• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    淫羊藿苷預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響

    2013-10-24 06:29:23郭慶軍王桂敏張秀秀
    中國病理生理雜志 2013年11期
    關(guān)鍵詞:藿苷阿司匹林心肌細(xì)胞

    郭慶軍, 王桂敏, 張秀秀

    (遼寧醫(yī)學(xué)院 1研究生學(xué)院, 2附屬第一醫(yī)院,遼寧 錦州 121000)

    淫羊藿苷預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響

    郭慶軍1, 王桂敏2△, 張秀秀1

    (遼寧醫(yī)學(xué)院1研究生學(xué)院,2附屬第一醫(yī)院,遼寧 錦州 121000)

    目的觀察淫羊藿苷對心肌缺血再灌注損傷的影響并探討是否存在劑量依賴關(guān)系。方法結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支30 min,再灌注2 h,建立心肌缺血再灌注模型。將48只體重在250~300 g的健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組,模型組,淫羊藿苷低、中、高劑量組及阿司匹林組。HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)改變,免疫組化法檢測 NF-κB p65 蛋白在心肌細(xì)胞核中的表達(dá),蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測心肌組織中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附法測定血清白細(xì)胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)含量,比色法檢測心肌組織中髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。結(jié)果與假手術(shù)組比較,其余5組TNF-α表達(dá)及IL-1β濃度升高(P<0.01),NF-κB表達(dá)增強(qiáng)(P<0.01),MPO活性增加(P<0.01);與模型組比較,淫羊藿苷低、中、高劑量組及阿司匹林組TNF-α表達(dá)及IL-1β濃度下降(P<0.05),NF-κB表達(dá)減弱(P<0.05),MPO活性降低(P<0.05); 淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05) 。結(jié)論淫羊藿苷預(yù)處理能減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng),并且呈現(xiàn)出劑量依賴性。

    淫羊藿苷; 心肌缺血; 再灌注損傷; 炎癥

    心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia-reperfusion injury, MIRI)是指心肌缺血一定時間后的動脈再通反而會加重心肌損傷,其原因是在心肌缺血時心肌細(xì)胞凋亡增加,而隨后的再灌注誘發(fā)的炎癥反應(yīng)又加重了這種結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn)炎癥因子水平和缺血后心臟功能的損害程度及心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量直接相關(guān)[1],說明炎癥反應(yīng)在心肌缺血再灌注損傷中起了非常重要的作用。目前心肌缺血再灌注損傷在臨床上是常見的,尋求一種有效可行的方法減輕心肌缺血再灌注損傷,最大限度保護(hù)缺血心肌,限制心肌梗死范圍,是國內(nèi)外學(xué)者探索的目標(biāo)。藥物預(yù)適應(yīng)處理受到醫(yī)學(xué)界的廣泛重視[2]。近年來中藥因其療效穩(wěn)定、毒副作用少、能作用于疾病多個環(huán)節(jié)等優(yōu)點而受到廣泛重視。

    淫羊藿,為小檗科植物淫羊藿(EpimediumbrevicornumMaxim)的全草。淫羊藿的主要化學(xué)成分為黃酮、多糖,淫羊藿苷(icariin)是淫羊藿黃酮中的主要活性成分。豐貴文等[3]研究表明,淫羊藿苷可通過抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)及其下游的炎癥級聯(lián)反應(yīng)而減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷。蔣毅萍等[4]研究表明,淫羊藿總苷對缺血再灌注損傷大鼠心肌具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制與抗氧化自由基作用有關(guān)。然而,目前尚無淫羊藿苷對心肌缺血再灌損傷炎癥反應(yīng)影響的報道,本研究旨在探索淫羊藿苷對心肌缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響,為淫羊藿苷應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。

    材 料 和 方 法

    1材料

    1.1主要藥品與試劑 淫羊藿苷(陜西西安飛達(dá)生物技術(shù)有限公司,純度為 98.36%);阿司匹林(上海靜融生物科技有限公司);免疫印跡 PVDF 膜(Roche);兔抗大鼠NF-κB p65抗體和生物素化羊抗兔IgG(Santa Cruz);SABC免疫組化試劑盒和DAB染液(武漢博士德生物工程有限公司);兔抗大鼠β-actin多克隆抗體、兔抗大鼠腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α ,TNF-α)多克隆抗體及辣根過氧化物酶標(biāo)記的Ⅱ抗(Santa Cruz);ECL 顯影試劑盒(Amershem Pharmacia);大鼠白細(xì)胞介素 1β(interleukin 1β, IL-1β)ELISA試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司);髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)比色法檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))。

    1.2儀器 RWD407小動物呼吸機(jī)(深圳市瑞沃德生命科技有限公司), ECG-101G VET動物心電圖機(jī)(深圳市邦健電子有限公司),3K15臺式高速冷凍離心機(jī)(Sigma),4XBC電腦型雙目倒置式金相顯微鏡(上海蔡康光學(xué)儀器有限公司)。

