Kai1蛋白的表達(dá)與不同類型癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

張素素，郭瑞珍，邊 可，汪秋鴻

(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)1.2008級臨床醫(yī)療系，2.病理學(xué)教研室,廣東 珠海 519041)

Kai1蛋白的表達(dá)與不同類型癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

張素素1，郭瑞珍2，邊 可1，汪秋鴻1

(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)1.2008級臨床醫(yī)療系，2.病理學(xué)教研室,廣東 珠海 519041)

目的探討Kai1蛋白與不同類型癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。方法采用免疫組織化學(xué)SP法分別檢測35例皮膚基底細(xì)胞癌(BCC)、18例皮膚鱗狀細(xì)胞癌(SCC)、46例乳腺癌和64例大腸癌組織中Kai1蛋白的表達(dá)；利用計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)采集、分析圖像，并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果①Kai1蛋白在皮膚BCC和SCC中的表達(dá)分別呈陽性和陰性或弱陽性， BCC組的表達(dá)顯著高于SCC組(P﹤0.01)；②Kai1蛋白在沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌、大腸癌中均呈陽性表達(dá)，而在有轉(zhuǎn)移的乳腺癌、大腸癌中均呈弱陽性或陰性表達(dá)，無轉(zhuǎn)移組的表達(dá)均顯著高于有轉(zhuǎn)移組，均有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.01)。結(jié)論①與SCC組比較，Kai1蛋白的高表達(dá)可能與BCC幾乎不發(fā)生轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性有關(guān)；②乳腺癌和大腸癌中Kai1蛋白的低表達(dá)，可能與轉(zhuǎn)移有關(guān)。

癌；Kail；轉(zhuǎn)移

1995年Dong等[1]在研究前列腺癌時首先發(fā)現(xiàn)Kail基因，該基因曾一度被認(rèn)為是前列腺癌的特異性轉(zhuǎn)移抑制基因。后有研究報道，Kai1的異常表達(dá)與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[2-3]，被認(rèn)為是近年發(fā)現(xiàn)的新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，較多的研究認(rèn)為Kail的低表達(dá)是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的指征，Kail表達(dá)水平與腫瘤轉(zhuǎn)移潛能呈負(fù)相關(guān)[4]。本組通過檢測Kai1蛋白在基底細(xì)胞癌(BCC)、鱗狀細(xì)胞癌(SCC)、乳腺癌和大腸癌中的表達(dá)，探討Kai1與不同來源腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 受檢標(biāo)本 收集遵義醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院和第五附屬醫(yī)院病理科2005年1月至2008年12月的外檢石蠟包埋標(biāo)本，連續(xù)4 μm厚切片，每例4張，備用。常規(guī)HE染色，光鏡觀察，確診。所有病例術(shù)前均未經(jīng)放、化療。

1.1.1 皮膚BCC和SCC組 皮膚BCC組35例，平均年齡66歲；頭面部30例，胸部2例，頸部、背部及腹部各1例。SCC組18例，平均年齡63歲；頭面部10例，上肢、頸部、腹部各1例，下肢5例。

1.1.2 乳腺癌組 經(jīng)手術(shù)切除，組織學(xué)確診，分為有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩組：有轉(zhuǎn)移的18例中，平均年齡49歲，組織學(xué)類型包括有浸潤性導(dǎo)管癌、導(dǎo)管內(nèi)癌，臨床表現(xiàn)同側(cè)腋窩淋巴結(jié)腫大(1枚～數(shù)枚)。無轉(zhuǎn)移的28例中，平均年齡49歲。組織學(xué)類型包括有浸潤性導(dǎo)管癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、浸潤性小葉癌。

1.1.3 大腸癌組 經(jīng)手術(shù)切除，組織學(xué)確診，分為有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩組：有轉(zhuǎn)移組22例，平均年齡56歲；直腸癌8例，結(jié)腸癌14例，臨床手術(shù)見局部淋巴結(jié)或遠(yuǎn)隔淋巴結(jié)腫大。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組42例，平均年齡63歲；直腸癌13例，結(jié)腸癌29例。組織學(xué)類型包括有乳頭狀腺癌、管狀腺癌、黏液/印戒細(xì)胞癌。

1.2 試劑 多克隆抗體Kai1(兔抗人)、S-P免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒均購自武漢博士德公司。

