據(jù)模型的最佳工藝條件進行3 次平行驗證實驗。測得微球包封率分別為90.1%、89.8%和90.3%，平均包封率為90.1%，實驗數(shù)據(jù)與預(yù)測數(shù)據(jù)(89.6%)基本吻合，誤差在可接受范圍以內(nèi)，所得微球形態(tài)良好，基本無黏連。因此，采用星點設(shè)計效應(yīng)面法優(yōu)化得到的參數(shù)準(zhǔn)確可靠，方法可信，工藝穩(wěn)定。

2.4 微球形態(tài) 據(jù)最優(yōu)工藝制備的微球，顯微鏡下觀察形態(tài)圓整，表面光滑，粒徑小而分布較窄，形態(tài)良好，基本無黏連。見圖2。

圖2 阿奇霉素微球顯微照片

2.5 體外釋放度實驗釋放度測定按《中國藥典》2005 年版二部附錄ⅩD 第二法腸溶制劑方法進行［5］。結(jié)果見圖3。結(jié)果表明，所得微球釋放度1 h 內(nèi)小于30%，24 h 內(nèi)基本釋放完全，制劑具有緩釋作用。

圖3 體外累計釋放曲線

3 結(jié)論

本研究采用星點設(shè)計響應(yīng)面分析法優(yōu)化阿奇霉素掩味微球處方條件，得到最優(yōu)工藝參數(shù):包封率最大估計值為89.8%，霧化壓力0.27 MPa，進風(fēng)溫度135℃，進液速度15 ml/min。在最優(yōu)工藝條件下微球的載藥量和包封率均能達到較理想結(jié)果，口感無苦味。同時本研究中所涉及到的噴霧干燥法制備掩味微球方法簡單、重復(fù)性好，有利于工業(yè)化大生產(chǎn)，對苦味有良好的掩味效果，為其他苦味藥物的掩味新技術(shù)提供一定的思路和參考。

1 呂慧俠，周建平，戴影秋，等.海藻酸鈣掩味微囊的制備［J］. 中國藥科大學(xué)學(xué)報，2007，38(2):125

2 吳茂東，王永祿，周維娜，等. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化阿奇霉素掩味微囊處方工藝［J］.南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，32(5):87

3 于泮力，王洪光，王超.噴霧干燥法制備羅紅霉素掩味腸溶緩釋微球［J］.中國抗生素雜志，2011，36(8):613

4 吳偉，崔光華，陸彬.實驗設(shè)計中多指標(biāo)的優(yōu)化:星點設(shè)計和總評“歸一值”的應(yīng)用［J］.中國藥學(xué)雜志，2000，35(8):530

5 中國藥典［S］.二部.2005:附錄74 -75