• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    淫羊藿苷預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響

    2013-10-24 06:29:23郭慶軍王桂敏張秀秀
    中國病理生理雜志 2013年11期
    關(guān)鍵詞:藿苷阿司匹林心肌細(xì)胞

    郭慶軍, 王桂敏, 張秀秀

    (遼寧醫(yī)學(xué)院 1研究生學(xué)院, 2附屬第一醫(yī)院,遼寧 錦州 121000)

    淫羊藿苷預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響

    郭慶軍1, 王桂敏2△, 張秀秀1

    (遼寧醫(yī)學(xué)院1研究生學(xué)院,2附屬第一醫(yī)院,遼寧 錦州 121000)

    目的觀察淫羊藿苷對心肌缺血再灌注損傷的影響并探討是否存在劑量依賴關(guān)系。方法結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支30 min,再灌注2 h,建立心肌缺血再灌注模型。將48只體重在250~300 g的健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組,模型組,淫羊藿苷低、中、高劑量組及阿司匹林組。HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)改變,免疫組化法檢測 NF-κB p65 蛋白在心肌細(xì)胞核中的表達(dá),蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測心肌組織中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附法測定血清白細(xì)胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)含量,比色法檢測心肌組織中髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。結(jié)果與假手術(shù)組比較,其余5組TNF-α表達(dá)及IL-1β濃度升高(P<0.01),NF-κB表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01),MPO活性增加(P<0.01);與模型組比較,淫羊藿苷低、中、高劑量組及阿司匹林組TNF-α表達(dá)及IL-1β濃度下降(P<0.05),NF-κB表達(dá)減弱(P<0.05),MPO活性降低(P<0.05); 淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05) 。結(jié)論淫羊藿苷預(yù)處理能減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng),并且呈現(xiàn)出劑量依賴性。

    淫羊藿苷; 心肌缺血; 再灌注損傷; 炎癥

    心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia-reperfusion injury, MIRI)是指心肌缺血一定時間后的動脈再通反而會加重心肌損傷,其原因是在心肌缺血時心肌細(xì)胞凋亡增加,而隨后的再灌注誘發(fā)的炎癥反應(yīng)又加重了這種結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn)炎癥因子水平和缺血后心臟功能的損害程度及心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量直接相關(guān)[1],說明炎癥反應(yīng)在心肌缺血再灌注損傷中起了非常重要的作用。目前心肌缺血再灌注損傷在臨床上是常見的,尋求一種有效可行的方法減輕心肌缺血再灌注損傷,最大限度保護(hù)缺血心肌,限制心肌梗死范圍,是國內(nèi)外學(xué)者探索的目標(biāo)。藥物預(yù)適應(yīng)處理受到醫(yī)學(xué)界的廣泛重視[2]。近年來中藥因其療效穩(wěn)定、毒副作用少、能作用于疾病多個環(huán)節(jié)等優(yōu)點而受到廣泛重視。

    淫羊藿,為小檗科植物淫羊藿(EpimediumbrevicornumMaxim)的全草。淫羊藿的主要化學(xué)成分為黃酮、多糖,淫羊藿苷(icariin)是淫羊藿黃酮中的主要活性成分。豐貴文等[3]研究表明,淫羊藿苷可通過抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)及其下游的炎癥級聯(lián)反應(yīng)而減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷。蔣毅萍等[4]研究表明,淫羊藿總苷對缺血再灌注損傷大鼠心肌具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制與抗氧化自由基作用有關(guān)。然而,目前尚無淫羊藿苷對心肌缺血再灌損傷炎癥反應(yīng)影響的報道,本研究旨在探索淫羊藿苷對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響,為淫羊藿苷應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。

    材 料 和 方 法

    1材料

    1.1主要藥品與試劑 淫羊藿苷(陜西西安飛達(dá)生物技術(shù)有限公司,純度為 98.36%);阿司匹林(上海靜融生物科技有限公司);免疫印跡 PVDF 膜(Roche);兔抗大鼠NF-κB p65抗體和生物素化羊抗兔IgG(Santa Cruz);SABC免疫組化試劑盒和DAB染液(武漢博士德生物工程有限公司);兔抗大鼠β-actin多克隆抗體、兔抗大鼠腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α ,TNF-α)多克隆抗體及辣根過氧化物酶標(biāo)記的Ⅱ抗(Santa Cruz);ECL 顯影試劑盒(Amershem Pharmacia);大鼠白細(xì)胞介素 1β(interleukin 1β, IL-1β)ELISA試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司);髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)比色法檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))。

    1.2儀器 RWD407小動物呼吸機(jī)(深圳市瑞沃德生命科技有限公司), ECG-101G VET動物心電圖機(jī)(深圳市邦健電子有限公司),3K15臺式高速冷凍離心機(jī)(Sigma),4XBC電腦型雙目倒置式金相顯微鏡(上海蔡康光學(xué)儀器有限公司)。