1.3 免疫組化染色(SP法) 用前列腺增生組織作陽性對照，以PBS代替一抗為空白對照。切片經(jīng)過脫蠟和微波抗原修復(fù)后，實驗和操作按試劑盒說明書進(jìn)行，經(jīng)DAB顯色，蘇木素復(fù)染，透明，中性樹膠封片。

1.4 結(jié)果判定 以腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)和胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為Kai1蛋白陽性表達(dá)，陽性表達(dá)評分標(biāo)準(zhǔn)以陽性細(xì)胞數(shù)和染色強(qiáng)度記分的乘積來判定，以半定量標(biāo)準(zhǔn)平均灰度值表示定級標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 BCC和SCC組 Kai1蛋白在BCC組織中呈陽性或弱陽性表達(dá)， 在SCC組織中呈陰性或弱陽性表達(dá)，BCC組的表達(dá)均顯著高于SCC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.01)(見圖1、表1)。

注： A:在基底細(xì)胞癌中的陽性表達(dá)；B:在鱗狀細(xì)胞癌中的弱陽性表達(dá)。 圖1 基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌中Kai1蛋白的表達(dá)(IHC×400)

2.2 乳腺癌組 Kai1蛋白在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中呈弱陽性或陽性表達(dá)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌組織中呈陰性或弱陽性表達(dá)。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.01)(見圖2、表1)。

注： A：在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中的陽性表達(dá)；B：在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中的陰性表達(dá)。 圖2 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中Kai1蛋白的表達(dá)(IHC ×400)

2.3 大腸癌組 Kai1蛋白在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中呈弱陽性或陽性表達(dá)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌組織中呈陰性或弱陽性表達(dá)，前一組表達(dá)明顯高于后一組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.01)(見圖3、表1)。

注： A:在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中的陽性表達(dá)；B:在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中的陰性表達(dá)。 圖3 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中Kai1蛋白的表達(dá)(IHC ×400)

組 別例數(shù)Kai1蛋白的表達(dá)PAODBCC組350．176±0．0730．30±0．026SCC組180．049±0．061?0．19±0．043?無轉(zhuǎn)移乳腺癌組280．227±0．0590．287±0．031有轉(zhuǎn)移乳腺癌組180．076±0．042#0．225±0．026#無轉(zhuǎn)移大腸癌組420．225±0．0480．287±0．033有轉(zhuǎn)移大腸癌組220．114±0．053??0．226±0．015??

注：PA代表陽性面積/分析區(qū)域面積；OD代表光密度；VS BCC 組比較，*Plt;0.01；VS無轉(zhuǎn)移乳腺癌組比較，#Plt;0.01；VS無轉(zhuǎn)移大腸癌組比較，**Plt;0.01。

3 討論

Kail基因與皮膚腫瘤:同源于皮膚的BCC和SCC均是惡性腫瘤，但是，在生物學(xué)行為上兩種腫瘤有著截然不同的表現(xiàn)，SCC浸潤轉(zhuǎn)移能力很強(qiáng)，而BCC卻幾乎不發(fā)生轉(zhuǎn)移。本研究針對BCC和SCC兩種腫瘤不同轉(zhuǎn)移潛能的生物學(xué)行為進(jìn)行對比性研究發(fā)現(xiàn)，BCC組Kai1蛋白的表達(dá)明顯高于SCC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.01)。這提示：BCC生長緩慢及極少轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性可能與Kai1的高表達(dá)有關(guān)。反之，Kai1蛋白在SCC中的低表達(dá)可能與SCC轉(zhuǎn)移易感性增強(qiáng)有關(guān)。也提示：在來源相同的不同轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤組織中，Kai1蛋白表達(dá)的強(qiáng)度不盡相同，Kai1表達(dá)強(qiáng)度影響腫瘤轉(zhuǎn)移的能力。目前，Kai1基因與皮膚腫瘤在(黑色素瘤)浸潤轉(zhuǎn)移方面的作用有不同的結(jié)果，在鼠黑色素瘤的研究中認(rèn)為Kail與轉(zhuǎn)移抑制相關(guān)[5]，而在人黑色素瘤的研究中認(rèn)為Kail與轉(zhuǎn)移抑制無關(guān)[6]。不同的研究結(jié)果，可能與研究對象種屬的不同有關(guān)，不同種屬其基因所起的作用可能也有差異。