    1.3動物 選用普通級SD成年雄性健康大鼠48只(遼寧醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供)。體重250~300 g。購回后在動物室飼養(yǎng)3 d,以適應(yīng)環(huán)境。飼養(yǎng)環(huán)境:溫度為18~25 ℃,濕度為50%~60%,正常光照,實驗期間正常飲食,自由攝取自來水。

    2方法

    2.1實驗分組及心肌缺血再灌注模型制作 將48只大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為6組,然后選取其中4組腹腔注射給藥:分別為淫羊藿苷高劑量組(80 mg · kg-1) 、中劑量組(40 mg·kg-1)和低劑量組(20 mg·kg-1)[4],以及阿司匹林組(20 mg·kg-1),另2組用生理鹽水腹腔注射,每天1次,每次每只2 mL。連續(xù)腹腔注射7 d,末次注射2 h后,藥物處理組和模型組結(jié)扎冠狀動脈左前降支復(fù)制缺血再灌注模型,假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎。上述SD大鼠按王桂敏等[5]的方法復(fù)制心肌缺血再灌注損傷模型。

    2.2心肌組織結(jié)構(gòu)改變 實驗完畢留取左室心尖部缺血中心區(qū)同一部位全層新鮮組織,用10% 甲醛固定后石蠟包埋、 HE 染色,光鏡下觀察缺血區(qū)心肌形態(tài)學(xué)和炎癥細(xì)胞浸潤情況。

    2.3免疫組化法測定大鼠心肌組織NF-κB的表達(dá) 常規(guī)制作石蠟切片,脫蠟至水;利用甲醇+3% H2O2滅活內(nèi)源性過氧化物酶;PBS液漂洗2 min×2次,移至0.05% Tween-20中,室溫5 min;以0.5% BSA濕盒內(nèi)室溫孵育20 min,吸去孵育液,不沖洗;5%正常山羊血清,濕盒內(nèi)室溫孵育20 min,吸去孵育液;滴加兔抗大鼠NF-κB p65抗體(1∶200),4 ℃孵育過夜,PBS洗2 min×3次;滴加生物素化羊抗兔IgG,37 ℃孵育50 min后PBS洗2 min×3次;滴加SABC,室溫下靜置20 min,PBS洗5 min×3次。DAB顯色,蘇木素復(fù)染,脫水、透明及封片,光鏡下觀察,胞漿棕黃色著色為陽性細(xì)胞,每只大鼠取4張切片,獲取切片圖像(×200),隨機(jī)選取每張切片中的 4 個視野,各組免疫組化的陽性產(chǎn)物強(qiáng)度通過圖像分析系統(tǒng)測定灰度值 (灰度值范圍 0~225,0表示陽性產(chǎn)物表達(dá)最強(qiáng),225表示陽性產(chǎn)物表達(dá)最弱),用均數(shù)表示表達(dá)強(qiáng)度。

    2.4Western blotting法檢測大鼠心肌組織TNF-α表達(dá) 液氮凍存的心肌組織100 mg,按沈誠等[6]的方法提取心肌細(xì)胞核蛋白,經(jīng) Bradford 法蛋白定量后,保存于-70 ℃?zhèn)溆?。取核蛋白樣品加等體積的 2×電泳樣品緩沖液加熱變性后,每泳道以 20 μg蛋白上樣,經(jīng) 10%十二烷基硫酸鈉(SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)后,電轉(zhuǎn)至 PVDF 膜上。用 5%脫脂奶粉封閉后,先后加入兔抗大鼠 TNF-α 多克隆抗體及辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔 IgG。使用 ECL顯影試劑盒進(jìn)行顯影,定影。用 β-actin 作為內(nèi)參照。實驗結(jié)果用光密度掃描儀掃描,目的條帶積分吸光度值與上樣內(nèi)參照積分吸光度值比較得出相對吸光度值。

    2.5血清IL-1β 含量的測定 實驗結(jié)束,右心室取血2 mL,室溫靜置1 h,3 000 r·min-1離心10 min,分離出血清,-80 ℃保存,通過ELISA法測定血清IL-1β含量。

    2.6心肌髓過氧化物酶活性檢測 切取左室心尖部心肌100~150 mg,制成10%勻漿,利用供氫體鄰連茴香胺供氫生成黃色產(chǎn)物,通過比色法測定產(chǎn)物生成量,進(jìn)而推算出 MPO活性。

    3統(tǒng)計學(xué)處理

    數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)來表示,采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件分析。多組間比較用單因素方差分析,兩兩比較用LSD-t檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1心肌組織結(jié)構(gòu)改變

    光鏡下,假手術(shù)組心肌纖維排列整齊,橫紋排列整齊,無腫脹斷裂和變性壞死,無中性粒細(xì)胞浸潤;模型組可見心肌纖維腫脹,部分橫紋消失,局灶性出血、心肌細(xì)胞變性壞死,中性粒細(xì)胞大量浸潤。阿司匹林組心肌纖維輕度腫脹,排列尚有序,中性粒細(xì)胞少量浸潤。高劑量淫羊藿苷組部分心肌細(xì)胞水腫,極少有炎癥細(xì)胞浸潤,見圖1。

    Figure 1. Optical micrographs of rat myocardial tissues(HE staining,×400).A:sham group;B:model group;C: low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E:high-dose icariin group;F:aspirin group.

