人參、西洋參和紅參中糖類含量的比較研究Δ

齊 濱，劉 莉，趙大慶，趙 雨，白雪媛，張 鶴，管瑩瑩，趙姝囡（長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117）

人參是五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根，性寒，味甘、微苦，具有補(bǔ)氣、益肺、祛暑、生津之功效。西洋參為五加科植物西洋參P.quinquefolium L.的干燥根，性涼，味甘、微苦，歸心、肺、腎經(jīng)，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、清熱生津的作用，用于治療氣虛陰虧、內(nèi)熱、咳喘痰血、虛熱煩倦、消渴、口燥咽干[1]。紅參為人參的栽培品經(jīng)蒸制后的干燥根和根莖。人參和西洋參都是名貴中藥，具有很好的藥用價(jià)值。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，人參、西洋參和紅參中主要含有皂苷、糖、蛋白質(zhì)、揮發(fā)油、脂肪酸、維生素、微量元素等[2-6]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，人參、西洋參和紅參中的糖類具有免疫調(diào)節(jié)、抗補(bǔ)體、抗腫瘤、細(xì)胞保護(hù)、降血糖等活性，并對(duì)其他藥理活性起著協(xié)同調(diào)節(jié)作用[7-8]。然而，糖類在人參、西洋參和紅參中的含量一直沒有被系統(tǒng)研究過。因此，本試驗(yàn)選取人參、西洋參和紅參中的總糖、還原糖和水溶性多糖的含量進(jìn)行研究，并在此基礎(chǔ)上對(duì)不同產(chǎn)地、不同年限的人參、西洋參和紅參中的糖類含量進(jìn)行較為系統(tǒng)地分析，為其種植和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

UV-2550紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；HH-2恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；CP225 D電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；5804 R離心機(jī)（美國通用公司）；FW-400 A傾斜式萬能粉碎機(jī)（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）。

1.2 藥材

試驗(yàn)用五年、六年生人參和紅參分別購于吉林白山市長白縣和黑龍江五常市，三年、四年生西洋參購于黑龍江五常市和吉林敦化市額穆鎮(zhèn)，經(jīng)長春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院鑒定教研室姜大成教授鑒定，分別為五加科植物人參P.ginseng C.A.Mey.和五加科植物西洋參P.quinquefolium L.的干燥根，符合2010年版《中國藥典》（一部）規(guī)定。

1.3 試劑

葡萄糖對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110833-200302）；濃硫酸、濃鹽酸、乙醇、氫氧化鈉（分析純，北京化工廠）；苯酚、酒石酸鉀鈉（分析純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）；3.5-二硝基水楊酸（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法

2.1 樣品的處理

將人參、西洋參和紅參生曬品洗凈，用粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉，干燥至恒質(zhì)量。

2.2 總糖的測定[9]

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 準(zhǔn)確稱量干燥至恒質(zhì)量的葡萄糖對(duì)照品10 mg，置于10 ml量瓶中，用蒸餾水定容，制備成1 mg/ml的葡萄糖對(duì)照品溶液。取7只試管分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml葡萄糖對(duì)照品溶液，用蒸餾水補(bǔ)充至2 ml，充分混勻后再分別加入1.5 ml 3，5-二硝基水楊酸溶液，混合均勻，在沸水浴中加熱5min，立即冷卻，用紫外分光光度計(jì)于520 nm波長處測定吸光度，空白對(duì)照以蒸餾水代替糖溶液。以葡萄糖質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，吸光度（y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y＝4.9468 x+0.1974（r＝0.9950，n＝7）。結(jié)果表明，葡萄糖的質(zhì)量濃度在0.1～0.6 mg/ml范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.2.2 總糖的含量測定 按3，5-二硝基水楊酸法測定總糖含量。準(zhǔn)確稱量待測樣品0.25 g，置于50 ml試管中，加入7.5 ml蒸餾水和5 ml 6 mol/L的HCl溶液，放入沸水浴中加熱，使其水解完全。取1滴水解液置于白瓷板上，以碘-碘化鉀試劑檢查，水解液不顯藍(lán)色為水解完全。冷卻后用0.5mol/ml的NaOH溶液中和至中性，濾過，離心，上清液用蒸餾水定容至25 ml，混合均勻，按“2.2.1”項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算各樣品中總糖的含量。

