黃疸新生兒血清中TORCH特異性抗體的檢測意義

梅 峻 谷 麗 陳艷杰

同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院兒科，上海 200072

TORCH是一組病原微生物的英文名稱縮寫，其中TOX是弓形蟲，RV是風(fēng)疹病毒，CMV是巨細(xì)胞病毒，HSV是單純皰疹病毒，HSV又可分為兩型，即HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型[1]。近年來很多研究表明TORCH感染與新生兒病理性黃疸的發(fā)生關(guān)系密切，本研究通過對本院住院新生兒感染性黃疸與非黃疸新生兒進(jìn)行TORCH特異性抗體檢測，結(jié)果如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2011年1～4月兒科收治入院的新生兒黃疸100例（新生兒黃疸組），其中男59例，女41例；對照組非黃疸新生兒100例，其中男57例，女43例，新生兒黃疸病例診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《實(shí)用新生兒學(xué)》第3版的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]：①黃疸在出生24 h內(nèi)出現(xiàn)；②血清總膽紅素＞205.2 mol/L或每日上升85 mol/L；③黃疸持續(xù)時間長（足月兒＞2周，早產(chǎn)兒＞4周）；④黃疸褪而復(fù)現(xiàn)。兩組新生兒年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 試劑與儀器

各抗原均由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所提供；羊抗人IgM酶標(biāo)記物購于中科晨宇生物科技公司，聚乙二醇（PEG）粉劑購自美國陶氏PEG。各種TORCH-IgM陽性及陰性血清標(biāo)本來自計劃生育門診，試劑盒是上海生物制品公司生產(chǎn)，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 標(biāo)本采集

所有血清標(biāo)本均采用腹股溝抽血，標(biāo)本量3 mL，統(tǒng)一用生化管采集，無抗凝劑，送檢時間：采集完1 h以內(nèi)。常規(guī)法TORCH-IgM系列診斷試劑由本單位研制，經(jīng)一系列實(shí)驗(yàn)鑒定，符合中國生物制品標(biāo)準(zhǔn)化委員會編寫的中國生物制品規(guī)程中的酶聯(lián)診斷試劑的基本要求。

表1 兩組住院新生兒TORCH抗體檢測結(jié)果

1.4 檢測方法

血清TORCH抗體的檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），操作步驟嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進(jìn)行，取濃縮洗液稀釋后加入20 μL待檢標(biāo)本和陰、陽性對照。每孔加入100 μL酶結(jié)合物，37℃反應(yīng)60 min，洗滌5遍，每孔依次加入底物液50 μL，振蕩混勻終止反應(yīng)。

1.5 判定標(biāo)準(zhǔn)

樣品抗體指數(shù)=樣品吸光度（OD）/臨界校正液平均OD，抗體指數(shù)≤0.90為陰性，在0.91～0.99范圍為可疑，≥1.00為陽性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

本研究所有資料均有同一個人錄入，并由同一人負(fù)責(zé)核實(shí)，確保所有資料的準(zhǔn)確無誤。采用統(tǒng)計軟件SPSS 16.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

本研究兩組中200例新生兒，IgM抗體陽性34例，陽性率17.0%。新生兒黃疸組100例中，TORCH-IgM陽性31例，IgM抗體檢出率31.0%，對照組100例中TORCH-IgM陽性3例，IgM抗體檢出率3.0%，兩組TORCH抗體陽性率相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