Kai1基因與乳腺癌和大腸癌:Kai1基因與乳腺癌的相關(guān)性研究在本世紀(jì)初由最初的對體外細(xì)胞系的研究，逐步進(jìn)入對人乳腺癌的研究，研究結(jié)果都體現(xiàn)了Kai1蛋白在乳腺癌中發(fā)揮了腫瘤轉(zhuǎn)移抑制功能。Kail基因與大腸癌的研究表明，Kail基因?qū)Χ喾N消化道惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移存在不同程度的抑制作用，李冬霞等[7]對比研究了52例胃癌和30例正常胃黏膜，認(rèn)為Kail 蛋白的異常表達(dá)可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。Yang等[8]研究認(rèn)為 Kail的低表達(dá)與胃癌、食管癌、結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。2011年吳劍秋研究報道了109例乳腺癌和115例結(jié)直腸癌組織，發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因KAll/CD82在乳腺癌和結(jié)直腸癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間，兩者差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，認(rèn)為KAll/CD82是影響乳腺癌、結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的因素[9、10]。本組研究結(jié)果顯示，無淋巴道轉(zhuǎn)移的乳腺癌、大腸癌組織中Kai1的表達(dá)顯著高于伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌、大腸癌，提示在乳腺癌、大腸癌生長、演進(jìn)過程中，獲得異質(zhì)性的能力逐漸增強(qiáng)，表現(xiàn)出Kai1蛋白逐漸降低的表達(dá)現(xiàn)象，這種低表達(dá)可能在乳腺癌、大腸癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮了一定作用，與上述作者研究結(jié)果一致。

有研究認(rèn)為，Kail與nm23、BRMS1等腫瘤抑制基因均具有抑制腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶而發(fā)生轉(zhuǎn)移抑制的潛在作用，其機(jī)制可能是通過影響一些黏附分子作用而抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[11]。Kai1蛋白的高表達(dá)，參與了調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞間的同質(zhì)性黏附，抑制腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附，從而抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移，還認(rèn)為Kai1蛋白的高表達(dá)還可抑制細(xì)胞增殖，致使腫瘤細(xì)胞生長緩慢，體現(xiàn)了Kai1基因是一種抑癌基因，具有抑癌作用。

綜上所述，Kai1蛋白的表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，在不同轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤組織中，Kai1蛋白表達(dá)的強(qiáng)度不盡相同，腫瘤轉(zhuǎn)移能力受Kai1表達(dá)強(qiáng)度的影響；腫瘤生長的不同時期其轉(zhuǎn)移潛能不一樣，腫瘤晚期轉(zhuǎn)移潛能的增強(qiáng)，受Kai1蛋白低表達(dá)的影響。

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[收稿2012-11-10;修回2012-12-23]

(編輯：譚秀榮)

CorrelationbetweenKailproteinexpressionandmetastasisofdifferentcancer

Zhangsusu1，Guoruizhen2，Bianke1，Wangqiuhong1

(1.Department of Clinical Medicine, Zhuhai Campus of Zunyi Medical University, Guangdong Zhuhai 519041, China; 2.Department of Pathology, Zhuhai Campus of Zunyi Medical University, Guangdong Zhuhai 519041, China)

ObjectiveTo investigate the correlation between Kail protein expression and metastasis of different cancer.MethodsThe Kai1 protein expressions in 35 cases of skin basal cell carcinoma (BCC), 18 cases of skin squamous cell carcinoma (SCC), 46 cases of breast cancer and 64 cases of colorectal cancer were detected by immunohistochemical method.Pictures were collected and statistically analyzed by computer medical image analysis system.Results① The positive expression of Kail protein was found in BCC group and the negative or weak positive expression was shown in SCC group and there was significant difference between these 2 groups (Plt;0.01).②The Kai1 protein positive expression was detected in breast cancer and colorectal cancer without lymph node metastasis and the negative or weak positive expression was indicated in breast cancer and colorectal cancer with lymph node metastasis.The Kai1expression levels in cancer without lymph node metastasis were significantly higher than those in cancer with lymph node metastasis (Plt;0.01).Conclusion① Compared with the SCC group, the high Kai1 protein expression in BCC group might be related to the biological characteristics of BCC without metastasis.②The low Kai1 protein expression in breast cancer and colorectal cancer might be associated with cancer metastasis.

carcinoma; Kai1; metastasis

遵義醫(yī)學(xué)院大學(xué)生科技創(chuàng)新項目(2011-D-10)。

郭瑞珍，女，教授，研究方向：皮膚病理性瘢痕和瘢痕癌，E-mail:jichubuyouxiang@sina.com。

R73-37

A

1000-2715(2013)01-0037-04