    1.3動物 選用普通級SD成年雄性健康大鼠48只(遼寧醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供)。體重250~300 g。購回后在動物室飼養(yǎng)3 d,以適應(yīng)環(huán)境。飼養(yǎng)環(huán)境:溫度為18~25 ℃,濕度為50%~60%,正常光照,實驗期間正常飲食,自由攝取自來水。

    2方法

    2.1實驗分組及心肌缺血再灌注模型制作 將48只大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為6組,然后選取其中4組腹腔注射給藥:分別為淫羊藿苷高劑量組(80 mg · kg-1) 、中劑量組(40 mg·kg-1)和低劑量組(20 mg·kg-1)[4],以及阿司匹林組(20 mg·kg-1),另2組用生理鹽水腹腔注射,每天1次,每次每只2 mL。連續(xù)腹腔注射7 d,末次注射2 h后,藥物處理組和模型組結(jié)扎冠狀動脈左前降支復(fù)制缺血再灌注模型,假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎。上述SD大鼠按王桂敏等[5]的方法復(fù)制心肌缺血再灌注損傷模型。

    2.2心肌組織結(jié)構(gòu)改變 實驗完畢留取左室心尖部缺血中心區(qū)同一部位全層新鮮組織,用10% 甲醛固定后石蠟包埋、 HE 染色,光鏡下觀察缺血區(qū)心肌形態(tài)學(xué)和炎癥細(xì)胞浸潤情況。

    2.3免疫組化法測定大鼠心肌組織NF-κB的表達(dá) 常規(guī)制作石蠟切片,脫蠟至水;利用甲醇+3% H2O2滅活內(nèi)源性過氧化物酶;PBS液漂洗2 min×2次,移至0.05% Tween-20中,室溫5 min;以0.5% BSA濕盒內(nèi)室溫孵育20 min,吸去孵育液,不沖洗;5%正常山羊血清,濕盒內(nèi)室溫孵育20 min,吸去孵育液;滴加兔抗大鼠NF-κB p65抗體(1∶200),4 ℃孵育過夜,PBS洗2 min×3次;滴加生物素化羊抗兔IgG,37 ℃孵育50 min后PBS洗2 min×3次;滴加SABC,室溫下靜置20 min,PBS洗5 min×3次。DAB顯色,蘇木素復(fù)染,脫水、透明及封片,光鏡下觀察,胞漿棕黃色著色為陽性細(xì)胞,每只大鼠取4張切片,獲取切片圖像(×200),隨機(jī)選取每張切片中的 4 個視野,各組免疫組化的陽性產(chǎn)物強(qiáng)度通過圖像分析系統(tǒng)測定灰度值 (灰度值范圍 0~225,0表示陽性產(chǎn)物表達(dá)最強(qiáng),225表示陽性產(chǎn)物表達(dá)最弱),用均數(shù)表示表達(dá)強(qiáng)度。

    2.4Western blotting法檢測大鼠心肌組織TNF-α表達(dá) 液氮凍存的心肌組織100 mg,按沈誠等[6]的方法提取心肌細(xì)胞核蛋白,經(jīng) Bradford 法蛋白定量后,保存于-70 ℃?zhèn)溆?。取核蛋白樣品加等體積的 2×電泳樣品緩沖液加熱變性后,每泳道以 20 μg蛋白上樣,經(jīng) 10%十二烷基硫酸鈉(SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)后,電轉(zhuǎn)至 PVDF 膜上。用 5%脫脂奶粉封閉后,先后加入兔抗大鼠 TNF-α 多克隆抗體及辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔 IgG。使用 ECL顯影試劑盒進(jìn)行顯影,定影。用 β-actin 作為內(nèi)參照。實驗結(jié)果用光密度掃描儀掃描,目的條帶積分吸光度值與上樣內(nèi)參照積分吸光度值比較得出相對吸光度值。

    2.5血清IL-1β 含量的測定 實驗結(jié)束,右心室取血2 mL,室溫靜置1 h,3 000 r·min-1離心10 min,分離出血清,-80 ℃保存,通過ELISA法測定血清IL-1β含量。

    2.6心肌髓過氧化物酶活性檢測 切取左室心尖部心肌100~150 mg,制成10%勻漿,利用供氫體鄰連茴香胺供氫生成黃色產(chǎn)物,通過比色法測定產(chǎn)物生成量,進(jìn)而推算出 MPO活性。

    3統(tǒng)計學(xué)處理

    數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)來表示,采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件分析。多組間比較用單因素方差分析,兩兩比較用LSD-t檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1心肌組織結(jié)構(gòu)改變

    光鏡下,假手術(shù)組心肌纖維排列整齊,橫紋排列整齊,無腫脹斷裂和變性壞死,無中性粒細(xì)胞浸潤;模型組可見心肌纖維腫脹,部分橫紋消失,局灶性出血、心肌細(xì)胞變性壞死,中性粒細(xì)胞大量浸潤。阿司匹林組心肌纖維輕度腫脹,排列尚有序,中性粒細(xì)胞少量浸潤。高劑量淫羊藿苷組部分心肌細(xì)胞水腫,極少有炎癥細(xì)胞浸潤,見圖1。

    Figure 1. Optical micrographs of rat myocardial tissues(HE staining,×400).A:sham group;B:model group;C: low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E:high-dose icariin group;F:aspirin group.

