超聲檢測老年乳腺浸潤性癌患者阻力指數(shù)與術(shù)后組織中碳酸酐酶-Ⅸ、血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的關(guān)系

吳梓芳 許軍麗 (武漢大學(xué)校醫(yī)院超聲科，湖北 武漢 430079)

研究顯示乳腺浸潤性癌發(fā)生中血管生成相對于正常組織來說明顯增多〔1〕，因此應(yīng)用相關(guān)輔助檢查檢測術(shù)前血流相關(guān)指標(biāo)，可能對診斷有一定意義。臨床上觀察血流最簡便而無創(chuàng)的是彩色多普勒超聲檢測阻力指數(shù)(RI)值〔2〕。乳腺浸潤性癌進(jìn)展過程中也是一種在分子水平上具有高度異質(zhì)性的腫瘤，在進(jìn)展中出現(xiàn)多種基因和蛋白的變化。碳酸酐酶(CA)-IX是含鋅酶，能可逆性地催化二氧化碳和水生成碳酸，其在消化道、膽囊等組織中可表達(dá)，但是在正常乳腺導(dǎo)管和小葉上皮細(xì)胞中不表達(dá)。多種腫瘤組織中CA-Ⅸ高表達(dá)，可能與缺氧性反應(yīng)有關(guān)，CA-Ⅸ高表達(dá)時可以降低細(xì)胞周圍的pH值，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，在腫瘤細(xì)胞增生、血管生成、腫瘤性轉(zhuǎn)化和適應(yīng)低氧環(huán)境中發(fā)揮作用〔3，4〕。本文關(guān)注超聲檢測的RI值與術(shù)后組織中CA-Ⅸ和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的關(guān)聯(lián)性。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2010～2012年我院確診為乳腺浸潤性癌的老年患者99例作為觀察組，均為女性，年齡60～85(平均67.7)歲。收集患者術(shù)前的超聲RI值。均行乳腺癌根治術(shù)，并依術(shù)后病理學(xué)進(jìn)行分類，標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格符合WHO的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 超聲檢測方法 使用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率7.5～10 MHz，患者取仰臥位，在乳腺各象限作縱橫切掃查，觀察有無異?；芈晠^(qū)，對腫瘤區(qū)在常規(guī)觀察基礎(chǔ)上重點(diǎn)觀察血流情況，計算RI。

1.3 蛋白的檢測及判斷方法 CA-Ⅸ、VEGF、雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、Ki67蛋白均為濃縮型兔抗人多克隆抗體，通過福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司代購。應(yīng)用免疫組化Max Vision法檢測蛋白的表達(dá)，應(yīng)用DAB顯色。操作均由主管技師完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制。CA-Ⅸ以明確的細(xì)胞膜著色為陽性，VEGF以明確的細(xì)胞質(zhì)著色為陽性，ER、PR、Ki67以明確的細(xì)胞核著色為陽性。CA-Ⅸ和VEGF均計數(shù)5個腫瘤細(xì)胞密集區(qū)的細(xì)胞，取陽性細(xì)胞百分率的平均值，以陽性細(xì)胞＞25%為陽性，以陽性細(xì)胞≤25%為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析和相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 觀察組RI值與CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)陽性率的關(guān)系 觀察組不同RI值與CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)的陽性率差異顯著(P＜0.01)。見表1。

2.2 RI值、CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)陽性率在觀察組不同臨床特征中的差別 觀察組RI值、CA-Ⅸ和VEGF的表達(dá)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤最大直徑、脈管浸潤、ER、PR和Ki67的表達(dá)密切相關(guān)(P＜0.05)。見表2。

2.3 觀察組中RI值與CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)的關(guān)聯(lián)性分析 RI值與CA-Ⅸ表達(dá)(r=0.47，P=0.024 1)、RI值與 VEGF 表達(dá)(r=0.48，P=0.020 9)、CA-Ⅸ與 VEGF 表達(dá)(r=0.51，P=0.014 7)均具有正相關(guān)性。

表1 觀察組RI值與CA-Ⅸ和VEGF陽性表達(dá)的關(guān)系(s，%)

表1 觀察組RI值與CA-Ⅸ和VEGF陽性表達(dá)的關(guān)系(s，%)

RI值 n CA-ⅨVEGF

表2 RI值、CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)陽性率在觀察組不同臨床特征中的差別(s)

表2 RI值、CA-Ⅸ和VEGF表達(dá)陽性率在觀察組不同臨床特征中的差別(s)

