閩東畬藥芝蘭青的GC/MS 研究

楊成梓 李烈輝 何幫劍 黃慶德 何雨瓊

1.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建福州 350122；2.福建省壽寧縣醫(yī)院，福建壽寧 355500

畬族是個(gè)歷史悠久的民族，主要分布在福建、浙江、廣東、江西等地，其中超過(guò)一半的人口分布在福建，閩東地區(qū)是福建畬族人口分布最多的地區(qū)。畬族同胞在與疾病長(zhǎng)期斗爭(zhēng)的過(guò)程中，積累了不少防治疾病的經(jīng)驗(yàn)，但由于受畬族只有語(yǔ)言而沒(méi)有文字的制約，不少驗(yàn)方已經(jīng)失傳。因此，保護(hù)畬族醫(yī)藥文化迫在眉睫[1-2]?！爸ヌm青”為福建省閩東畬族居民常用青草藥，來(lái)源于蠟梅科植物浙江蠟梅Chimonanthus Zhejiangensis M.C.Liu 的干燥葉，在閩東及浙南地區(qū)應(yīng)用較為普遍，有醒脾化濕、止瀉等功效，主要用于消化不良、小兒疳積、腹瀉、醒酒及解暑，此外還用于預(yù)防感冒、減肥及降壓等。據(jù)民間調(diào)查顯示，芝蘭青（浙江蠟梅葉）在閩東畬族人口分布區(qū)的應(yīng)用歷史已不下百年，應(yīng)用廣泛，療效確切，但卻缺少文字資料的記載，這主要與沒(méi)有專(zhuān)業(yè)的人員對(duì)其基原進(jìn)行鑒定有關(guān)。因此出于對(duì)民族藥進(jìn)行保護(hù)的角度來(lái)講，本文對(duì)芝蘭青（浙江蠟梅葉）采用氣相-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用進(jìn)行化學(xué)成分分析，以期為芝蘭青的質(zhì)量控制等提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

芝蘭青，經(jīng)筆者嚴(yán)格鑒定為浙江蠟梅Chimonanthus ZhejiangensisM.C.Liu 的干燥葉，2009年5月4日采自福建省壽寧縣竹管籠鄉(xiāng)劉坪村（緯度：27.328 9 °N，經(jīng)度：119.585 9 °E，海拔：484 m），采集2～3年生老葉，室內(nèi)陰干，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器試劑

Agilent 6890N/5975MSD 氣相色譜儀（安捷倫科技公司）；HP-5MS 彈性石英毛細(xì)管柱（30.0 m×250 μm×0.25 μm）（安捷倫科技公司）；NIST05m.IBr 數(shù)據(jù)系統(tǒng)（安捷倫科技公司）；KDM型恒溫電熱套（山東省城振興儀器廠）；YP202N型數(shù)字分析天平（上海精科天平儀器廠）；蒸餾水（自制）；乙醚（上海聯(lián)試化工試劑有限公司）；無(wú)水硫酸銅（浙江海藍(lán)化工有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 揮發(fā)油提取與含量測(cè)定

稱(chēng)取芝蘭青（浙江蠟梅葉）樣品50 g，杵碎，過(guò)2號(hào)篩，置1 000 mL 燒瓶中，加蒸餾水500 mL 與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合，冷浸12 h。按照《中國(guó)藥典》2010年版揮發(fā)油水蒸汽蒸餾法提取與測(cè)定，重復(fù)3次。

表1 芝蘭青（浙江蠟梅葉）揮發(fā)油化學(xué)成分

1.3.2 GC-MS 聯(lián)用分析化學(xué)成分

將提取的芝蘭青（浙江蠟梅葉）的揮發(fā)油用乙醚萃取，回收乙醚，無(wú)水硫酸鈉脫水，得無(wú)水揮發(fā)油，密封瓶裝，待測(cè)。采用GC-MS 聯(lián)用測(cè)定樣品揮發(fā)油的化學(xué)成分。

1.3.2.1 氣相條件 樣口溫度：250℃；進(jìn)樣量：1 μL；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；載氣：氦氣；體積流量：1 mL/min；恒流模式；傳輸線溫度：250℃。升溫程序：120℃（0 min）→250℃（3 min）。

1.3.2.2 質(zhì)譜條件 電離方式：EI；電子轟擊能量：70 eV；增倍器電壓1 200 V，離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；掃描范圍：30～450 amu；溶劑延遲時(shí)間：3 min。