新生兒黃疸是新生兒時期的常見病，發(fā)病的主要原因是新生兒時期對膽紅素代謝不成熟，血中膽紅素水平增高，出現(xiàn)皮膚黏膜的黃染現(xiàn)象。過高的膽紅素可以透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，干擾細(xì)胞的代謝功能，引起細(xì)胞功能紊亂[3]。嚴(yán)重者可產(chǎn)生膽紅素腦病，導(dǎo)致嚴(yán)重的后遺癥，因此對于新生兒黃疸應(yīng)該做到早診斷、早治療。本組資料中顯示新生兒黃疸組患兒TORCH特異性抗體檢出率較對照組明顯高，說明在新生兒黃疸發(fā)生原因中，TORCH病毒也是其中一個原因。TORCH病毒在大自然中廣泛存在，感染途徑多樣，如果曾經(jīng)感染過這種病毒，則抗體IgG出現(xiàn)陽性；如果近期剛感染，則抗體IgM檢測陽性，因IgM抗體一個顯著特點(diǎn)是無法通過胎盤屏障，故新生兒血清中TORCHIgM抗體檢測，可明確表示患兒近期內(nèi)的感染情況[4]，故本文對新生兒僅檢測抗IgM抗體。本研究表明，TORCH感染以CMV病毒為主，CMV病毒屬皰疹病毒科B亞科，CMV病毒感染的新生兒臨床表現(xiàn)多樣，但大多數(shù)以黃疸為首發(fā)癥狀，黃疸程度及病程輕重不等[5]。目前關(guān)于CMV病毒是如何引起新生兒黃疸的研究正在進(jìn)行中，新生兒黃疸發(fā)病機(jī)理中膽汁淤積是重要的一個環(huán)節(jié)，最近有研究推測機(jī)體感染CMV病毒后，會誘發(fā)體內(nèi)腫瘤壞死因子α（TNF-α）的產(chǎn)生，從而通過一系列復(fù)雜的免疫反應(yīng)，損傷新生兒肝臟細(xì)胞功能。正常情況下，膽汁在肝內(nèi)產(chǎn)生后，通過膽管系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)，其中各級膽管細(xì)胞擔(dān)負(fù)著極其重要的作用，而CMV病毒感染后會損害膽管細(xì)胞功能，造成膽汁轉(zhuǎn)運(yùn)排泌受阻，從而引起膽汁淤積，最終導(dǎo)致新生兒黃疸的發(fā)生[6]。本組研究中，新生兒黃疸組抗CMV IgM抗體檢測陽性率明顯升高，在TORCH感染中所占比例最高，故表明CMV感染最易誘發(fā)新生兒病理性黃疸的發(fā)生。新生兒HSV感染大部分是在分娩過程中感染，很少經(jīng)胎盤或血行感染，本組資料未檢出HSV-IgM抗體，這也表明故抗HSV IgM抗體在新生兒早期檢出率較低，同時抗HSV IgM抗體陽性率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），說明HSV感染與新生兒黃疸關(guān)系不大。弓形蟲病在世界各地流行較廣泛，由于它可通過胎盤由母體傳給胎兒，故對胎兒及新生兒危害極大，在孕早期感染弓形蟲后，會引起多種胎兒畸形，如腦鈣化、小腦畸形、肝脾腫大等，甚至死胎，在孕晚期感染時，患兒會出現(xiàn)典型的弓形蟲病臨床表現(xiàn)，如肺部感染、肝功能損害、黃疸、血小板減少、腦癱等[7]。本次研究中兩組病例均未檢出TOX-IgM，表明新生兒黃疸的發(fā)生與弓形蟲感染關(guān)系不大。風(fēng)疹病毒在人群中普遍易感，屬于RNA病毒，但人體感染風(fēng)疹病毒后一般癥狀比較輕，故在臨床工作中未予重視。近年來先天性風(fēng)疹綜合征越來越受到重視，這類患兒往往伴有嚴(yán)重的出生缺陷，其中以先天性心臟病、白內(nèi)障和神經(jīng)性耳聾尤甚[8]，研究表明本病發(fā)生原因多數(shù)是未感染過風(fēng)疹病毒的孕婦在懷孕早期感染了風(fēng)疹病毒，從而引起胎兒出生缺陷，本組資料檢出1例風(fēng)疹病毒抗體，故臨床應(yīng)予以重視。

綜上所述，TORCH病毒感染對新生兒危害巨大，因此應(yīng)引起兒科醫(yī)師的高度重視，研究表明患兒感染TORCH后臨床癥狀不典型[9]，診斷仍依靠實(shí)驗(yàn)室檢查。目前，診斷TORCH感染的方法主要為病原體分離培養(yǎng)、血清學(xué)檢測和PCR等方法[10]，PCR法靈敏度、特異度較高，但對試驗(yàn)平臺要求較高，無法推廣；病毒分離準(zhǔn)確性最好，但不易操作，費(fèi)時費(fèi)力，臨床推廣較難；而目前條件下血清學(xué)檢測相對簡單易用，在臨床工作中已廣泛推廣。本組研究表明，新生兒黃疸組患兒TORCH特異性抗體檢出率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），表明在新生兒黃疸患兒診治中TORCH抗體測定的必要性，有助于發(fā)現(xiàn)早期TORCH感染病例，從而盡早治療，減少病殘率的發(fā)生；同時也有助于早期鑒別病理性黃疸病因，減少核黃疸的發(fā)生率，因此表明TORCH抗體測定在新生兒黃疸診治中具有舉足輕重的意義。

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