血清M30 水平與丙型肝炎引起的并發(fā)癥相關(guān)研究

龔艷容 陳 娜 張幸國(guó)

(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院,浙江 杭州 310003)

近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)在非酒精性脂肪肝和丙型肝炎患者血清中,M30 含量顯著升高,且M30 能比轉(zhuǎn)氨酶更為敏感地表征這兩種疾病[1],然而在慢性丙型肝炎患者中,丙型肝炎病毒感染引起的肝纖維化、脂肪化等并發(fā)癥是否與M30 水平有關(guān)卻研究甚少,本文的目的是研究丙型肝炎患者血清M30 水平與丙型肝炎并發(fā)癥的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取200例本院2012年1月～2013年1月未經(jīng)治療的丙型肝炎(CHC)患者,其中男125例,女75例,年齡25～68歲,平均(36.8±12.5)歲;選取健康對(duì)照者100例。按是否感染丙型肝炎分為2組：丙型肝炎組200例;健康對(duì)照組100例。肝活檢標(biāo)本與血清均來(lái)源于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院。

1.2 試劑與儀器 M30-Apoptosense ELISA 試劑盒(Peviva AB,瑞典)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 慢性丙型肝炎定義為在患者血清中檢測(cè)到HCV RNA 為確診標(biāo)準(zhǔn)[1];血清M30 水平檢測(cè)按照M30-Apoptosense ELISA 試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟操作,在450nm 處讀取吸光值,計(jì)算血清中M30的水平：丙型肝炎患者肝組織活檢由專(zhuān)業(yè)的病理科醫(yī)生進(jìn)行METAVIR 纖維化分級(jí)[2](F0-F4)。肝組織炎癥評(píng)分采取HAI 系統(tǒng)[3](輕微0～5分,中度6～10分,重度11～16分),肝脂肪化分級(jí)根據(jù)含脂肪小滴的肝細(xì)胞百分比決定(0 為＜3%,1 為3%～30%,2 為31%～59%;3 為＞59%);測(cè)定選取的丙型肝炎患者血清M30 水平,同時(shí)對(duì)該丙型肝炎患者的肝組織進(jìn)行病理評(píng)估,評(píng)估其脂肪化程度、纖維化程度及炎癥評(píng)分。

2 結(jié)果

2.1 丙型肝炎患者血清M30 水平與肝活檢結(jié)果丙型肝炎組M30 水平(298±70.8)U/L,顯著高于健康對(duì)照組(135±33.8)U/L(P＜0.01),且丙型肝炎患者組肝組織活檢發(fā)現(xiàn)不同程度的脂肪變性,纖維化和炎癥反應(yīng),詳見(jiàn)表1。

2.2 丙型肝炎患者血清M30 水平與肝脂肪化程度、肝纖維化程度和肝炎癥狀況的關(guān)系 檢測(cè)丙型肝炎患者血清M30 水平和對(duì)應(yīng)的肝脂肪化程度,結(jié)果隨著肝脂肪化程度的加深,相應(yīng)的M30 水平也上升,0 級(jí)為(226±46.9)U/L,1 級(jí)為(279±80.4)U/L,2 級(jí)為(368±31.2)U/L,3 級(jí)為(387±20.4)U/L,0級(jí)、1 級(jí)與2 級(jí)、3 級(jí)相比,M30 水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,2～3 級(jí)為(377±25.1)U/L,0～1 級(jí)為(249±61.4)U/L(P＜0.05),詳見(jiàn)表2。同樣,隨著肝纖維化程度的加深,相應(yīng)的M30 水平也上升,F0 為(235±26.1)U/L,F1 為(252±60.3)U/L,F2 為(348±50.9)U/L,F3 為(385±31.2)U/L,F4 為(368±40.1)U/L,丙型肝炎患者M(jìn)30 水平和肝纖維化有關(guān),F2-F4(364±38.7)U/L 顯著高于F0-F1(243±46.8)U/L(P＜0.05),詳見(jiàn)表3。然而,丙型肝炎患者M(jìn)30 水平和相應(yīng)的肝組織HAI 評(píng)分無(wú)關(guān),輕微炎癥為(277±66.9)U/L,中度炎癥為(311±42.3)U/L,重度炎癥為(303±70.1)U/L,這說(shuō)明丙型肝炎患者M(jìn)30 水平與肝組織炎癥程度無(wú)關(guān)(P＞0.05),詳見(jiàn)表4。