2.3 還原糖的測定[9]

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 同“2.2.1”項(xiàng)下方法。

2.3.2 還原糖的含量測定 按3，5-二硝基水楊酸法測定還原糖含量。準(zhǔn)確稱量各樣品0.25g，置于50ml試管中，加入12 ml蒸餾水，在50℃恒溫水浴中加熱30 min，濾過，沉淀再加入10 ml蒸餾水加熱30 min，濾過。合并上述濾液，離心，上清液用蒸餾水定容至25 ml，混合均勻，按“2.2.1”項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算各樣品中還原糖的含量。

2.4 水溶性多糖的測定[10]

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 準(zhǔn)確稱量干燥至恒質(zhì)量的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品10 mg，置于10 ml量瓶中，用蒸餾水定容，制成1 mg/ml的葡萄糖對(duì)照品溶液。取6只試管分別加入0、0.04、0.08、0.12、0.16、0.20 ml葡萄糖對(duì)照品溶液，補(bǔ)充蒸餾水至2 ml，充分混勻后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的苯酚溶液1 ml，搖勻，迅速加入5 ml濃硫酸，搖勻，室溫放置5 min，置于沸水浴中加熱15 min，迅速冷卻至室溫，用紫外分光光度計(jì)于485 nm波長處測定吸光度，空白對(duì)照以蒸餾水代替糖溶液。以葡萄糖質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，吸光度（y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y＝0.0132 x+0.061（r＝0.9985，n＝6）。結(jié)果表明，葡萄糖的質(zhì)量濃度在0.02～0.10 mg/ml范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.4.2 水溶性多糖的含量測定 按苯酚-硫酸法[11]測定水溶性多糖的含量。準(zhǔn)確稱量各樣品0.50 g，按料液比1∶50（m/V）加入蒸餾水25 ml，于100℃水浴中浸提4 h，濾過，濾液離心，取上清液，加入乙醇使含醇量為80%，置于4℃冰箱中，放置過夜，離心，取沉淀，揮干乙醇，用50ml蒸餾水溶解，得待測樣品。按“2.4.1”項(xiàng)下方法測定吸光度，計(jì)算各樣品中水溶性多糖的含量。

3 結(jié)果與分析

不同產(chǎn)地、不同年限人參、西洋參和紅參中總糖、還原糖和水溶性多糖的含量測定結(jié)果見表1。

表1 人參、西洋參和紅參中總糖、還原糖和水溶性多糖的含量[±s（，占干質(zhì)量的百分比，%）]Tab 1 The contents of total sugar，reducing sugar and soluble polysaccharide in P.ginseng，P.quinquefolius and red ginseng[±s（，dry weight ratio，%）]

表1 人參、西洋參和紅參中總糖、還原糖和水溶性多糖的含量[±s（，占干質(zhì)量的百分比，%）]Tab 1 The contents of total sugar，reducing sugar and soluble polysaccharide in P.ginseng，P.quinquefolius and red ginseng[±s（，dry weight ratio，%）]

名稱人參人參人參人參西洋參西洋參西洋參紅參紅參年限565634456購買地吉林白山市長白縣吉林白山市長白縣黑龍江五常市黑龍江五常市黑龍江五常市黑龍江五常市吉林敦化市額穆鎮(zhèn)黑龍江五常市黑龍江五常市總糖60.23±1.5857.21±1.5757.81±1.2658.31±1.2859.40±1.2855.20±1.2856.75±1.2858.01±1.2859.76±2.01還原糖10.65±0.1711.21±0.1011.29±0.2212.45±0.573.73±0.215.43±1.016.29±0.2211.62±0.5713.21±0.21可溶性多糖11.31±0.2811.81±0.4711.45±0.2812.26±0.817.19±0.647.76±0.118.41±0.4812.62±0.3813.77±0.26

