詹 陽 梁 鑫 谷玉春 朱 力
首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院病理科,北京 100006
卵巢上皮性癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)是女性生殖器官發(fā)病率列居第三位的腫瘤,但病死率卻為首位,其五年生存率僅為25%~30%。目前卵巢上皮性癌治療效果不顯,尋找新的分子靶點,以提高患者生存率仍然是婦科腫瘤學(xué)者們亟待解決的問題。HER2/neu/erbB2是表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)家族成員之一,在許多腫瘤中的過表達(dá)和(或)突變,與許多腫瘤發(fā)生發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。以HER2為腫瘤靶向,采用獨立或聯(lián)合傳統(tǒng)的藥物治療在乳腺癌、胃癌等已取得了一定的效果[1-2]。針對HER2在卵巢癌中的靶向治療,國外處于小樣本的臨床試驗階段[3-5]。本研究的目的是觀察中國人群大樣本卵巢上皮性癌病例中HER2蛋白過表達(dá)狀態(tài),并分析其臨床病理意義,為今后治療提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
收集2008~2012年我院卵巢上皮性腫瘤病理標(biāo)本322例,其中,卵巢上皮性癌242例,交界性上皮性腫瘤65例,良性上皮性腫瘤15例。所有患者術(shù)前均未接受過放療、化療或激素治療。初次手術(shù)方式為卵巢癌分期手術(shù)或腫瘤細(xì)胞減滅術(shù),并收集相關(guān)臨床病理參數(shù)。
所有標(biāo)本均用中性福爾馬林固定并石蠟包埋,4 μm厚切片。HER2抗體購自DAKO公司的A0485多抗;雌激素受體(ER,克隆號:1D5)和孕激素受體(PR,克隆號:Y85)購自于GENEMED Biotechnologies公司。ER、PR和HER2的工作濃度分別為 1∶120、1∶100 和 1∶450。 采用免疫組化二步法測定卵巢上皮性腫瘤中HER2、ER和PR的表達(dá)情況。
免疫組化中HER2蛋白在全部瘤細(xì)胞中均無染色或<10%瘤細(xì)胞染色者結(jié)果為0;瘤細(xì)胞>10%細(xì)胞膜不完整弱染色者結(jié)果為1+;瘤細(xì)胞>10%細(xì)胞膜輕度至中度完整染色者結(jié)果為2+;瘤細(xì)胞>10%細(xì)胞膜完整染色者結(jié)果為3+;0~1+為陰性,2+~3+為陽性,即過表達(dá)(圖1~4)。 ER 和PR陽性為腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞核著色≥10%。ER和PR任意一種受體陽性為激素受體(hormonal receptor,HR)陽性;ER和PR均陰性,為HR陰性。
本研究采用SAS 9.1軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用百分率表示,HER2蛋白在良性、交界、惡性卵巢上皮性腫瘤組織中表達(dá)差異及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系,組間對比采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
表1 242例卵巢上皮性癌患者的臨床病理特征與HER2蛋白過表達(dá)[n(%)]
242例卵巢上皮性癌患者平均年齡為51.6歲,近80%在40~65歲范圍。65例交界性卵巢上皮性腫瘤患者的平均年齡為38.9歲,較惡性腫瘤患者平均年輕10歲。242例卵巢上皮性癌患者的臨床病理資料見表1。
HER2在卵巢良性、交界性和惡性的上皮性腫瘤的陽性率分別為 0、21.54%(14/65)以及 16.12%(39/242),在卵巢交界性及惡性中的陽性表達(dá)顯著高于良性腫瘤,但交界性和惡性腫瘤間表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。卵巢上皮性癌中HER2在激素受體表達(dá)、組織學(xué)分型和組織學(xué)分級中的各組表達(dá)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義;HER2表達(dá)與FIGO分期、患者年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤發(fā)生側(cè)別無關(guān)(表1)。卵巢交界性腫瘤的組織亞型有漿液性腫瘤40例,HER2過表達(dá)為11例(27.5%);黏液性腫瘤22例,其過表達(dá)為2例(9.09%);子宮內(nèi)膜樣交界性腫瘤為3例,其過表達(dá)1例(33.33%)。
HER2在卵巢透明細(xì)胞腺癌表達(dá)較其他組織學(xué)分型均高,為 42.11%(16/38)(表1),其患者平均年齡 51.1 歲。透明細(xì)胞腺癌FIGO分期分別為Ⅰ期67.5%,Ⅱ期10.0%,Ⅲ期22.5%。卵巢透明細(xì)胞腺癌中激素受體陰性占79.5%,16例HER2陽性透明細(xì)胞腺癌中HR陰性為75%。
卵巢上皮性癌是婦科腫瘤中死亡率居首位的腫瘤,目前各種傳統(tǒng)治療方法效果不明顯,處于“瓶頸”期,需要新的治療途徑來改善患者的長期生存率和清除耐藥腫瘤細(xì)胞,因此,個體化靶向治療愈顯重要。