    圖1大鼠心肌組織HE染色

    2免疫組化法測定NF-κB的表達(dá)

    與假手術(shù)組比較,模型組心肌細(xì)胞核內(nèi)見大量棕色顆粒,NF-κB p65 蛋白灰度值顯著減小(P<0.01),表示模型組心肌細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65 蛋白表達(dá)顯著增加;與模型組比較,淫羊藿苷組和阿司匹林組心肌細(xì)胞核棕色顆粒減少,NF-κB p65 蛋白灰度值增大(P<0.05 或P<0.01),表示 NF-κB p65 蛋白表達(dá)降低,淫羊藿苷高劑量組較中、低劑量組降低更明顯 (P<0.05),呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較差異不明顯(P>0.05),見圖2、表 1。

    Figure 2. Immunohistochemical staining of rat myocardial tissue NF-κB p65(×400). A: sham group;B:model group;C:low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E: high-dose icariin group;F:aspirin group.

    圖2大鼠心肌組織NF-κBp65免疫組化染色

    表1大鼠心肌組織中NF-κBp65的灰度值

    Table 1. NF-κB p65 gray values in rat myocardial tissues (Mean±SD.n=8)

    GroupNF-κBp65(grayvalue)Sham198.53±12.19Model69.20±17.73**Low-doseicariin90.21±13.98△Middle-doseicariin120.33±15.23△△High-doseicariin162.96±14.29△△Aspirin163.00±13.98△△

    **P<0.01vssham group;△P<0.05,△△P<0.01vsmodel group.

    3用Westernblotting法檢測各組大鼠心肌組織TNF-α的表達(dá)水平

    缺血再灌注后心肌組織中 TNF-α 水平變化如圖3所示。模型組TNF-α表達(dá)水平明顯高于假手術(shù)組(P<0.01);與模型組相比,淫羊藿苷各劑量組TNF-α均降低,且呈劑量依賴關(guān)系,淫羊藿苷中、高劑量組及阿司匹林組TNF-α水平顯著低于模型組(P<0.05)。淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05)。上述結(jié)果提示淫羊藿苷可以減少大鼠心肌細(xì)胞TNF-α的生成,減輕炎癥損傷。

    Figure 3. Rat myocardial tissue TNF-α level.A:sham group;B:model group;C:low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E: high-dose icariin group;F:aspirin group.Mean±SD.n=8.**P<0.01vssham group;△P<0.05vsmodel group.

    圖3大鼠心肌組織TNF-α水平

    4各組大鼠血清IL-1β水平

    與假手術(shù)組比較,模型組血清IL-1β明顯增高(P<0.01);與模型組比較,淫羊藿苷高中低劑量組血清IL-1β降低,且呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05),見表2。

    5對大鼠心肌組織MPO活性的影響

    與假手術(shù)組比較,各組缺血再灌注后心肌MPO活性明顯增高(P<0.01)。與模型組比較,淫羊藿苷高、中、低劑量組大鼠心肌組織MPO活性降低,且呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05),見表2。

    表2大鼠血清IL-1β水平和大鼠心肌組織MPO活性

    Table 2. IL-1β level in rat serum and MPO activity in rat myocardial tissues (Mean±SD.n=8)

    GroupIL-1β(ng/L)MPO(U/g)Sham38.14±10.690.74±0.15Model95.82±18.31**1.38±0.31**Low-doseicariin84.38±17.96△1.30±0.24△Middle-doseicariin67.39±16.28△1.07±0.19△High-doseicariin59.67±14.32△0.95±0.12△Aspirin60.03±13.98△0.96±0.18△

    **P<0.01vssham group;△P<0.05vsmodel group.

    討 論

    心肌缺血再灌注損傷是一個多機(jī)制參與、多因素相互影響而導(dǎo)致的復(fù)雜的病理生理過程。近年來,大量研究表明,炎癥反應(yīng)也參與了心肌缺血再灌注損傷的形成[7]。李擁軍等[8]研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞因子參與了心肌缺血再灌注損傷,炎癥細(xì)胞因子的增高是反映急性心肌梗死微循環(huán)再灌注不良的標(biāo)志。謝利平等[9]研究發(fā)現(xiàn),抑制缺血再灌注后大鼠血清和組織中炎癥因子堆積,可以達(dá)到保護(hù)心肌的作用。