表2 丙型肝炎患者肝脂肪化與血清M30 水平比較(±s)

表2 丙型肝炎患者肝脂肪化與血清M30 水平比較(±s)

表3 丙型肝炎患者肝纖維化與血清M30 水平比較(±s)

表3 丙型肝炎患者肝纖維化與血清M30 水平比較(±s)

表4 丙型肝炎患者肝炎癥評(píng)分與血清M30 水平比較(±s)

表4 丙型肝炎患者肝炎癥評(píng)分與血清M30 水平比較(±s)

3 討論

本文的研究發(fā)現(xiàn)了丙型肝炎患者,血清M30 水平顯著高于健康人群,并且當(dāng)丙型肝炎患者肝纖維化和脂肪化程度因?yàn)镠CV 感染影響出現(xiàn)并加深的時(shí)候,血清中M30 水平會(huì)顯著上升,但M30 水平和丙型肝炎患者肝組織炎性變化無(wú)關(guān),這可能是因?yàn)楸透窝撞《境四苷T導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡之外,還可引起肝細(xì)胞壞死性炎癥,而肝細(xì)胞的壞死不能引起caspase 的激活,因此M30 水平不上升,然而遺憾的是,至今血清學(xué)檢測(cè)肝細(xì)胞壞死性炎癥的檢測(cè)手段仍然十分有限[4]。有文獻(xiàn)報(bào)道,凋亡和HCV 感染引起的肝脂肪變性有關(guān)[5],當(dāng)用M30 水平來(lái)表示肝細(xì)胞的凋亡時(shí),M30 水平隨著肝脂肪化程度的加深而升高,這與本文的研究結(jié)果相一致。這些研究證實(shí)了檢測(cè)丙型肝炎患者血清M30 水平對(duì)監(jiān)測(cè)丙型肝炎患者肝纖維化程度和脂肪化程度有十分重要的價(jià)值,減輕了肝組織活檢對(duì)患者帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)和痛苦。

已經(jīng)有很多文獻(xiàn)證實(shí)對(duì)于非酒精性肝脂肪化疾病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD),肝細(xì)胞凋亡在脂肪性肝炎的疾病進(jìn)展和肝損傷中發(fā)揮重要作用,M30 水平已經(jīng)被報(bào)道可以用來(lái)鑒別單純性脂肪肝和脂肪性肝炎[6],并用來(lái)判斷非酒精脂肪性肝炎的肝纖維化程度[7],因此肝細(xì)胞凋亡的特異性標(biāo)志物M30 十分有希望成為監(jiān)測(cè)該類(lèi)疾病的重要指標(biāo)。本文結(jié)果顯示血清M30 水平可以判斷丙型肝炎患者的肝纖維化、脂肪化程度,對(duì)比肝組織活檢,檢測(cè)肝病患者血清M30 更加快速和安全,這對(duì)減輕諸如丙型肝炎,非酒精脂肪性肝炎等多種肝病患者的痛苦具有十分重大的意義。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì),中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì).丙型肝炎防治指南.中華傳染病雜志,2004,22(2)：121

[2]Theise N D,Bordenheimer H C,Ferrel L D.2007 Acute and chronic viral hepatitis.Mac Sweens Pathology of the liver,2007,8(5)：418

[3]Knodell R G,lshak K G,Black W C.et al,Formulation and application of a numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis.Hepatology,1981,1(5)：431

[4]Cheong J Y,Kim Cho S W,et al.Serum markers for necroinflammatory activity in patientswith chronic viral hepatitis and normal or mildly elevated aminotransferase levels.Liver Int,2011,31(9)：1352

[5] Papatheodoridis G V,Hadziyannis E,Tsochatzis E,et al.Serum apoptotic caspase activity in chronic hepatitis C and nonalcoholic fatty liver disease.J Clin Gastroenterol,2010,44(4)：87

[6]董秋艷,韓濤,郭震,等.非酒精性脂肪肝患者血清CK-18 M30水平的測(cè)定.天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,17(4)：486

[7]Ounossi Z M,Jarrar M,Nugent C,et al.A noveldiagnostic biomarker panel for obesity-related nonaloholic,steatohepatitis(NASH).Obes Surg,2008,18(11)：1430