溴甲酚綠與溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液顯現(xiàn)潛血印痕的比較

王躍

（北京警察學(xué)院 公安科技系，北京 102202）

傳統(tǒng)的顯現(xiàn)技術(shù)主要使用聯(lián)苯胺，聯(lián)苯胺顯現(xiàn)血指紋靈敏度很高，但有很強(qiáng)的致癌性，已被新研制無毒的四甲基聯(lián)苯胺所取代。四甲基聯(lián)苯胺能夠?qū)撗讣y顯現(xiàn)成為藍(lán)綠色，是國內(nèi)、外最常用的血指紋顯現(xiàn)方法。但是，四甲基聯(lián)苯胺對非滲透客體表面潛血印痕容易造成擴(kuò)散現(xiàn)象，影響細(xì)節(jié)特征；且四甲基聯(lián)苯胺使用涂抹方法，不適用于血痕量多、面積較大現(xiàn)場使用。

而溴甲酚綠、溴甲酚藍(lán)與四丁基碘化銨酒精溶液，既能有效顯現(xiàn)出傳統(tǒng)滲透客體表面血潛印痕，又能有效顯現(xiàn)出非滲透客體表面的血潛印痕。該技術(shù)適用客體廣泛、操作簡便、價格低、安全環(huán)保。對血潛印痕反應(yīng)敏感（目前已經(jīng)測試1/1000濃度的血潛印痕），顯出紋線反差大、清晰連貫、認(rèn)定質(zhì)量高；并且對四甲基聯(lián)苯胺處理后潛血印痕有較好的增強(qiáng)效果，具有較高的研究價值。

溴甲酚綠、溴甲酚藍(lán)酒精顯現(xiàn)液顯現(xiàn)潛血印痕的主要原理是：血液中含有大量的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞，細(xì)胞膜也有蛋白質(zhì)和磷脂組成，相應(yīng)的血潛印痕中存在著大量的蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)是由氨基酸多步縮合而成復(fù)雜的大分子，其分子中含有大量的氨基和羧基，氨基和羧基可以使蛋白質(zhì)帶有大量的正、負(fù)電荷，這些電荷與溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)中側(cè)鏈（鈉鏈）的電荷相互吸附，進(jìn)而發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成綠色穩(wěn)定的絡(luò)合物，從而將血潛印痕顯現(xiàn)出來，而溴甲酚綠、溴甲酚藍(lán)在溶劑四丁基碘化銨作用下，淺綠色背景顏色容易被無水乙醇溶液清洗，有效增強(qiáng)背景反差。

1 材料與方法

1.1 儀 器

溴甲酚綠、溴甲酚藍(lán)（北京化工廠）、四丁基碘化銨（北京化工廠）、無水乙醇（北京化學(xué)試劑公司）、四甲基聯(lián)苯胺（北京化工廠）、30%過氧化氫（北京化工廠）、蒸餾水；人血；脫脂棉；Nikon D80 相機(jī)、Nikon 60mm微距鏡頭；燒杯；玻璃棒；滴管；霧化器；瓷磚、塑料、報紙、牛皮紙、點(diǎn)滴板。

1.2 血液

血液樣本來自匿名的捐贈者。所有設(shè)備用于提取、存儲血的實驗器材都是無菌條件下，所用于實驗和陽性對照血液都是無菌包裝，血液沒有受到任何形式的抗凝血劑或其他污染物。

1.3 顯現(xiàn)液配制

潛血印痕的醇基溶液有三種：無水乙醇固定液、顯現(xiàn)液、無水乙醇沖洗液。

顯現(xiàn)液

步驟1稱取1g溴甲酚綠和1g溴甲酚藍(lán)、1g四丁基碘化銨，倒入容量為2 000ml的燒杯中；

步驟2量取750ml無水乙醇倒入上述燒杯中；

步驟3量取250ml蒸餾水倒入上述燒杯中用玻璃棒攪拌，溶液呈黃色透明溶液即可；

步驟4將配制好的顯現(xiàn)液倒入干凈的深色磨砂玻璃瓶中，可以長期保存。

1.4 樣本制作

分別把無菌血液稀釋為原血（100%）、1∶10、1∶100、1∶1000；滲透客體靈敏檢測使用無菌脫脂棉簽，分別浸蘸上述樣品血液，涂抹在手指表面，捺印在復(fù)印紙上，每種濃度50枚，自然晾干；非滲透客體選擇經(jīng)高溫消毒的白色陶瓷點(diǎn)滴板，使用滴管吸取上述樣品血液，點(diǎn)滴50次，自然晾干。