    NF-κB 對免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)起調(diào)控作用,在心肌缺血再灌注損傷中起關(guān)鍵作用。炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β的增加和缺氧均可激活NF-κB,活化的NF-κB迅速進(jìn)入核內(nèi)啟動炎癥細(xì)胞因子、選擇素和黏附分子的表達(dá),升高的NF-κB等進(jìn)一步刺激NF-κB,形成正反饋,導(dǎo)致細(xì)胞因子水平不斷升高[10]?;罨?NF-κB和TNF-α可誘導(dǎo)大鼠心肌組織表達(dá)脂多糖誘導(dǎo)的趨化因子,引導(dǎo)中性粒細(xì)胞向再灌注組織趨化[11]。本研究結(jié)果表明,淫羊藿苷預(yù)先給藥可明顯抑制NF-κB的活化。

    TNF-α也是一種重要的炎癥因子,通常在心肌組織中的水平較低,但發(fā)生心肌缺血再灌注損傷后,損傷的細(xì)胞便會釋放大量 TNF-α,并通過下游的途徑促進(jìn)心肌缺血再灌注損傷的進(jìn)展:TNF-α 可以抑制心肌的收縮功能;刺激中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分泌黏附分子,加速細(xì)胞之間的黏附和血管內(nèi)凝血,引起心肌細(xì)胞壞死、凋亡等,加重心肌缺血再灌注損傷。殷然等[12]研究發(fā)現(xiàn),抑制由心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(anoxia/reoxygenation,A/R) 損傷造成的乳鼠心肌細(xì)胞炎癥因子 TNF-α表達(dá),可以減輕乳鼠心肌細(xì)胞 A/R 損傷。

    IL-1β 是一種重要的炎癥因子,在正常血清中的表達(dá)較低,當(dāng)心肌缺血再灌注損傷發(fā)生時其水平明顯升高。IL-1β 引起心肌組織損傷可能的機(jī)制:IL-1β 可以直接上調(diào)細(xì)胞間黏附分子 1等的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞及其基質(zhì)并通過內(nèi)皮進(jìn)入缺血區(qū),通過釋放氧自由基、栓塞微血管等途徑,最終引起缺血再灌注后的心肌損傷及細(xì)胞凋亡[13-14]。

    本研究結(jié)果顯示,淫羊藿苷低、中、高劑量組大鼠心肌組織 TNF-α 水平和血清IL-1β 濃度皆下降,且存在劑量依賴關(guān)系,其中淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異。模型組大鼠再灌注后心肌組織出現(xiàn)病變,心肌細(xì)胞排列稀疏,橫紋不清晰,心肌間質(zhì)水腫明顯,可見炎癥細(xì)胞浸潤。淫羊藿苷中、高劑量組大鼠心肌缺血再灌注時,心肌組織炎癥細(xì)胞浸潤減輕,與炎癥因子 TNF-α 及 IL-1β 釋放量減少的結(jié)果一致,證明了淫羊藿苷能夠顯著抑制心肌缺血再灌注損傷時的炎癥反應(yīng)。

    MPO是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)嗜天青顆粒產(chǎn)生的一種重要的過氧化物酶,檢測組織、血清中的MPO活性可以反映中性粒細(xì)胞浸潤程度[15-16]。其含量增高可以間接反映組織中存在炎癥,所以,只要有中性粒細(xì)胞浸潤的組織都能夠通過MPO活性的測定來判定細(xì)胞浸潤程度。本實驗結(jié)果顯示,模型組心肌中MPO活性明顯增強(qiáng),這說明白細(xì)胞大量浸潤;中、高劑量淫羊藿苷預(yù)處理可顯著降低心肌組織中MPO活性,減少白細(xì)胞的浸潤。HE染色結(jié)果與之相符。

    綜上所述,本研究結(jié)果表明淫羊藿苷可以降低大鼠血清中炎癥因子 IL-1β 及心肌組織TNF-α的生成和釋放,降低心肌組織 MPO 活性和NF-κB表達(dá),改善心肌組織的病理變化。這說明淫羊藿苷可能通過抑制心肌缺血再灌注損傷的炎癥反應(yīng)來發(fā)揮心肌保護(hù)作用,并且炎癥因子及炎癥細(xì)胞水平與淫羊藿苷劑量存在依賴關(guān)系,但具體的分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

    [1] 王凌燕,蔡高軍,孫文偉,等.脂質(zhì)載體前列腺素E1對大鼠心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用[J].中國實驗診斷學(xué),2006,10(3):255-257.

    [2] Ryu SM,Kim HJ,Cho KR,et al.Myocardial protective effect of tezosentan, an endothelin receptor antagonist, for ischemia-reperfusion injury in experimental heart failure models[J]. J Korean Med Sci,2009,24(5):782-788.

