鹽酸克林霉素的核磁共振波譜研究

崔雪紅

（天津市捷威動力工業(yè)有限公司，天津 300384）

鹽酸克林霉素 (Clindamycin Hydrochloride)，又稱氯林可霉素，氯潔霉素等，于20世紀70年代上市，其抗菌活性強，抗菌譜廣，對革蘭氏陽性菌有明顯抗菌活性。目前國內主要用于人醫(yī)臨床和應用，但在獸藥臨床上具有廣闊的應用前景。該藥物化學名為6-(1-甲基-反-4-丙基-L-2-吡咯烷甲酰氨基)-1-硫代-7(S)-氯-6,7,8-三脫氧-L-蘇式-α-D-半乳辛吡喃糖苷鹽酸鹽，已有文獻[1]對其進行了結構歸屬，但部分數(shù)據(jù)值得商榷，而且所用溶劑為DMSO-d6，對部分信號有掩蓋。因此我們選擇氘代吡啶作為溶劑（化合物為鹽酸鹽，吡啶做溶劑較DMSO溶解性更好）重新對其進行了比較全面的波譜表征，并做了詳盡的解析和譜峰歸屬，以期為同類型的有機藥物分子的結構鑒定提供一點借鑒。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

鹽酸克林霉素由新鄉(xiāng)瑞特精細化工有限公司提供（結構式見圖1），Pyr-d5為美國CIL公司產品。

核磁共振波譜數(shù)據(jù)用BRUKER Avance-300核磁共振波譜儀測試，1H和13C NMR及DEPT-135用QNP四核探頭檢測，1H和13C NMR觀測頻率分別為300.13MHz和75.47MHz。二維圖譜用BBI探頭測定。溶劑為 Pyr-d5，兼做1H NMR（δ=8.74ppm）和13C NMR（δ=150.3ppm）內標（均為最低場信號位移數(shù)值）。1H NMR譜采樣脈沖寬度30°，掃描次數(shù)16；13C NMR譜采樣脈沖寬度90°，掃描次數(shù)10K；DEPT-135掃描次數(shù)5K；1H-1H COSY掃描次數(shù)為8，采樣數(shù)據(jù)點陣 t2×t1=1024×256；HMQC 和 HMBC 掃描次數(shù)均為 8，采樣數(shù)據(jù)點陣 t2×t1=1024×256。（伯）遠程偶合相關，歸屬為C-18，通過HMQC確定δ2.25×10-4為H-18。由此，剩余的一個甲基δ2.98（3H,s）×10-4為 H-16，通過 HMQC 確定 δ41.5×10-4（伯）為 C-16。H-13和 H-14均與 δ37.7（叔）×10-4遠程偶合相關，歸屬為 C-11，HMQC確認 δ2.27×10-4為H-11。

圖1 鹽酸克林霉素的化學結構

HMBC 譜中，C-13和 C-16均與 δ2.64×10-4遠程偶合相關，歸屬為H-12，通過HMQC，確認δ62.3（仲）×10-4為 C-12，并確認 δ3.64×10-4為 H-12的另一個質子。則剩余的 δ37.2（仲）×10-4為 C-10，HMQC 確認 δ2.12×10-4為 H-10，H-10 的一個質子與H-11疊加在一起較H-11稍低場一些。C-16和C-10與δ4.48×10-4遠程偶合相關，歸屬為H-9，HMQC 確認 δ69.2（叔）×10-4為 C-9。

至此全部譜峰歸屬完畢，具體數(shù)據(jù)見表1。

2 結果與討論

2.1 鹽酸克林霉素的1H和13C NMR譜信號的歸屬

氫譜顯示該化合物有30個質子，碳譜顯示化合物有18個碳，DEPT-135顯示化合物中有4個仲碳，1個季碳，其余13個碳為伯碳和叔碳。

氫譜中由化學位移及偶合常數(shù)可以辨認出δ5.83×10-4%（1H,d）為 H-1（異頭質子），δ0.73×10-4（3H,t）為H-15，δ1.64×10-4（3H,d）為H-17。結合1H-1H COSY 可以辨認出 H-2（5.02×10-4）、H-3（4.40×10-4）、H-4（4.78×10-4），H-14（1.03×10-4）、H-13（1.20×10-4）及 H-6（5.25×10-4）。結合 HMQC 可確定C-1、C-2、C-3、C-4、C-6、C-13、C-14、C-15 及 C-17。13C NMR中，由化學位移可以知道δ172.0×10-4為 C-8 酰胺羰基碳，HMBC 中，C-8 和 δ9.18（1H,br）遠程偶合相關，且δ9.18ppm處質子經重水交換后消失，確認為NH。

HMBC 譜中，H-6和 H-1與 δ71.0（叔）×10-4處碳遠程偶合相關，H-6和H-17與δ60.3（叔）×10-4處碳遠程偶合相關，分別歸屬為 C-5（δ71.0×10-4）和C-7（δ60.3×10-4）。通過 HMQC 譜可確定H-5（δ4.87×10-4） 和 H-7（δ4.92×10-4）。H-1 與 δ13.7×10-4

表1 鹽酯克林霉素中1H和13C的核磁共振值（溶劑：Pyr-d5）

2.2 討論

選用吡啶做溶劑，溶劑對信號無掩蓋，僅氫譜中質子峰有部分重疊，且HMBC中氨基與C-6、C-8的相關信號及1H-1H COSY中NH與H-6的信號均清晰可辨，較DMSO-d6為好，但羥基峰未能顯示。

1H NMR顯示H-12的兩個質子化學位移相差很大（1×10-4），這是由于五元環(huán)的影響，使得 H-12的兩個質子不能自由旋轉，導致化學環(huán)境不同而致。

H-16、H-12及H-9的化學位移較正常值均向低場位移了0.5×10-4左右，這是因為鹽酸與該化合物中H-16連接的氮成鹽酸鹽的原因[2]。H-16的甲基信號較H-18寬，這是由于C-16連接在與鹽酸成鹽的氮原子上，受14N核電四極矩馳豫效應影響所致[3]，H-9、H-12也是此原因，同時此效應導致H-9和H-12的信號變寬，耦合裂分看不到。

［1］李建軍,丁元晨,王璐.檢驗檢疫科學[J].2004,14(3):42-44.

［2］梁曉天.核磁共振高分辨氫譜的解析和應用)[M].北京:Science Press(科學出版社),1982,177-184.

［3］R.M.Silverstein,G.C.Bassler,Terence C.Morrill,Spectrometric Identification of Organic Compounds 5th ed.[M],New York:John Wiley&Sons,1991:185.