駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿的質(zhì)譜裂解途徑研究

張洪亮 譚 鵬 鄔瑞光 羅玲娟 韓 靜 王春國(guó) 鄧昕祺 劉永剛

(1北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京，100102;2新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)院，烏魯木齊，830028)

駱駝蓬為蒺藜科植物駱駝蓬(Peganum harmala L.)及多裂駱駝蓬［Peganum multisectum(Maxim.)Bobr.］的全草［1］。具有止咳平喘，祛風(fēng)濕，消腫毒之功效，其研究及臨床應(yīng)用已有20多年歷史［2］。駱駝蓬主要成分為生物堿類，而駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿為其主要生物堿［3－4］，它們屬于β－咔啉類生物堿，結(jié)構(gòu)式見圖1。ESI－MS作為一種軟電離方法，已成為研究物質(zhì)結(jié)構(gòu)與生物分子間弱相互作用的重要手段并得到廣泛的應(yīng)用［5－6］。我們采用電噴霧質(zhì)譜儀，優(yōu)化參數(shù)對(duì)去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的裂解機(jī)制進(jìn)行了研究，對(duì)其碎片進(jìn)行解析，總結(jié)其裂解規(guī)律，豐富去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，以期為β－咔啉類生物堿的結(jié)構(gòu)鑒定提供可靠的依據(jù)。

圖1 去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的結(jié)構(gòu)式

1 試驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與裝置 美國(guó)Thermo公司生產(chǎn)的TSQ Quantum Access Max液相質(zhì)譜聯(lián)用儀，ESI源，三重四極桿分析器，Xcalibur工作站，駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿由實(shí)驗(yàn)室自制(經(jīng)HPLC檢測(cè)，含量＞98%)，甲醇(色譜純，美國(guó)Fisher公司)，水為雙蒸水并經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾。

1.2 HPLC色譜條件 流動(dòng)相為0.1%的三乙胺溶液∶乙腈=(38∶62);以0.8 mL/min的流速進(jìn)行梯度洗脫。其色譜圖見圖2。

圖2 去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的HPLC圖

1.3 質(zhì)譜條件 對(duì)駱駝蓬堿的質(zhì)譜條件進(jìn)行了優(yōu)化處理。其質(zhì)譜條件如下。檢測(cè)方式:正;干燥氣流速:40 L·min－1;霧化室壓強(qiáng):40psi;霧化溫度:320℃。毛細(xì)管電壓:2 000eV;掃描范圍:100～1 000u。其總離子流圖見圖3，駱駝蓬堿的質(zhì)譜圖見圖4，去氫駱駝蓬堿的質(zhì)譜圖見圖5。

圖3 去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的總離子流圖

圖4 駱駝蓬堿質(zhì)譜及其碎片離子

圖5 去氫駱駝蓬堿質(zhì)譜及其碎片離子

2 方法與結(jié)果

2.1 正離子下的駱駝蓬堿裂解途徑 在正離子模式下，準(zhǔn)分子離子為215.04，為［M+H］－的離子，選中母離子對(duì)其進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離(Collision Induced dissociation)分析，得到一系列碎片離子 200.02，174.07，143.16，118.14。通過(guò)分析其碎片離子。推測(cè)在正離子模式下，駱駝蓬堿可能的裂解途徑如圖6所示。

2.2 正離子下的去氫駱駝蓬堿裂解途徑 在正離子模式下，準(zhǔn)分子離子為213.01，為［M+H］+的離子，選中母離子對(duì)其進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離(Collision Induced dissociation)分析，得到一系列碎片離子 198.01，171.07，143.15，118.14。該化合物的質(zhì)譜裂解途徑與駱駝蓬堿一致。

圖6 正離子模式下駱駝蓬堿的裂解機(jī)理

3 討論

雖然駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿是首次報(bào)道的β－咔啉類生物堿，但關(guān)于β－咔啉類生物堿的質(zhì)譜裂解機(jī)制的報(bào)道較少，以前文獻(xiàn)報(bào)道主要為電子轟擊源(electron ionization，EI)譜。而我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，ESI－MS與EI－MS譜有較大的不同，因此，選擇用駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿為代表產(chǎn)物研究β－咔啉類生物堿的質(zhì)譜裂解機(jī)制具有較大的研究意義。

駱駝蓬堿和去氫駱駝蓬堿極性相近，我們?cè)趨⒖嘉墨I(xiàn)的基礎(chǔ)上［7］采用了新的流動(dòng)相對(duì)兩者進(jìn)行了很好的分離，這為駱駝蓬藥材和含有駱駝蓬藥材的制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了數(shù)據(jù)支持。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)維吾爾藥分冊(cè)［S］.烏魯木齊:新疆科技衛(wèi)生出版社，1998:801.

［2］李春杰，劉德璽，買買提依明，等.駱駝蓬抗癌化學(xué)成分的分離鑒定和藥理實(shí)驗(yàn)研究［J］.新疆醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1987，10(1):27.

［3］The Merck Index［S］.USA，1977:601.

［4］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典［M］.下冊(cè).上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1977:1757.

［5］Scalbert，A.，Brennan，L.，F(xiàn)eihn，O.，et al.Mass － spectrometry － Based Metabolmics and Recommendations for Future Progress with Particular Focus on nutrition Research［J］.Metabolomics，2009，5:435 －458.

［6］BAO Yi，SONG Feng － rui，LIU Zhi－ qiang，LIU Shu － ying，YIN Jun.A-nalysis on Hydrolyzation of Aconitum Diester Diterpenoid Alkaloids by Electrospray Ionization Mass Spectrometry［J］.JOURNAL OF CHINESE MASS SPECTROMETRY SOCIETY，2009，30(1):5.

［7］王長(zhǎng)虹，劉軍，林伊梅.反相高效液相色譜法測(cè)定駱駝蓬總堿片中去氫駱駝蓬堿和駱駝蓬堿的含量［J］.中國(guó)中醫(yī)院藥學(xué)雜志，2002，22(3):139－141.