    [3] 豐貴文,劉龍山,尚文俊. 淫羊藿苷對大鼠腎臟缺血再灌注后炎性損傷的保護(hù)[J].中國組織工程研究,2012,16(40):7496-7502.

    [4] 蔣毅萍,金 宏,徐江平.淫羊藿總苷對缺血-再灌注損傷大鼠心肌的保護(hù)作用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006,25(9):860-862.

    [5] 王桂敏,翟宏穎.菟絲子黃酮對心肌缺血再灌注損傷大鼠 Bcl-2、Caspase-3 表達(dá)的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2012,32(2):343-345.

    [6] 沈 誠, 范士志, 陳建明, 等.JAK/STAT 通路對缺血再灌注心肌NF-κB 和 TNF-α 表達(dá)的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(7):985-987.

    [7] Van Waes C. Nuclear factor-kappa B in development,prevention,and therapy of cancer [J]. Clin Cancer Res,2007,13(4):1076-1082.

    [8] 李擁軍,丁文惠,高 煒,等.炎性相關(guān)細(xì)胞因子和心肌梗死微循環(huán)再灌注狀態(tài)的關(guān)系[J].中華內(nèi)科雜志,2004,43(2):102-105.

    [9] 謝利平,揚(yáng) 帆,劉 振,等.左旋四氫巴馬汀對心肌缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制研究[J].中國病理生理雜志 ,2010, 26(10): 1996.

    [10] Fan H,Sun B,Gu Q,et al.Oxygen radicals trigger activition of NF-kappa B and AP-1 and upregulation of ICAM-1 in reperfused canine heart[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2002,282(5):H1778-H1786.

    [11] Chandrasekar B,Smith JB,Freeman GL.Ischemia-reperfusion of rat myocardium activates nuclear factor-κB and induces neutrophil infiltration via lipopolysaccharide-induced CXC chemokine[J].Circulation,2001,103(13):2296-2302.

    [12] 殷 然,王夢洪,鄭澤琪,等.肝 X 受體抑制乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷[J].中國病理生理雜志,2011,27(9):1671-1675.

    [13] Karin M. Nuclear factor-kappa B in cancer development and progression [J].Nature,2006,441(7092):431-436.

    [14] 王 勇,史朝暉 ,姜希宏.核因子-κB在胃癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥,2004,44(6):19-20.

    [15] Xiong N,Sun F,Zhao H,et al.Effect of Rosiglitazone Maleate on inflammation following cerebral ischemia/reperfusion in rats[J]. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2007,27(3):295-298.

    [16] Samimi-Fard S, Dominguez-Rodriguez A, Abreu-Gonzalez P,et al.Role of myeloperoxidase as predictor of systemic inflammatory response syndrome in patients with ST-segmentelevation myocardial infarction after primary percutaneous coronary intervention[J].Am J Cardiol,2009,104(5):634-637.

    Effectsoficariinpreconditioningoninflammatoryresponsesinmyocar-dialischemia-reperfusioninjury

    GUO Qing-jun1, WANG Gui-min2, ZHANG Xiu-xiu1

    (1GraduateCollege,2TheFirstAffiliatedHospital,LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121000,China.E-mail:wangguimin4197176@163.com)

    AIM: To observe the effects of icariin on myocardial ischemia-reperfusion injury.METHODSThe left anterior descending coronary artery was ligated for 30 min and then loosened for 2 h to establish the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury. Forty-eight healthy adult male SD rats weighing 250~300 g were randomly divided into sham group, model group, low-, middle-and high-dose icariin groups, and aspirin group. The morphological changes of the myocardium were observed by HE staining. The protein expression of NF-κB p65 in the myocardial nucleus was determined by the method of immunohistochemistry. The content of tumor necrosis factor α (TNF-α) in the myocardial tissues was detected by Western blotting. The level of interleukin 1β (IL-1β) in the serum was measured by ELISA. The activity of myeloperoxidase (MPO) in the myocardial tissues was assayed by colorimetry.RESULTSCompared with sham group, TNF-α content, IL-1β concentration, NF-κB expression and MPO activity in all other groups increased. Compared with model group, TNF-α content, IL-1β concentration, NF-κB expression and MPO activity in low-, middle- and high-dose icariin groups and aspirin group all decreased. No significant difference of the above parameters between high-dose icariin group and aspirin group was observed.CONCLUSIONIcariin preconditioning reduces inflammatory responses in the process of myocardial ischemia-reperfusion injury in a dose-dependent manner.