    圖1大鼠心肌組織HE染色

    2免疫組化法測定NF-κB的表達(dá)

    與假手術(shù)組比較,模型組心肌細(xì)胞核內(nèi)見大量棕色顆粒,NF-κB p65 蛋白灰度值顯著減小(P<0.01),表示模型組心肌細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65 蛋白表達(dá)顯著增加;與模型組比較,淫羊藿苷組和阿司匹林組心肌細(xì)胞核棕色顆粒減少,NF-κB p65 蛋白灰度值增大(P<0.05 或P<0.01),表示 NF-κB p65 蛋白表達(dá)降低,淫羊藿苷高劑量組較中、低劑量組降低更明顯 (P<0.05),呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較差異不明顯(P>0.05),見圖2、表 1。

    Figure 2. Immunohistochemical staining of rat myocardial tissue NF-κB p65(×400). A: sham group;B:model group;C:low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E: high-dose icariin group;F:aspirin group.

    圖2大鼠心肌組織NF-κBp65免疫組化染色

    表1大鼠心肌組織中NF-κBp65的灰度值

    Table 1. NF-κB p65 gray values in rat myocardial tissues (Mean±SD.n=8)

    GroupNF-κBp65(grayvalue)Sham198.53±12.19Model69.20±17.73**Low-doseicariin90.21±13.98△Middle-doseicariin120.33±15.23△△High-doseicariin162.96±14.29△△Aspirin163.00±13.98△△

    **P<0.01vssham group;△P<0.05,△△P<0.01vsmodel group.

    3用Westernblotting法檢測各組大鼠心肌組織TNF-α的表達(dá)水平

    缺血再灌注后心肌組織中 TNF-α 水平變化如圖3所示。模型組TNF-α表達(dá)水平明顯高于假手術(shù)組(P<0.01);與模型組相比,淫羊藿苷各劑量組TNF-α均降低,且呈劑量依賴關(guān)系,淫羊藿苷中、高劑量組及阿司匹林組TNF-α水平顯著低于模型組(P<0.05)。淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05)。上述結(jié)果提示淫羊藿苷可以減少大鼠心肌細(xì)胞TNF-α的生成,減輕炎癥損傷。

    Figure 3. Rat myocardial tissue TNF-α level.A:sham group;B:model group;C:low-dose icariin group;D: middle-dose icariin group;E: high-dose icariin group;F:aspirin group.Mean±SD.n=8.**P<0.01vssham group;△P<0.05vsmodel group.

    圖3大鼠心肌組織TNF-α水平

    4各組大鼠血清IL-1β水平

    與假手術(shù)組比較,模型組血清IL-1β明顯增高(P<0.01);與模型組比較,淫羊藿苷高中低劑量組血清IL-1β降低,且呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05),見表2。

    5對大鼠心肌組織MPO活性的影響

    與假手術(shù)組比較,各組缺血再灌注后心肌MPO活性明顯增高(P<0.01)。與模型組比較,淫羊藿苷高、中、低劑量組大鼠心肌組織MPO活性降低,且呈劑量依賴關(guān)系;淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異(P>0.05),見表2。

    表2大鼠血清IL-1β水平和大鼠心肌組織MPO活性

    Table 2. IL-1β level in rat serum and MPO activity in rat myocardial tissues (Mean±SD.n=8)

    GroupIL-1β(ng/L)MPO(U/g)Sham38.14±10.690.74±0.15Model95.82±18.31**1.38±0.31**Low-doseicariin84.38±17.96△1.30±0.24△Middle-doseicariin67.39±16.28△1.07±0.19△High-doseicariin59.67±14.32△0.95±0.12△Aspirin60.03±13.98△0.96±0.18△

    **P<0.01vssham group;△P<0.05vsmodel group.

    討 論

    心肌缺血再灌注損傷是一個多機(jī)制參與、多因素相互影響而導(dǎo)致的復(fù)雜的病理生理過程。近年來,大量研究表明,炎癥反應(yīng)也參與了心肌缺血再灌注損傷的形成[7]。李擁軍等[8]研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞因子參與了心肌缺血再灌注損傷,炎癥細(xì)胞因子的增高是反映急性心肌梗死微循環(huán)再灌注不良的標(biāo)志。謝利平等[9]研究發(fā)現(xiàn),抑制缺血再灌注后大鼠血清和組織中炎癥因子堆積,可以達(dá)到保護(hù)心肌的作用。