由表1可以看出，不同產(chǎn)地、不同年限的人參、西洋參和紅參中總糖的含量幾乎無差異；還原糖含量以西洋參最低，人參和紅參差別不大；可溶性多糖含量以紅參最高，人參次之。

從整體來看，還原糖含量以西洋參最低，其他樣品差別不大；可溶性多糖含量人參和紅參高于西洋參。出現(xiàn)上述含量差異的原因可能是人參、西洋參的生長環(huán)境和生長年限等共同作用的結(jié)果。

4 討論

糖是植物生長的能量和碳骨架的來源。作為植物生長發(fā)育的基礎(chǔ)物質(zhì)，糖參與調(diào)節(jié)生長發(fā)育中如種子萌發(fā)及發(fā)育、根與葉的分化、果實(shí)成熟、胚胎形成、衰老等一系列的生理活動(dòng)[12-13]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，六年生人參相比于五年生人參總糖含量有所降低，還原糖含量有所升高；四年生西洋參相比于三年生西洋參總糖含量有所降低，還原糖含量有所升高，表明這兩種糖含量受生長年限的影響；另外這也可能與人參的爛根現(xiàn)象有一定關(guān)系。紅參是人參經(jīng)過蒸制后得到的炮制品，本研究表明，紅參中糖的含量與人參基本相當(dāng)，說明經(jīng)過蒸制后人參中糖含量變化不明顯。

人參多糖能提高人體免疫力，對(duì)惡性腫瘤有一定的療效；它還有明顯的升高白細(xì)胞的作用，能夠減小放療的毒副作用。本研究表明，人參中多糖的含量高于西洋參，這可能是人參補(bǔ)脾益肺、大補(bǔ)元?dú)獾淖饔酶哂谖餮髤⒌脑蛑弧?/p>

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：122.

[2]Dou DQ，Chen YJ，Ma ZG，et al.A novel minor saponin from the leaves of Panax ginseng C.A.Meyer[J].J Chin Phar Sci，1995，5（1）：48.

[3]鄔蓉，高守紅，辛海量.人參抗輻射損傷研究概況[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2007，25（6）：364.

[4]王莉.人參與西洋參的比較鑒別[J].海峽藥學(xué)，2007，19（4）：58.

[5]許見春.人參在實(shí)際應(yīng)用中的藥理作用[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，17（4）：578.

[6]褚秀玲，蘇建青，韋旭斌.人參皂苷免疫調(diào)節(jié)和抗病毒作用研究進(jìn)展[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2008（5）：20.

[7]楊明，崔志勇，王巖，等.人參莖葉多糖的藥理作用[J].人參研究，1992（1）：34.

[8]張彬，林瑞超，馮芳.人參多糖的研究概況[J].中國藥事，2004，18（9）：566.

[9]王俊剛，張樹珍，楊本鵬.3，5-二硝基水楊酸法測定甘蔗莖節(jié)中總糖和還原糖含量[J].甘蔗糖業(yè)，2008（5）：45.

[10]李輝，羅佳波.苯酚-硫酸法測定圍樂顆粒中總多糖的含量[J].中國藥房，2008，19（9）：685.

[11]鐘巖，潘浦群，王艷紅.苯酚-硫酸法測定鮮人參中多糖含量[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2008，19（8）：1957.

[12]喻方圓，徐錫增.植物逆境生理研究進(jìn)展[J].世界林業(yè)研究，2003，16（5）：6.

[13]尹恒，王文霞，趙小明，等.植物糖生物學(xué)研究進(jìn)展[J].植物學(xué)報(bào)，2010，45（5）：521.