    Icariin; Myocardial ischemia; Reperfusion injury; Inflammation

    R363

    A

    10.3969/j.issn.1000- 4718.2013.11.021

    1000- 4718(2013)11- 2034- 05

    2013- 07- 26

    2013- 10- 08

    △通訊作者Tel: 0416-4197176; E-mail: wangguimin4197176@163.com

    猜你喜歡
    藿苷阿司匹林心肌細(xì)胞
    淫羊藿中朝藿苷A、B和C的酶轉(zhuǎn)化及其稀有箭藿苷的制備
    阿司匹林,天天在吃,但你可能從一開始就沒吃對
    祝您健康(2023年9期)2023-09-05 02:06:28
    左歸降糖舒心方對糖尿病心肌病MKR鼠心肌細(xì)胞損傷和凋亡的影響
    Me & Miss Bee
    餐前還是飯后?阿司匹林到底怎么吃
    活血解毒方對缺氧/復(fù)氧所致心肌細(xì)胞凋亡的影響
    餐前還是飯后?阿司匹林到底怎么吃
    新型雙相酶水解體系制備寶藿苷I
    中成藥(2018年12期)2018-12-29 12:26:00
    雙藿苷A分子印跡聚合物的制備及應(yīng)用
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:49
    心肌細(xì)胞慢性缺氧適應(yīng)性反應(yīng)的研究進(jìn)展
    亚洲一级一片aⅴ在线观看| 一区福利在线观看| 亚洲美女黄片视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| av天堂在线播放| 男人舔奶头视频| 日本黄大片高清| 亚洲成人久久性| 国产成人a区在线观看| 色av中文字幕| 老女人水多毛片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 伦理电影大哥的女人| 国产毛片a区久久久久| 精品熟女少妇av免费看| 午夜福利高清视频| 午夜福利高清视频| 国产成人精品久久久久久| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产三级在线视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美激情在线99| 老司机影院成人| 一级av片app| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 观看免费一级毛片| 久久人妻av系列| 成人综合一区亚洲| 亚洲成av人片在线播放无| 在线观看66精品国产| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 国产欧美日韩一区二区精品| 免费在线观看成人毛片| 如何舔出高潮| 精品国内亚洲2022精品成人| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 免费观看在线日韩| 我的老师免费观看完整版| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 高清日韩中文字幕在线| 床上黄色一级片| 日韩强制内射视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 精品久久久久久久久av| 欧美精品国产亚洲| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚州av有码| 久久久久久国产a免费观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 我要搜黄色片| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久午夜福利片| 午夜激情福利司机影院| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久综合国产亚洲精品| 黄色欧美视频在线观看| 日日啪夜夜撸| 日韩av在线大香蕉| 国产乱人偷精品视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 美女黄网站色视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产免费一级a男人的天堂| 十八禁网站免费在线| 嫩草影院新地址| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 此物有八面人人有两片| 12—13女人毛片做爰片一| 日本五十路高清| 亚洲成人中文字幕在线播放| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲最大成人av| 精品久久久久久久久av| 国产黄色小视频在线观看| 一级毛片久久久久久久久女| 夜夜爽天天搞| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 精品日产1卡2卡| 久久久欧美国产精品| 久久精品91蜜桃| 免费黄网站久久成人精品| 91精品国产九色| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产免费男女视频| 色在线成人网| 久久久久久久午夜电影| 春色校园在线视频观看| 日韩高清综合在线| 一级毛片久久久久久久久女| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 一级黄色大片毛片| 久久久久久九九精品二区国产| 少妇丰满av| 有码 亚洲区| 亚洲av二区三区四区| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 青春草视频在线免费观看| 久久久久久久久久成人| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 久久中文看片网| 国产精品爽爽va在线观看网站| 我要看日韩黄色一级片| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲av免费在线观看| 久久99热这里只有精品18| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 综合色av麻豆| 91久久精品国产一区二区成人| 久久午夜亚洲精品久久| 国产久久久一区二区三区| 久久久色成人| 一夜夜www| 久久精品国产亚洲网站| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产色婷婷99| 91狼人影院| 伦理电影大哥的女人| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲美女视频黄频| 淫秽高清视频在线观看| 97热精品久久久久久| 免费看日本二区| 久久精品国产亚洲av天美| 国产成人freesex在线 | 久久人人爽人人爽人人片va| 男女视频在线观看网站免费| 久久久久性生活片| 内地一区二区视频在线| 国产精品一区二区免费欧美| 免费av观看视频| 99视频精品全部免费 在线| 最好的美女福利视频网| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 91久久精品国产一区二区成人| 乱人视频在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 99riav亚洲国产免费| 久久精品夜色国产| 久99久视频精品免费| 欧美成人精品欧美一级黄| 男女那种视频在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 免费av毛片视频| 久久久色成人| 国产成人一区二区在线| 久久久久久久久久黄片| 成人二区视频| 国产高潮美女av| 天美传媒精品一区二区| 可以在线观看毛片的网站| 精品人妻视频免费看| 精品久久久久久久末码| 国产亚洲精品av在线| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日本欧美国产在线视频| 日本熟妇午夜| 少妇的逼好多水| 欧美3d第一页| 精品不卡国产一区二区三区| 深爱激情五月婷婷| 亚洲三级黄色毛片| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲欧美日韩东京热| 一进一出好大好爽视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 网址你懂的国产日韩在线| 少妇的逼好多水| 91精品国产九色| 成人亚洲欧美一区二区av| 看非洲黑人一级黄片| 18禁在线播放成人免费| 午夜激情欧美在线| 观看免费一级毛片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲成人久久性| 