HER2是一種原癌基因,控制細(xì)胞增殖和能動性,其突變和擴增已被發(fā)現(xiàn)和許多腫瘤相關(guān),如乳腺、卵巢、肺、前列腺和結(jié)腸癌[6]。它啟動一系列信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(包括MAPK和 PI3K-Akt通路等),介導(dǎo)細(xì)胞的增殖、分化、抗凋亡等過程。針對HER2蛋白的藥物主要有抗HER2蛋白抗體、酪氨酸激酶抑制劑和肽疫苗等。針對HER2的腫瘤靶向藥物在卵巢癌中多還處于臨床實驗階段,樣本量不大,部分取得了一定的效果[3-5]。國內(nèi)HER2在卵巢癌中的表達(dá)的大樣本量研究不多,未見其相應(yīng)藥物治療的報道。了解中國人中HER2過表達(dá)狀況,為今后可能的靶向治療提供基礎(chǔ)依據(jù)。
近年來國外大宗病例研究HER2在卵巢癌中表達(dá)的結(jié)果總結(jié),結(jié)論不盡相同,范圍為5%~35%[7-12];而國內(nèi)的研究結(jié)果陽性率多高于這一比例。本研究中HER2蛋白在卵巢上皮性癌中的表達(dá)較低,多數(shù)為“1+”,242例卵巢上皮性癌中其過表達(dá)率為16.17%,與國外文獻一致。HER2在卵巢癌中表達(dá)結(jié)果差異大的原因可能與不同實驗室、種族、腫瘤臨床病理分期評定標(biāo)準(zhǔn)、HER2陽性評定標(biāo)準(zhǔn)以及小樣本量等相關(guān);另外,卵巢上皮性癌中各組織亞型間表達(dá)的差異,以及樣本量中各型比例的差異可能是導(dǎo)致HER2在卵巢上皮性癌中表達(dá)有差異重要原因之一。HER2在卵巢上皮性癌和卵巢交界性腫瘤中均有表達(dá),但由于交界性腫瘤數(shù)量少,僅有三種組織學(xué)分型,無法進行統(tǒng)計學(xué)分析,有待于今后增大樣本量再行分析。
卵巢上皮性癌是由一組異質(zhì)性腫瘤,目前腫瘤治療主要是取決于腫瘤的分期、分級,而不是組織分型。近年來研究發(fā)現(xiàn)不同的組織分型不僅是形態(tài)學(xué)的差異,從分子遺傳學(xué)就有其各自特點,表現(xiàn)不同的生物學(xué)行為和預(yù)后[13],所以與之相應(yīng)的治療方式亦具有差異。本研究中HER2蛋白過表達(dá)在常見的四種卵巢上皮性癌組織學(xué)亞型(漿液性、黏液性、子宮內(nèi)膜樣和透明細(xì)胞腺癌),以及其他少見上皮性癌中的各組表達(dá)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。四種常見卵巢上皮性癌中,卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌表達(dá)最低,為5.41%,而透明細(xì)胞癌中表達(dá)最高,為42.11%。HER2在卵巢上皮性癌各分型表達(dá)的差異,一定程度說明了腫瘤發(fā)生的分子機制差異,同時也提示了針對HER2蛋白的靶向藥物使用是應(yīng)該具有選擇性。
卵巢透明細(xì)胞腺癌可能起源于宮頸內(nèi)膜腺上皮或是子宮內(nèi)膜異位病灶[14],由于其常伴發(fā)子宮內(nèi)膜異位,高發(fā)的化療耐藥和預(yù)后差的特殊臨床特征區(qū)使其別于其他卵巢上皮性癌。卵巢透明細(xì)胞腺癌目前屬Ⅰ型卵巢癌,但較同期漿液性腺癌生存率低,目前關(guān)于腫瘤細(xì)胞的排列方式、細(xì)胞類型、分裂指數(shù)、核的分級是否可以做為預(yù)后的判斷指標(biāo),尚無統(tǒng)一意見。文獻中HER2在卵巢透明細(xì)胞腺癌中表達(dá)的研究結(jié)果也不盡相同,國內(nèi)還未見相應(yīng)多量病例的報道。本研究中透明細(xì)胞腺癌HER2過表達(dá)遠(yuǎn)高于其他亞型,HER2的高表達(dá)是否提示給透明細(xì)胞腺癌這一高耐藥、預(yù)后差的腫瘤治療帶來新的契機,有待于進一步研究。本研究中未發(fā)現(xiàn)卵巢透明細(xì)胞腺癌中HER2蛋白過表達(dá)在各項臨床病理參數(shù)中的統(tǒng)計學(xué)差異,這可能與樣本量不大有關(guān),這將是我們今后研究的一個方向。
HER2蛋白表達(dá)與多種腫瘤的不良預(yù)后有關(guān)[15-18],文獻中對HER2在卵巢癌的研究結(jié)果不一致。本研究結(jié)果顯示卵巢上皮性癌中HER2過表達(dá)病例中,激素受體表達(dá)各組差異有統(tǒng)計學(xué)意義,激素受體陰性的比例較高。乳腺癌中HER2與激素受體(ER、PR)的表達(dá)對腫瘤的治療和預(yù)后都密切相關(guān)。卵巢上皮性癌中HER2過表達(dá),同時ER、PR陰性是否和乳腺癌相似,為預(yù)后不良的表現(xiàn)還不得而知。同時,本研究結(jié)果顯示了HER2過表達(dá)與FIGO分期以及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移無關(guān)。在組織學(xué)分級中HER2過表達(dá)雖然在各組中差異有統(tǒng)計學(xué)意義,但并未表現(xiàn)為組織分化高低與HER2過表達(dá)的相關(guān)性,而在交界性腫瘤也可見HER2表達(dá),可能是HER2在腫瘤細(xì)胞的分化中作用不大,或是由于各組間病例數(shù)不均衡造成。以上結(jié)果表明就卵巢上皮性癌而言,HER2可能不是影響預(yù)后的獨立危險因子。
HER2在各型卵巢上皮性癌中有一定表達(dá),可能成為卵巢上皮性癌潛在的治療靶點,其相關(guān)藥物的獨立或聯(lián)合用藥可能為其治療帶來契機。卵巢上皮性癌的各組織學(xué)分型中HER2表達(dá)有差異,透明細(xì)胞腺癌高表達(dá)將是我們今后研究的重點。
[1]Maughan KL,Lutterbie MA,Ham PS.Treatmentof breast cancer[J].Am Fam Physician,2010,81(11):1339-1346.
