甲酯化植物油基煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑高效液相色譜分析

蘇旺蒼， 吳仁海， 王恒亮， 孫蘭蘭， 宋文巖， 孫曉敏， 高新菊， 張永超

(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/河南省農(nóng)作物病蟲害防治重點實驗室/農(nóng)業(yè)部華北南部作物有害生物綜合治理重點實驗室，河南鄭州 450002)

甲酯化植物油基煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑高效液相色譜分析

蘇旺蒼， 吳仁海， 王恒亮， 孫蘭蘭， 宋文巖， 孫曉敏， 高新菊， 張永超

(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/河南省農(nóng)作物病蟲害防治重點實驗室/農(nóng)業(yè)部華北南部作物有害生物綜合治理重點實驗室，河南鄭州 450002)

采用高效液相色譜法分析甲酯化植物油基煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑，使用C18反相柱和紫外可變波長檢測器，以乙腈、水和乙酸為流動相，用外標(biāo)法對有效成分進(jìn)行分析和定量。煙嘧磺隆、乙草胺標(biāo)準(zhǔn)差分別為0.031 1、0.042 1，變異系數(shù)分別為0.31%、0.11%，平均回收率分別為99.83%、99.81%。

煙嘧磺??；乙草胺；高效液相色譜；分析

玉米是重要的糧食和飼料作物，由于便于機械化耕種與收獲，管理簡便，已發(fā)展成我國第一大作物。玉米生長于高溫多雨的季節(jié)，雜草防治一直是玉米田間管理的重要難題，尤其是近年來廣泛采用貼茬直播等簡易種植技術(shù)，雜草出苗期不集中，草齡差異較大，使得玉米田除草劑要具備優(yōu)良的殺草效果與封閉效果。河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所將煙嘧磺隆與乙草胺進(jìn)行混配，兼?zhèn)涿缜俺莺兔绾蠓忾]的雙重功效，同時以甲酯化植物油為載體，大大提升了產(chǎn)品的除草效果、穩(wěn)定性及環(huán)境的友好性，具有較好的市場前景。

煙嘧磺隆與乙草胺是大宗型除草劑[1-3]，單劑的分析方法已有報道[4-5]，但其混配制劑的分析方法尚未見介紹，尤其是加入甲酯化植物油之后對乙草胺的干擾較大[6]。本研究采用高效液相色譜法，通過分析煙嘧磺隆和乙草胺的理化性質(zhì)，建立了在同一色譜條件下定量分析試樣中煙嘧磺隆、乙草胺甲酯化植物油劑的分析方法，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，該方法操作簡單、快速、重復(fù)性好。

1 材料與方法

1.1 試劑和溶液

乙腈，為色譜級；水，為超純水；冰乙酸，為分析純；煙嘧磺隆標(biāo)樣(97.0%原藥，德國Dr. Ehrenstorfer公司)；乙草胺標(biāo)樣(97.7%原藥，美國Accustandard公司)；試樣：50%煙嘧磺隆·乙草胺油懸浮劑(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所農(nóng)藥實驗廠)。

1.2 儀器

Agilent1200高效液相色譜儀；紫外檢測器；ZORBAX SB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，Agilent)；微量進(jìn)樣器(25 μL)；天津奧特賽恩斯AS3120型超聲波清洗器；梅特勒-托利多AB104-S分析天平。

1.3 色譜條件

流動相：V(乙腈) ∶V(pH值4.0的乙酸水溶液)=55 ∶45；流速0.8 mL/min；檢測波長220 nm；柱溫30 ℃；進(jìn)樣體積10 μL；保留時間：煙嘧磺隆約4.1 min，乙草胺約18.8 min。煙嘧磺隆和乙草胺的高效液相色譜圖見圖1。

1.4 測定步驟

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 分別稱取煙嘧磺隆標(biāo)樣0.12 g、乙草胺標(biāo)樣0.03 g(均精確至0.000 2 g)，置于同一50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超聲溶解，冷卻至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，靜止，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制 稱取試樣0.24 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入30 mL乙腈超聲溶解，冷卻至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，靜止，備用。用 0.45 μm孔徑濾膜過濾。

1.4.3 測定 在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計算各相對響應(yīng)值，待相鄰2針的相對響應(yīng)值變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣測定。

1.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液的峰面積分別進(jìn)行平均，按式(1)計算試樣中煙嘧磺隆和乙草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)：

(1)

式中：A1為標(biāo)樣溶液色譜圖上煙嘧磺隆(或乙草胺)峰面積平均值，A2為試樣溶液色譜圖上煙嘧磺隆(或乙草胺)峰面積的平均值，m1為標(biāo)樣的質(zhì)量(g)，m2為試樣的質(zhì)量(g)，P為標(biāo)樣中煙嘧磺隆(或乙草胺)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié)果與分析

2.1 流動相的確定

為了能夠有效分離煙嘧磺隆和乙草胺，根據(jù)二者化合物的結(jié)構(gòu)特點，選擇ZORBAX SB-C18不銹鋼柱，先后以甲醇-水和乙腈-水為流動相進(jìn)行試驗。在甲醇-水系統(tǒng)時，乙草胺的峰形很寬并拖尾，同時甲醇的比例低于60%，乙草胺的紫外吸收受溶劑的影響較大，而在乙腈-水流動相中對紫外吸收影響不明顯?？紤]到乙草胺的拖尾問題，選用乙酸作為減尾劑，可得到理想的峰形。因此，最終確立乙腈-酸化水(乙酸調(diào)節(jié)pH值4.0，體積比55 ∶45)為流動相，流速為0.8 mL/min。