    NF-κB 對免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)起調(diào)控作用,在心肌缺血再灌注損傷中起關(guān)鍵作用。炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β的增加和缺氧均可激活NF-κB,活化的NF-κB迅速進(jìn)入核內(nèi)啟動炎癥細(xì)胞因子、選擇素和黏附分子的表達(dá),升高的NF-κB等進(jìn)一步刺激NF-κB,形成正反饋,導(dǎo)致細(xì)胞因子水平不斷升高[10]?;罨?NF-κB和TNF-α可誘導(dǎo)大鼠心肌組織表達(dá)脂多糖誘導(dǎo)的趨化因子,引導(dǎo)中性粒細(xì)胞向再灌注組織趨化[11]。本研究結(jié)果表明,淫羊藿苷預(yù)先給藥可明顯抑制NF-κB的活化。

    TNF-α也是一種重要的炎癥因子,通常在心肌組織中的水平較低,但發(fā)生心肌缺血再灌注損傷后,損傷的細(xì)胞便會釋放大量 TNF-α,并通過下游的途徑促進(jìn)心肌缺血再灌注損傷的進(jìn)展:TNF-α 可以抑制心肌的收縮功能;刺激中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分泌黏附分子,加速細(xì)胞之間的黏附和血管內(nèi)凝血,引起心肌細(xì)胞壞死、凋亡等,加重心肌缺血再灌注損傷。殷然等[12]研究發(fā)現(xiàn),抑制由心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(anoxia/reoxygenation,A/R) 損傷造成的乳鼠心肌細(xì)胞炎癥因子 TNF-α表達(dá),可以減輕乳鼠心肌細(xì)胞 A/R 損傷。

    IL-1β 是一種重要的炎癥因子,在正常血清中的表達(dá)較低,當(dāng)心肌缺血再灌注損傷發(fā)生時其水平明顯升高。IL-1β 引起心肌組織損傷可能的機(jī)制:IL-1β 可以直接上調(diào)細(xì)胞間黏附分子 1等的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞及其基質(zhì)并通過內(nèi)皮進(jìn)入缺血區(qū),通過釋放氧自由基、栓塞微血管等途徑,最終引起缺血再灌注后的心肌損傷及細(xì)胞凋亡[13-14]。

    本研究結(jié)果顯示,淫羊藿苷低、中、高劑量組大鼠心肌組織 TNF-α 水平和血清IL-1β 濃度皆下降,且存在劑量依賴關(guān)系,其中淫羊藿苷高劑量組與阿司匹林組比較無顯著差異。模型組大鼠再灌注后心肌組織出現(xiàn)病變,心肌細(xì)胞排列稀疏,橫紋不清晰,心肌間質(zhì)水腫明顯,可見炎癥細(xì)胞浸潤。淫羊藿苷中、高劑量組大鼠心肌缺血再灌注時,心肌組織炎癥細(xì)胞浸潤減輕,與炎癥因子 TNF-α 及 IL-1β 釋放量減少的結(jié)果一致,證明了淫羊藿苷能夠顯著抑制心肌缺血再灌注損傷時的炎癥反應(yīng)。

    MPO是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)嗜天青顆粒產(chǎn)生的一種重要的過氧化物酶,檢測組織、血清中的MPO活性可以反映中性粒細(xì)胞浸潤程度[15-16]。其含量增高可以間接反映組織中存在炎癥,所以,只要有中性粒細(xì)胞浸潤的組織都能夠通過MPO活性的測定來判定細(xì)胞浸潤程度。本實驗結(jié)果顯示,模型組心肌中MPO活性明顯增強(qiáng),這說明白細(xì)胞大量浸潤;中、高劑量淫羊藿苷預(yù)處理可顯著降低心肌組織中MPO活性,減少白細(xì)胞的浸潤。HE染色結(jié)果與之相符。

    綜上所述,本研究結(jié)果表明淫羊藿苷可以降低大鼠血清中炎癥因子 IL-1β 及心肌組織TNF-α的生成和釋放,降低心肌組織 MPO 活性和NF-κB表達(dá),改善心肌組織的病理變化。這說明淫羊藿苷可能通過抑制心肌缺血再灌注損傷的炎癥反應(yīng)來發(fā)揮心肌保護(hù)作用,并且炎癥因子及炎癥細(xì)胞水平與淫羊藿苷劑量存在依賴關(guān)系,但具體的分子機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

    [1] 王凌燕,蔡高軍,孫文偉,等.脂質(zhì)載體前列腺素E1對大鼠心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用[J].中國實驗診斷學(xué),2006,10(3):255-257.

    [2] Ryu SM,Kim HJ,Cho KR,et al.Myocardial protective effect of tezosentan, an endothelin receptor antagonist, for ischemia-reperfusion injury in experimental heart failure models[J]. J Korean Med Sci,2009,24(5):782-788.

    [3] 豐貴文,劉龍山,尚文俊. 淫羊藿苷對大鼠腎臟缺血再灌注后炎性損傷的保護(hù)[J].中國組織工程研究,2012,16(40):7496-7502.