久久这里只有精品中国| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 看片在线看免费视频| 国产精品国产高清国产av| 国产精品一区二区性色av| 久久这里只有精品中国| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产乱人偷精品视频| 亚洲色图av天堂| 欧美日韩精品成人综合77777| 男女之事视频高清在线观看| 免费看日本二区| 联通29元200g的流量卡| 国产成人精品久久久久久| 美女免费视频网站| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 午夜免费激情av| 欧美丝袜亚洲另类| 看黄色毛片网站| 高清午夜精品一区二区三区 | 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美色视频一区免费| 中文字幕久久专区| 热99在线观看视频| 欧美3d第一页| 在线观看免费视频日本深夜| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲精品国产av成人精品 | 国产三级在线视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 精品无人区乱码1区二区| 免费观看精品视频网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 久久精品国产清高在天天线| 露出奶头的视频| 国产精品一区www在线观看| 国产三级在线视频| 亚洲四区av| 一个人看视频在线观看www免费| 国产精品一区二区三区四区久久| 在线播放国产精品三级| 成人三级黄色视频| 在线免费十八禁| 国语自产精品视频在线第100页| 色哟哟·www| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久国产成人免费| 99久久九九国产精品国产免费| 成人特级av手机在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精华一区二区三区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 午夜亚洲福利在线播放| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 1000部很黄的大片| 亚洲自偷自拍三级| 99久久精品国产国产毛片| 国产人妻一区二区三区在| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲最大成人av| 男人狂女人下面高潮的视频| 搞女人的毛片| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美一区二区亚洲| 久久精品国产亚洲网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 91久久精品国产一区二区三区| 99久国产av精品| 成年版毛片免费区| www.色视频.com| 久久九九热精品免费| 日日摸夜夜添夜夜添小说| av在线观看视频网站免费| 日日干狠狠操夜夜爽| 天堂影院成人在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 丰满乱子伦码专区| 成人二区视频| 亚洲欧美日韩东京热| 午夜a级毛片| 久久6这里有精品| 久久精品国产亚洲网站| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 97碰自拍视频| а√天堂www在线а√下载| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 性色avwww在线观看| 在线播放国产精品三级| 国产在线男女| 免费看a级黄色片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲性久久影院| 成人av一区二区三区在线看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久6这里有精品| 久久久精品大字幕| 97超视频在线观看视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产精品sss在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本-黄色视频高清免费观看| 18禁在线播放成人免费| 国产久久久一区二区三区| 高清午夜精品一区二区三区 | avwww免费| 99久久无色码亚洲精品果冻| 成人鲁丝片一二三区免费| 欧美最新免费一区二区三区| av卡一久久| 少妇熟女aⅴ在线视频| 露出奶头的视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日韩欧美三级三区| 国产精品一区二区免费欧美| 香蕉av资源在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产高清视频在线播放一区| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲成a人片在线一区二区| 黄色一级大片看看| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 成人特级av手机在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久久精品大字幕| 长腿黑丝高跟| 99精品在免费线老司机午夜| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 免费观看精品视频网站| 国产一区二区在线av高清观看| 成人美女网站在线观看视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 观看免费一级毛片| 天堂动漫精品| 国产成人a区在线观看| 色吧在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 色吧在线观看| 99久国产av精品| 国产高清视频在线播放一区| 我要看日韩黄色一级片| 午夜福利成人在线免费观看| 精品熟女少妇av免费看| 听说在线观看完整版免费高清| 又爽又黄无遮挡网站| 在线观看免费视频日本深夜| 国产一区二区在线av高清观看| 天堂网av新在线| 日韩欧美三级三区| 成人综合一区亚洲| 成年女人永久免费观看视频| 欧美高清成人免费视频www| 欧美一区二区国产精品久久精品| 久久久欧美国产精品| 91久久精品国产一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 麻豆国产97在线/欧美| 国产色婷婷99| 国产黄a三级三级三级人| 青春草视频在线免费观看| 免费高清视频大片| 国产av麻豆久久久久久久| 国产av不卡久久| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲中文日韩欧美视频| 一级毛片久久久久久久久女| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲av五月六月丁香网| 午夜福利在线观看吧| 精品不卡国产一区二区三区| 99久国产av精品国产电影| 寂寞人妻少妇视频99o| 最近在线观看免费完整版| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 中国美白少妇内射xxxbb| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 中文资源天堂在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 九九热线精品视视频播放| 欧美最黄视频在线播放免费| 有码 亚洲区| 成人精品一区二区免费| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| av卡一久久| 在线观看免费视频日本深夜| 好男人在线观看高清免费视频| 12—13女人毛片做爰片一| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲精品一区av在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 精华霜和精华液先用哪个| 一级黄片播放器| 亚洲第一区二区三区不卡| 嫩草影院新地址| 少妇的逼水好多| 高清日韩中文字幕在线| 51国产日韩欧美| .