1.5 操作步驟

在使用顯現(xiàn)液顯現(xiàn)、增強(qiáng)血潛印痕之前，應(yīng)將可以看到的血印痕拍照下來。

步驟1將無水乙醇盛入霧化噴瓶；

步驟2打開霧化噴瓶在高約50～60cm處均勻噴涂遺留有潛血印痕的表面，噴涂2～3次，確保噴涂均勻，固定充分，保持浸潤狀態(tài)；

步驟3將溴甲酚綠顯現(xiàn)液盛入霧化噴瓶；

步驟4打開霧化噴瓶在高約50～60cm處均勻噴涂遺留有潛血印痕的表面，噴涂2～3次，確保噴涂均勻，反應(yīng)充分；

步驟5將沖洗液無水乙醇盛入霧化噴瓶；

步驟6打開霧化噴瓶在高約50～60cm處均勻噴涂遺留有潛血印痕的表面，可噴涂2～3次，確保噴涂均勻，沖洗充分，1min左右顯現(xiàn)綠色紋線。

步驟7使用棉紙吸干多余殘液，也可以使用吸瓶處理；

步驟8拍照記錄。

復(fù)印紙和點(diǎn)滴板上樣本經(jīng)顯現(xiàn)液噴涂之后，立即有藍(lán)綠色紋線出現(xiàn)，經(jīng)無水乙醇清洗后，手印紋線清晰連貫，背景反差明顯（見表1）。

表1 溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)酒精溶液潛血印痕顯現(xiàn)的靈敏性

1.6 與四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)效果交叉比較

1.6.1 樣本制作

使用無水乙醇的脫脂棉擦拭手指后5min，蘸上血液，使用連續(xù)5次在白色瓷磚、塑料、復(fù)印紙、牛皮紙表面捺印，形成潛血手印樣本；白色瓷磚、塑料騎縫捺印，復(fù)印紙、牛皮紙從中間剪開，以便溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液與四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)液分別使用顯現(xiàn)，比較顯現(xiàn)效果。

1.6.2 四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)液配制

四甲基聯(lián)苯胺1g溶于100ml無水乙醇，加入30%過氧化氫2ml。

1.6.3 操作步驟

將左半側(cè)指紋使用溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液顯現(xiàn)，右半側(cè)使用四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)；右半側(cè)指紋四甲基聯(lián)苯胺處理后，拍照記錄干燥后，使用溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液再處理。

第一，溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)酒精顯現(xiàn)液顯現(xiàn)操作步驟依照（見上1.5）操作。

第二，四甲基聯(lián)苯胺操作步驟

步驟1將四甲基聯(lián)苯胺溶液點(diǎn)注在脫脂棉上；

步驟2用脫脂棉輕擦潛血手印部位；

步驟3拍照記錄

第三，溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)酒精顯現(xiàn)液增強(qiáng)四甲基聯(lián)苯胺處理后的樣本操作步驟依照（見上1.5）操作。

2 結(jié)果

白色瓷磚、塑料、復(fù)印紙、牛皮紙捺有潛血手印部位噴涂溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液后即有藍(lán)綠色手印紋線出現(xiàn)，使用無水乙醇清洗后，紋線清晰連貫、背景反差明顯，滲透客體和非滲透客體表面顯現(xiàn)效果均較好；四甲基聯(lián)苯胺處理后，2～3min藍(lán)綠色的紋線漸漸出現(xiàn)，約5min后達(dá)到最強(qiáng)，滲透客體復(fù)印紙、牛皮紙上手印紋線效果較好，非滲透客體瓷磚、塑料有藍(lán)綠色背景；經(jīng)四甲基聯(lián)苯胺處理瓷磚、塑料、復(fù)印紙、牛皮紙的檢材，經(jīng)溴甲酚綠和溴甲酚藍(lán)顯現(xiàn)液再處理后，藍(lán)綠色紋線立即得到增強(qiáng)，反差更為明顯（見圖 1～8）。

圖1 白色瓷磚

圖2 白色瓷磚

圖3 塑料

圖4 塑料

圖5 復(fù)印紙

圖6 復(fù)印紙

圖7 牛皮紙

圖8 牛皮紙

3 結(jié)論

溴甲酚綠、溴甲酚藍(lán)與四丁基碘化銨酒精溶液顯現(xiàn)法能夠作為潛血印痕新型顯現(xiàn)技術(shù)，既能夠有效顯現(xiàn)滲透和非滲透客體表面潛血印痕，也能夠作為四甲基聯(lián)苯胺的后處理和增強(qiáng)試劑，具有較大應(yīng)用推廣價值。