    [4] 蔣毅萍,金 宏,徐江平.淫羊藿總苷對缺血-再灌注損傷大鼠心肌的保護(hù)作用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2006,25(9):860-862.

    [5] 王桂敏,翟宏穎.菟絲子黃酮對心肌缺血再灌注損傷大鼠 Bcl-2、Caspase-3 表達(dá)的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2012,32(2):343-345.

    [6] 沈 誠, 范士志, 陳建明, 等.JAK/STAT 通路對缺血再灌注心肌NF-κB 和 TNF-α 表達(dá)的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2006,16(7):985-987.

    [7] Van Waes C. Nuclear factor-kappa B in development,prevention,and therapy of cancer [J]. Clin Cancer Res,2007,13(4):1076-1082.

    [8] 李擁軍,丁文惠,高 煒,等.炎性相關(guān)細(xì)胞因子和心肌梗死微循環(huán)再灌注狀態(tài)的關(guān)系[J].中華內(nèi)科雜志,2004,43(2):102-105.

    [9] 謝利平,揚(yáng) 帆,劉 振,等.左旋四氫巴馬汀對心肌缺血再灌注損傷的作用及機(jī)制研究[J].中國病理生理雜志 ,2010, 26(10): 1996.

    [10] Fan H,Sun B,Gu Q,et al.Oxygen radicals trigger activition of NF-kappa B and AP-1 and upregulation of ICAM-1 in reperfused canine heart[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2002,282(5):H1778-H1786.

    [11] Chandrasekar B,Smith JB,Freeman GL.Ischemia-reperfusion of rat myocardium activates nuclear factor-κB and induces neutrophil infiltration via lipopolysaccharide-induced CXC chemokine[J].Circulation,2001,103(13):2296-2302.

    [12] 殷 然,王夢洪,鄭澤琪,等.肝 X 受體抑制乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷[J].中國病理生理雜志,2011,27(9):1671-1675.

    [13] Karin M. Nuclear factor-kappa B in cancer development and progression [J].Nature,2006,441(7092):431-436.

    [14] 王 勇,史朝暉 ,姜希宏.核因子-κB在胃癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥,2004,44(6):19-20.

    [15] Xiong N,Sun F,Zhao H,et al.Effect of Rosiglitazone Maleate on inflammation following cerebral ischemia/reperfusion in rats[J]. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2007,27(3):295-298.

    [16] Samimi-Fard S, Dominguez-Rodriguez A, Abreu-Gonzalez P,et al.Role of myeloperoxidase as predictor of systemic inflammatory response syndrome in patients with ST-segmentelevation myocardial infarction after primary percutaneous coronary intervention[J].Am J Cardiol,2009,104(5):634-637.

    Effectsoficariinpreconditioningoninflammatoryresponsesinmyocar-dialischemia-reperfusioninjury

    GUO Qing-jun1, WANG Gui-min2, ZHANG Xiu-xiu1

    (1GraduateCollege,2TheFirstAffiliatedHospital,LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121000,China.E-mail:wangguimin4197176@163.com)

    AIM: To observe the effects of icariin on myocardial ischemia-reperfusion injury.METHODSThe left anterior descending coronary artery was ligated for 30 min and then loosened for 2 h to establish the rat model of myocardial ischemia-reperfusion injury. Forty-eight healthy adult male SD rats weighing 250~300 g were randomly divided into sham group, model group, low-, middle-and high-dose icariin groups, and aspirin group. The morphological changes of the myocardium were observed by HE staining. The protein expression of NF-κB p65 in the myocardial nucleus was determined by the method of immunohistochemistry. The content of tumor necrosis factor α (TNF-α) in the myocardial tissues was detected by Western blotting. The level of interleukin 1β (IL-1β) in the serum was measured by ELISA. The activity of myeloperoxidase (MPO) in the myocardial tissues was assayed by colorimetry.RESULTSCompared with sham group, TNF-α content, IL-1β concentration, NF-κB expression and MPO activity in all other groups increased. Compared with model group, TNF-α content, IL-1β concentration, NF-κB expression and MPO activity in low-, middle- and high-dose icariin groups and aspirin group all decreased. No significant difference of the above parameters between high-dose icariin group and aspirin group was observed.CONCLUSIONIcariin preconditioning reduces inflammatory responses in the process of myocardial ischemia-reperfusion injury in a dose-dependent manner.