2.2 檢測波長的選擇

吸收峰面積直接受波長的影響，利用可變紫外波長檢測器在210～290 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行選擇，發(fā)現(xiàn)220 nm作為檢測波長時，煙嘧磺隆和乙草胺均有較好的吸收，2種有效成分在220 nm處的色譜圖分離、峰形均很好，且無雜質(zhì)干擾，因此最終選定220 nm作為檢測波長。

2.3 方法的線性關(guān)系測定

用移液管移取0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00 mL含煙嘧磺隆100 μg/mL、乙草胺100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于10 mL容量瓶中，用流動相加至刻度，超聲溶解。在上述色譜條件下進(jìn)行測定，分別以煙嘧磺隆和乙草胺溶液的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求其回歸方程。煙嘧磺隆的線性方程為y1=33 547x-17 352，線性相關(guān)系數(shù)為0.998 1；乙草胺的線性方程為y2=53 533x-32 669，相關(guān)系數(shù)為0.997 9(圖2)。

2.4 分析方法精密度測定

選取有代表性的煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑試樣1個，在上述色譜操作條件下進(jìn)行5次重復(fù)測定，煙嘧磺隆、乙草胺的標(biāo)準(zhǔn)差分別為0.031 1、0.042 1，變異系數(shù)分別為0.31%、0.11%(表1)。

表1 分析方法精密度試驗結(jié)果Table 1 The precision test results of analysis methods

2.5 分析方法準(zhǔn)確度測定

在已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的樣品中加入一定量的煙嘧磺隆和乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品，在上述測定條件下測得煙嘧磺隆、乙草胺的平均回收率分別為99.83%、99.81%(表2)。

表2 分析方法添加回收率試驗結(jié)果Table 2 The recovery test results of analysis methods

3 結(jié)論

本試驗采用的方法可同時測定甲酯化植物油基煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑中的2種有效成分，具有定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好、分析速度快、分離效果好、操作簡便等特點，符合定量分析的要求，能夠滿足對產(chǎn)品的常規(guī)分析和質(zhì)控研究的要求。

[1]張 琳，胡 永，王偉民，等. 6%煙嘧磺隆sc防除玉米田雜草的效果[J]. 雜草科學(xué)，2012，30(2)：58-60.

[2]潘 浪，徐洪樂，羅小娟. 煙嘧·莠去津不同劑型對后茬作物幼苗的影響[J]. 雜草科學(xué)，2012，30(2)：29-33.

[3]朱海霞，魏有海，郭良芝，等. 81. 5%乙草胺乳油防除春油菜田野燕麥效果[J]. 雜草科學(xué)，2012，30(3)：53-54.

[4]劉利云. 4%煙嘧磺隆懸浮劑的高效液相色譜分析[J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥，2006，5(3)： 33-34.

[5]戴 權(quán)，秦 嶺，易秀成. 50%乙草胺水乳劑的氣相色譜分析研究[J]. 安徽化工，2004，30(5)：53-54.

[6]王成菊，張文吉，李學(xué)鋒，等. 油類助劑在除草劑中應(yīng)用及開發(fā)前景[J]. 精細(xì)化工，2002，19(B08)：91-93，105.

AnalysisofAMethylatedSeedOil-basedSynergisticMixtureofNicosulfuron·AcetochlorbyHPLC

SU Wang-cang， WU Ren-hai， WANG Heng-liang， SUN Lan-lan， SONG Wen-yan， SUN Xiao-min， GAO Xin-ju， ZHANG Yong-chao

(Institute of Plant Protection，Henan Academy of Agricultural Science/Henan Key Laboratory for Control of Crop Diseases and Insect Pests/IPM Key Laboratory in Southern part of North China for Ministry of Agriculture，Zhengzhou 450002，China)

An HPLC method was developed for the quantitative determination of a methylated seed oil-based synergistic mixture of nicosulfuron·acetochlor using an C18column with a variable wavelength UV detector，and a mobile phase of acetonitrile and water，and an external standard. Standard deviations，coefficients of variation，and average recovery were 0.0311，0.31%，and 99.83% for nicosulfuron，and 0.0421，0.11%，and 99.81% for acetochlor，respectively.

nicosulfuron；acetochlor；HPLC；analysis

A

1003-935X(2013)03-0048-03

蘇旺蒼，吳仁海，王恒亮，等. 甲酯化植物油基煙嘧磺隆·乙草胺混配制劑高效液相色譜分析[J]. 雜草科學(xué)，2013，31(3)：48-50.

2013-05-02

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項經(jīng)費(編號：201203098)。

蘇旺蒼 (1981—)，男，河南內(nèi)黃人，博士，助理研究員，從事農(nóng)藥殘留、合成研究。E-mail：suwangcang@126.com。

吳仁海，博士，副研究員，從事農(nóng)藥劑型和除草劑應(yīng)用研究。E-mail：laohaige@163.com。