国产精品久久| 久久久久久国产a免费观看| 在线看三级毛片| 免费看光身美女| 色哟哟·www| 国产色爽女视频免费观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 免费观看人在逋| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | a级一级毛片免费在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美+日韩+精品| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产精品野战在线观看| 亚洲av免费在线观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲性久久影院| 永久网站在线| 我要搜黄色片| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲无线在线观看| 丝袜喷水一区| 一级a爱片免费观看的视频| 少妇熟女欧美另类| 寂寞人妻少妇视频99o| 夜夜爽天天搞| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产精品,欧美在线| 精品人妻熟女av久视频| 熟女电影av网| 夜夜爽天天搞| 伦精品一区二区三区| 久久精品影院6| 乱码一卡2卡4卡精品| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美3d第一页| av在线观看视频网站免费| 51国产日韩欧美| 国产精品一区二区性色av| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产成人freesex在线 | 成人综合一区亚洲| 香蕉av资源在线| 亚洲av不卡在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲最大成人手机在线| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美成人a在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 我要看日韩黄色一级片| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久精品国产自在天天线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 99热精品在线国产| 综合色丁香网| 99视频精品全部免费 在线| 精品一区二区三区视频在线| 村上凉子中文字幕在线| 国产乱人偷精品视频| 久久精品影院6| 中文资源天堂在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 免费在线观看成人毛片| 男人舔女人下体高潮全视频| 天堂网av新在线| 乱人视频在线观看| .国产精品久久| av女优亚洲男人天堂| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 真人做人爱边吃奶动态| 丝袜美腿在线中文| 国内精品美女久久久久久| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久国产乱子免费精品| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲最大成人av| 大香蕉久久网| 好男人在线观看高清免费视频| 国产男靠女视频免费网站| 国产久久久一区二区三区| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲性夜色夜夜综合| 中文在线观看免费www的网站| 日韩大尺度精品在线看网址| www.色视频.com| 成年av动漫网址| 国产不卡一卡二| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产高潮美女av| 一本一本综合久久| 99视频精品全部免费 在线| 一个人免费在线观看电影| 中文资源天堂在线| 我要看日韩黄色一级片| 人人妻人人看人人澡| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产成人a区在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 99热这里只有精品一区| 一a级毛片在线观看| 国产日本99.免费观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲最大成人手机在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久午夜亚洲精品久久| 波多野结衣高清作品| 一区福利在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 国产三级中文精品| 亚洲成人久久爱视频| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产免费男女视频| 免费观看人在逋| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久精品综合一区二区三区| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲内射少妇av| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久韩国三级中文字幕| 在线观看av片永久免费下载| 亚洲图色成人| 淫秽高清视频在线观看| 色综合色国产| 久久久久九九精品影院| 亚洲国产精品合色在线| 免费av不卡在线播放| 亚洲精品影视一区二区三区av| 大香蕉久久网| 91久久精品国产一区二区三区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲精品色激情综合| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久久久久久久大av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 欧美成人精品欧美一级黄| 十八禁网站免费在线| 成人高潮视频无遮挡免费网站| av女优亚洲男人天堂| avwww免费| 赤兔流量卡办理| 嫩草影院入口| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产大屁股一区二区在线视频| 乱人视频在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 中出人妻视频一区二区| 国产成人福利小说| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 亚洲av中文字字幕乱码综合| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产av在哪里看| 日本一本二区三区精品| а√天堂www在线а√下载| 日韩欧美 国产精品| 高清毛片免费看| 久久久精品欧美日韩精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 日韩三级伦理在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 国产淫片久久久久久久久| 精品国产三级普通话版| 日韩在线高清观看一区二区三区| 禁无遮挡网站| 久久精品国产自在天天线| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 色在线成人网| 99精品在免费线老司机午夜| 18禁在线无遮挡免费观看视频 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 舔av片在线| 国产成人精品久久久久久| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一级毛片电影观看 | 日本一本二区三区精品| 露出奶头的视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 一级毛片我不卡| 成年免费大片在线观看| 国产熟女欧美一区二区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 熟女人妻精品中文字幕| 少妇人妻一区二区三区视频| 色av中文字幕| 精品午夜福利在线看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 两个人视频免费观看高清| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产片特级美女逼逼视频| 最好的美女福利视频网| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久色成人| 久久99热这里只有精品18| 特级一级黄色大片| 国产成人aa在线观看| 在线免费观看的www视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产精品久久视频播放| 亚洲国产精品sss在线观看| 午夜视频国产福利|