    Icariin; Myocardial ischemia; Reperfusion injury; Inflammation

    R363

    A

    10.3969/j.issn.1000- 4718.2013.11.021

    1000- 4718(2013)11- 2034- 05

    2013- 07- 26

    2013- 10- 08

    △通訊作者Tel: 0416-4197176; E-mail: wangguimin4197176@163.com

    猜你喜歡
    藿苷阿司匹林心肌細(xì)胞
    淫羊藿中朝藿苷A、B和C的酶轉(zhuǎn)化及其稀有箭藿苷的制備
    阿司匹林,天天在吃,但你可能從一開始就沒吃對
    祝您健康(2023年9期)2023-09-05 02:06:28
    左歸降糖舒心方對糖尿病心肌病MKR鼠心肌細(xì)胞損傷和凋亡的影響
    Me & Miss Bee
    餐前還是飯后?阿司匹林到底怎么吃
    活血解毒方對缺氧/復(fù)氧所致心肌細(xì)胞凋亡的影響
    餐前還是飯后?阿司匹林到底怎么吃
    新型雙相酶水解體系制備寶藿苷I
    中成藥(2018年12期)2018-12-29 12:26:00
    雙藿苷A分子印跡聚合物的制備及應(yīng)用
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:49
    心肌細(xì)胞慢性缺氧適應(yīng)性反應(yīng)的研究進(jìn)展
    最黄视频免费看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 高清欧美精品videossex| www日本在线高清视频| 日韩一区二区三区影片| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品亚洲成国产av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 国产av精品麻豆| 性高湖久久久久久久久免费观看| 777米奇影视久久| 精品国产乱码久久久久久男人| 精品乱码久久久久久99久播| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲一区中文字幕在线| 久久精品国产综合久久久| 丰满迷人的少妇在线观看| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 男女之事视频高清在线观看| 免费高清在线观看日韩| 91精品三级在线观看| 在线观看人妻少妇| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 怎么达到女性高潮| 久久久久视频综合| 国产色视频综合| 天天操日日干夜夜撸| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 性高湖久久久久久久久免费观看| 宅男免费午夜| 午夜福利欧美成人| 丝瓜视频免费看黄片| 999精品在线视频| 成年版毛片免费区| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 丝袜美足系列| 黄片播放在线免费| 国产精品一区二区在线不卡| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 人人妻人人澡人人看| 国产免费福利视频在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产伦理片在线播放av一区| 在线观看一区二区三区激情| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| av天堂在线播放| 91字幕亚洲| av天堂在线播放| 国产真人三级小视频在线观看| 精品一区二区三卡| 另类亚洲欧美激情| 久久中文看片网| 捣出白浆h1v1| 久久久国产精品麻豆| 极品教师在线免费播放| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久免费观看电影| 免费观看人在逋| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲性夜色夜夜综合| 天天添夜夜摸| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产免费视频播放在线视频| av国产精品久久久久影院| 国精品久久久久久国模美| 窝窝影院91人妻| 精品卡一卡二卡四卡免费| 香蕉久久夜色| 亚洲色图综合在线观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品欧美亚洲77777| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 青草久久国产| 日韩大码丰满熟妇| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 五月天丁香电影| 午夜91福利影院| 啦啦啦在线免费观看视频4| 丰满迷人的少妇在线观看| 一级毛片电影观看| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲人成伊人成综合网2020| 高清av免费在线| 我的亚洲天堂| 99精品在免费线老司机午夜| 国产男女内射视频| 国产一区二区在线观看av| 国产精品成人在线| 制服诱惑二区| 久久久国产成人免费| 国产色视频综合| 日本av免费视频播放| 老鸭窝网址在线观看| 国产精品影院久久| 成人av一区二区三区在线看| 在线观看免费视频日本深夜| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 一本久久精品| 国产99久久九九免费精品| 多毛熟女@视频| 久久 成人 亚洲| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 色老头精品视频在线观看| 久久久精品区二区三区| 成人特级黄色片久久久久久久 | 精品亚洲成国产av| tube8黄色片| 99re在线观看精品视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产伦人伦偷精品视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 丝袜人妻中文字幕| 无人区码免费观看不卡 | 久久久久久免费高清国产稀缺| av免费在线观看网站| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 男人舔女人的私密视频| 免费看a级黄色片| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产欧美亚洲国产| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 在线av久久热| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲av成人一区二区三| 香蕉久久夜色| 欧美精品亚洲一区二区| 水蜜桃什么品种好| 超碰97精品在线观看| 亚洲 国产 在线| 亚洲精品在线观看二区| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产高清激情床上av| 亚洲中文av在线| 丝袜人妻中文字幕| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲五月婷婷丁香| 99香蕉大伊视频| 极品人妻少妇av视频| 狂野欧美激情性xxxx| 色综合欧美亚洲国产小说| 高清在线国产一区| 精品一区二区三区av网在线观看 | 成年人午夜在线观看视频| 女同久久另类99精品国产91| 丰满饥渴人妻一区二区三| 不卡一级毛片| 日本五十路高清| avwww免费| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品.