[2]Lordick F.Trastuzumab:a new treatmentoption for HER2-positive metastatic gastric and gastroesophageal junction cancer [J].Future Oncol,2011,7(2):187-199.
[3]Makhija S,Amler LC,Glenn D,et al.Clinical activity of gemcitabine plus pertuzumab in platinum-resistant ovarian cancer,fallopian tube cancer,or primary peritoneal cancer[J].J Clin Oncol,2010,28(7):1215-1223.
[4]Langdon SP,F(xiàn)aratian D,Nagumo Y,et al.Pertuzumab for the treatment of ovarian cancer [J].Expert Opin Biol Ther,2010,10(7):1113-1120.
[5]Weroha SJ,Oberg AL,Ziegler KL,et al.Phase II trial of lapatinib and topotecan(LapTop) in patients with platinum-refractory/resistant ovarian and primary peritoneal carcinoma [J].GynecolOncol,2011,122(1):116-120.
[6]Hynes NE,Mac Donald G.ErbB receptors and signaling pathways in cancer[J].Curr Opin Cell Biol,2009,21(2):177-184.
[7]Nielsen JS,Jakobsen E,Hlund B,et al.Prognostic significance of p53,Her-2 and EGFR overexpression in borderline and epithelial ovarian cancer[J].Int J Gynecol Cancer,2004,14(6):1086-1096.
[8]Lee CH,Huntsman DG,Cheang MC,et al.Assessment of Her-1,Her-2 and Her-3 expression and Her-2 amplification in advanced stage ovarian carcinoma[J].Int J Gynecol Pathol,2005,24:147-152.
[9]Tuefferd M,Couturier J,Penault-Llorca F,et al.HER2 status in ovarian carcinomas:a multicenter GINECO study of 320 patients[J].PLos One,2007,2(11):1138.
[10]Pils D,Pinter A,Reibenwein J,et al.In ovarian cancer the prognostic influence of HER2/neu is not dependent on the CXCR4/SDF-1 signalling pathway[J].Br J Cancer,2007,96(3):485-491.
[11]Steffensen KD,Waldstrm M,Jeppesen U,et al.The prognostic importance of cyclooxygenase 2 and HER2 expression in epithelial ovarian cancer[J].Int J Gynecol Cancer,2007,17(4):798-807.
[12]Ali-Fehmi R,Chatterjee M,Ionan A,et al.Analysis of the expression of human tumor antigens in ovarian cancer tissues[J].Cancer Biomark,2010,6(1):33-48.
[13]Mc Cluggage WG.Morphological subtypes of ovarian carcinoma:a review with emphasis on new developments and pathogenesis[J].Pathology,2011,43(5):420-432.
[14]Nowak-Markwitz E,Spaczyński M.Ovarian cancer--modern approach to its origin and histogenesis[J].Ginekol Pol,2012,83(6):454-457.
[15]Yoon HH,Shi Q,Sukov WR,et al.Adverse prognostic impact of intratumor heterogeneous HER2 gene amplification in patients with esophageal adenocarcinoma[J].J Clin Oncol,2012,30(32):3932-3938.
[16]Petrelli F,Barni S.Role of HER2-neu as a prognostic factor for survival and relapse in pT1a-bN0M0 breast cancer:a systematic review of the literature with a pooled-analysis[J].Med Oncol,2012,29(4):2586-2593.
[17]Xia Q,Zhu Z,Wang J,et al.Expression and association of HER2 with prognosisin early-stage(T1-T2N0M0) non-small cell lung cancer[J].Tumour Biol,2012,33(5):1719-1725.
[18]Janjigian YY,Werner D,Pauligk C,et al.Prognosisof metastatic gastric and gastroesophageal junction cancerby HER2 status:a European and USA International collaborative analysis[J].Ann Oncol,2012,23(10):2656-2662.