臨床病理特征 n RI值 t值 P值 CA-Ⅸ(%)t值 P值 VEGF(%)t值 P值腫瘤最大直徑 ≤2 cm 52 7.08±2.54 8.74 0.026 5 60.47±10.97 7.960.029 3 57.77±11.65 6.77 0.032 0＞2 cm 47 9.98±4.76 79.56±13.89 69.59±9.60淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無 65 7.36±2.34 8.39 0.028 5 61.24±17.97 7.58 0.030 2 54.15±13.59 8.74 0.014 6有 34 9.78±2.31 80.76±17.53 71.47±15.47脈管浸潤 無 69 7.39±2.32 9.86 0.012 4 61.58±11.25 8.75 0.018 3 54.13±11.53 8.35 0.018 4有 30 10.23±3.87 87.79±13.42 72.45±13.44 ER ＞25% 59 7.53±2.31 7.68 0.030 2 61.25±10.86 7.30 0.032 9 63.14±10.57 7.30 0.024 1≤25% 40 9.64±2.69 78.61±11.41 70.46±13.45 PR ＞25% 54 7.92±2.32 7.43 0.032 4 64.36±12.36 7.86 0.028 5 56.16±8.91 7.10 0.021 0≤25% 45 9.76±2.34 78.78±11.75 69.45±8.60 Ki67 ≤25% 50 6.96±2.61 10.24 0.009 5 62.65±13.71 7.20 0.022 0 58.98±9.07 6.96 0.029 3＞25% 49 10.65±2.56 76.76±11.68 68.50±11.65

3 討論

應(yīng)用超聲在手術(shù)前對老年人乳腺浸潤性癌進(jìn)行判斷有重要意義，不僅可以評估腫瘤的生物學(xué)行為，還可以依據(jù)不同老年患者的身體情況進(jìn)行恰當(dāng)?shù)闹委?。超聲對腫瘤的血流能較好地反映出來。在腫瘤發(fā)生時，尤其是腫瘤血管生成前期，腫瘤常較小，血管生成少，各種檢測血管的指標(biāo)表達(dá)均不理想。而隨著腫瘤的進(jìn)展迅速增大，血管生成加速，進(jìn)入到明顯的腫瘤血管化期，此時影像學(xué)檢測血流的指標(biāo)較容易，對腫瘤的判斷價值更理想〔5，6〕。從腫瘤生長及生物學(xué)行為角度分析，腫瘤惡性程度越高，增殖指數(shù)越高，生長就越快，增大的速度也越快。當(dāng)腫瘤增長的速度超過其脈管系統(tǒng)的蔓延能力時，由缺氧誘導(dǎo)因子調(diào)控的CA-Ⅸ表達(dá)增強(qiáng)活力〔7〕，使適應(yīng)缺氧環(huán)境的腫瘤細(xì)胞表型更容易存活并為了存活而更易于獲得侵襲轉(zhuǎn)移的潛能，這同時解釋了CA-Ⅸ的表達(dá)與腫瘤體積及腫瘤血管生成的相關(guān)性〔8，9〕。本實(shí)驗(yàn)提示CA-Ⅸ和VEGF的表達(dá)與超聲檢測的RI值具有很高的一致性。由于VEGF是直接反映腫瘤血管生成的指標(biāo)〔10〕，而CA-Ⅸ與VEGF有協(xié)同作用，因此RI值可以無創(chuàng)性地反映腫瘤血管生成情況，對判斷腫瘤內(nèi)部的血管情況提供重要依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)也顯示RI值、CA-Ⅸ和VEGF的表達(dá)均與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤最大直徑、脈管浸潤、ER、PR和Ki67的表達(dá)密切相關(guān)。由于以上因素均直接反映了腫瘤的生物學(xué)行為，因此，RI值可以部分地反映腫瘤的進(jìn)展，即RI值越高，腫瘤侵襲性越強(qiáng)，腫瘤的血管生成越豐富，腫瘤的預(yù)后越差〔11〕。應(yīng)用超聲檢測RI值是無創(chuàng)性評價腫瘤指標(biāo)的客觀標(biāo)志，也為制訂治療方案提供了重要價值，尤其是體質(zhì)條件差的不能進(jìn)行手術(shù)的老年患者?？傊?，術(shù)前對乳腺浸潤性癌患者積極應(yīng)用超聲學(xué)檢測RI值與術(shù)后組織中CA-Ⅸ和VEGF的表達(dá)具有相關(guān)性，RI值可以部分地反映出CA-Ⅸ和VEGF的表達(dá)特點(diǎn)，術(shù)前RI值檢測可能在一程度上預(yù)測患者預(yù)后，早期判斷腫瘤性質(zhì)。

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