久久久| 日韩视频一区二区在线观看| 免费高清在线观看日韩| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品 国内视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 操美女的视频在线观看| av网站在线播放免费| 午夜成年电影在线免费观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 免费在线观看日本一区| netflix在线观看网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品国产国语对白av| 99国产精品一区二区三区| 黄色视频在线播放观看不卡| 成人特级黄色片久久久久久久 | 欧美激情 高清一区二区三区| videosex国产| 精品福利永久在线观看| 国产成人精品无人区| 又大又爽又粗| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲精品乱久久久久久| 多毛熟女@视频| 国产成人免费无遮挡视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一二三四在线观看免费中文在| 久久久精品区二区三区| svipshipincom国产片| 三级毛片av免费| 桃花免费在线播放| 多毛熟女@视频| 日日夜夜操网爽| 一区二区三区乱码不卡18| 老司机在亚洲福利影院| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久热这里只有精品99| 99re6热这里在线精品视频| 天天添夜夜摸| 香蕉国产在线看| 免费不卡黄色视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 男女床上黄色一级片免费看| 女性生殖器流出的白浆| 日韩人妻精品一区2区三区| 最黄视频免费看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 黄色a级毛片大全视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲熟女毛片儿| 午夜免费成人在线视频| 一区福利在线观看| 深夜精品福利| 99国产综合亚洲精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 三级毛片av免费| 国产精品 欧美亚洲| 日日夜夜操网爽| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 老汉色∧v一级毛片| 在线观看人妻少妇| 国产一区二区激情短视频| 亚洲av日韩在线播放| 欧美精品一区二区免费开放| 成人国产av品久久久| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 老汉色∧v一级毛片| 波多野结衣av一区二区av| a级片在线免费高清观看视频| 天天添夜夜摸| 91国产中文字幕| 中文字幕色久视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产在视频线精品| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产免费av片在线观看野外av| 久久av网站| 国产精品偷伦视频观看了| 夫妻午夜视频| 高清欧美精品videossex| 欧美 日韩 精品 国产| 国产欧美日韩一区二区三| 国产成人精品在线电影| 青草久久国产| av网站在线播放免费| 精品久久久精品久久久| 亚洲 国产 在线| 一区福利在线观看| 五月开心婷婷网| 免费人妻精品一区二区三区视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 99国产精品免费福利视频| 性色av乱码一区二区三区2| 制服诱惑二区| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产一区二区三区视频了| 久热这里只有精品99| 国产有黄有色有爽视频| 欧美乱妇无乱码| 2018国产大陆天天弄谢| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产视频一区二区在线看| 国产精品久久久av美女十八| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久久国产成人免费| 免费不卡黄色视频| 精品一区二区三区av网在线观看 | 新久久久久国产一级毛片| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久精品国产综合久久久| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 老司机靠b影院| 国产伦理片在线播放av一区| 高清黄色对白视频在线免费看| bbb黄色大片| 日日爽夜夜爽网站| 日本黄色视频三级网站网址 | 好男人电影高清在线观看| 国产精品二区激情视频| 又大又爽又粗| www.熟女人妻精品国产| 午夜激情av网站| 考比视频在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲欧洲日产国产| 757午夜福利合集在线观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 一二三四社区在线视频社区8| 成年人黄色毛片网站| 黑人欧美特级aaaaaa片| 999精品在线视频| 亚洲熟妇熟女久久| 青草久久国产| 久久午夜综合久久蜜桃| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲成人免费av在线播放| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 一进一出抽搐动态| 亚洲欧洲日产国产| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | av免费在线观看网站| 午夜免费成人在线视频| 91成年电影在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| av免费在线观看网站| 日韩精品免费视频一区二区三区| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 精品少妇内射三级| 在线观看www视频免费| 国产精品久久久人人做人人爽| 91av网站免费观看| 视频区图区小说| 91老司机精品| 国产亚洲一区二区精品| 国产欧美日韩一区二区三| 精品福利永久在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 国产成+人综合+亚洲专区| av线在线观看网站| 91av网站免费观看| 成人三级做爰电影| 香蕉久久夜色| 乱人伦中国视频| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲情色 制服丝袜| 欧美成人午夜精品| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 丝瓜视频免费看黄片| 女人久久www免费人成看片| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 一级黄色大片毛片| 他把我摸到了高潮在线观看 | 成人精品一区二区免费| 丝袜在线中文字幕| 欧美日本中文国产一区发布| 免费观看a级毛片全部| 脱女人内裤的视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久久久精品人妻al黑| 欧美精品一区二区免费开放| 高潮久久久久久久久久久不卡| 蜜桃国产av成人99| 在线天堂中文资源库| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 99精品在免费线老司机午夜| 免费在线观看影片大全网站| 国产精品二区激情视频| 国产精品成人在线| 黄色怎么调成土黄色| 飞空精品影院首页| 久久久久精品人妻al黑| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 一级毛片精品| 中文字幕制服av| 午夜福利免费观看在线| 婷婷丁香在线五月| 亚洲中文字幕日韩| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 波多野结衣av一区二区av| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 亚洲五月婷婷丁香| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 自线自在国产av| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 免费不卡黄色视频| 精品福利观看| 大香蕉久久网| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 一级毛片电影观看| 欧美 日韩 精品 国产| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 制服诱惑二区| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 成人影院久久| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 