2 結(jié)果

2.1 揮發(fā)油的含量

經(jīng)過(guò)水蒸氣蒸餾法方法提取，得到橙黃色透明的油狀物，平均得率為2.6%。

2.2 芝蘭青（浙江蠟梅葉）的GC-MS分析測(cè)定

芝蘭青（浙江蠟梅葉）的GC-MS分析測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.3 揮發(fā)油化學(xué)成分分析

揮發(fā)油化學(xué)成分分析見(jiàn)表1。

通過(guò)對(duì)表1 的分析可知，本實(shí)驗(yàn)中揮發(fā)油成分主要是醇類(lèi)和烯烴類(lèi)物質(zhì)，其中以烯烴類(lèi)物質(zhì)居多，有27種，醇類(lèi)物質(zhì)有4種，其他化合物有20個(gè)。芝蘭青（浙江蠟梅葉）揮發(fā)油中百分含量高于1%的成分，共計(jì)17種。其中含量最高的為桉葉醇17.13%。

3 討論

3.1 屬間成分的對(duì)比

蠟梅屬[3-4]（Chimonanthus）植物為我國(guó)特有，國(guó)內(nèi)報(bào)道的種有10個(gè)，不同的分類(lèi)學(xué)家對(duì)種的分類(lèi)有不同意見(jiàn)，有學(xué)者主張將浙江蠟梅并入山蠟梅中。國(guó)內(nèi)研究較多的是山蠟梅，山蠟梅葉可用于防治感冒和流行性感冒，中藥蠟梅解毒湯能治療單純皰疹性角膜炎，目前臨床上已開(kāi)發(fā)了蠟梅止咳露、山蠟梅滴丸等產(chǎn)品。山蠟梅葉的精油成分不僅具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)咳、祛痰作用，還能明顯減緩小鼠的體重增長(zhǎng)，抑制食欲，具有減肥功效。山蠟梅制作的黃金茶具有調(diào)節(jié)人體機(jī)能、增強(qiáng)體質(zhì)、提高免疫力和延緩衰老的保健功能，且可以預(yù)防感冒，并對(duì)高血壓、高血脂有一定療效[5]。將本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與已經(jīng)研究報(bào)道的山蠟梅揮發(fā)油成分進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示兩者均含有蒎烯、莰烯、桉樹(shù)腦、檸檬烯、醋酸冰片酯、樟腦、異龍腦、蒈烯、α-畢澄茄油烯、石竹烯等34種成分；而不同的成分有β-月桂烯、α-法尼烯、塞瑟爾烯、欖香烯、松油醇、檀香烯、金合歡烯、麝香草酚等40多種[6-7]。

3.2 芝蘭青（浙江蠟梅葉）揮發(fā)油主要成分的藥理作用

桉葉醇對(duì)胃腸機(jī)能有雙向調(diào)節(jié)作用[8]；蒎烯具有抗流感病毒作用，并且還可以刺激微生物產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物[9-11]；樟腦還有應(yīng)用于碘仿樟腦酚糊劑治療根尖周炎，應(yīng)用于麝香痔瘡栓治療痔瘡[12-14]；異龍腦的作用與樟腦相似；蒈烯在化妝品、藥物、農(nóng)藥方面都有應(yīng)用，在藥物方面蒈烯主要用于抗炎、抗菌等[15]。芝蘭青中大部分成分均具有活性，具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用的實(shí)際意義。

3.3 小結(jié)

本次在芝蘭青（浙江蠟梅葉）揮發(fā)油中總共分離并鑒定出了51種化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的62.21%，其中含量高于1%有17個(gè)，并且以葉桉醇（17.13%）含量最高。烯烴類(lèi)物質(zhì)居多，有27種，醇類(lèi)物質(zhì)有4種，其他化合物有20個(gè)。大部分成分具有確切的藥理活性，因此，芝蘭青作為畬族常用的特色青草藥，值得進(jìn)一步的研究和開(kāi)發(fā)。

與山蠟梅的GC/MS 結(jié)果對(duì)比顯示，兩者有相似的地方，但也存在不同，因此將浙江蠟梅（芝蘭青）與山蠟梅兩種合并有待進(jìn)行深入的研究確定。

由于時(shí)間、季節(jié)等原因，本次實(shí)驗(yàn)僅對(duì)閩東壽寧的芝蘭青（浙江蠟梅葉）進(jìn)行了研究，從本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果與前人研究的山蠟梅結(jié)果比較可知，不同品種、不同地域或不同的生境等，其成分組成及含量均可能存在較大差異，藥材存放時(shí)間的長(zhǎng)短也可能使成分發(fā)生變化，因此有待下一步收集不同產(chǎn)地及不同品種的樣品進(jìn)行深入的研究比較。

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