51午夜福利影视在线观看| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久亚洲真实| 搡老乐熟女国产| 国产深夜福利视频在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久9热在线精品视频| 亚洲精品久久午夜乱码| videos熟女内射| 18在线观看网站| 男男h啪啪无遮挡| 国产xxxxx性猛交| 国产欧美日韩一区二区精品| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲视频免费观看视频| 免费在线观看黄色视频的| 日韩免费高清中文字幕av| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲精品在线美女| 精品国产乱码久久久久久男人| 成人18禁在线播放| 亚洲伊人色综图| 香蕉国产在线看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产三级黄色录像| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 好男人电影高清在线观看| 中国美女看黄片| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 99国产精品免费福利视频| 国产麻豆69| 中文亚洲av片在线观看爽 | 国产亚洲欧美在线一区二区| av网站在线播放免费| 一二三四在线观看免费中文在| 岛国毛片在线播放| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 满18在线观看网站| 亚洲国产欧美网| 捣出白浆h1v1| 欧美成人免费av一区二区三区 | 脱女人内裤的视频| 午夜福利视频在线观看免费| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产成人免费无遮挡视频| 国产在线观看jvid| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲中文av在线| 正在播放国产对白刺激| 丁香六月天网| 日韩有码中文字幕| 精品国产亚洲在线| 母亲3免费完整高清在线观看| 色综合婷婷激情| 欧美日本中文国产一区发布| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久久精品免费免费高清| 亚洲综合色网址| 亚洲成人免费av在线播放| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产一区二区激情短视频| 国产一区二区 视频在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 女人精品久久久久毛片| 自线自在国产av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 我的亚洲天堂| 精品国产一区二区三区四区第35| 成人黄色视频免费在线看| 757午夜福利合集在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 涩涩av久久男人的天堂| 久久九九热精品免费| 在线 av 中文字幕| 国产午夜精品久久久久久| 制服人妻中文乱码| 午夜福利视频在线观看免费| 丝袜人妻中文字幕| 午夜激情av网站| 国产免费福利视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 国产一卡二卡三卡精品| 无人区码免费观看不卡 | 老司机影院毛片| 久久久久久久久免费视频了| 国产真人三级小视频在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 午夜视频精品福利| a级毛片在线看网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 飞空精品影院首页| 国产成人影院久久av| 高清欧美精品videossex| 黄色视频不卡| av天堂久久9| 在线观看一区二区三区激情| av福利片在线| 亚洲熟女毛片儿| 大型av网站在线播放| 午夜日韩欧美国产| 午夜福利,免费看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲伊人色综图| 69精品国产乱码久久久| 水蜜桃什么品种好| 欧美激情高清一区二区三区| 国产精品电影一区二区三区 | tube8黄色片| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲情色 制服丝袜| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 老汉色∧v一级毛片| 久久精品91无色码中文字幕| 丰满少妇做爰视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产男女内射视频| 丝袜喷水一区| 黄色片一级片一级黄色片| 国产精品久久久久久精品古装| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 黄色视频在线播放观看不卡| 国产精品av久久久久免费| av国产精品久久久久影院| 国产精品国产av在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久人人97超碰香蕉20202| 后天国语完整版免费观看| 一级a爱视频在线免费观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 又黄又粗又硬又大视频| 99国产综合亚洲精品| 99九九在线精品视频| 国产免费现黄频在线看| 国产av国产精品国产| 99精品欧美一区二区三区四区| 在线播放国产精品三级| 国产高清激情床上av| av网站在线播放免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 女人精品久久久久毛片| 亚洲伊人色综图| 黄色片一级片一级黄色片| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 美女主播在线视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 最黄视频免费看| 国产高清视频在线播放一区| 香蕉国产在线看| 久久久精品区二区三区| 久久久久国内视频| 欧美日韩av久久| 日本a在线网址| 一本综合久久免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 丰满迷人的少妇在线观看| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲情色 制服丝袜| 十八禁网站网址无遮挡| 丁香六月欧美| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 午夜福利免费观看在线| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲男人天堂网一区| 91大片在线观看| 亚洲av美国av| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产欧美亚洲国产| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产精品.久久久| 热re99久久国产66热| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品福利永久在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 成人手机av| 欧美 日韩 精品 国产| 日本wwww免费看| 国产精品久久久av美女十八| 一级片'在线观看视频| 久久狼人影院| www.熟女人妻精品国产| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 99re6热这里在线精品视频| 我的亚洲天堂| 亚洲精品美女久久av网站| 久久青草综合色| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产亚洲欧美在线一区二区| 中文字幕高清在线视频| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲成人手机| 久久久久精品人妻al黑| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产免费福利视频在线观看| 国产精品1区2区在线观看. | 久久久久久人人人人人| 无人区码免费观看不卡 | 三级毛片av免费| 精品亚洲成国产av|