150例血尿相差顯微鏡法與UF-100法尿紅細(xì)胞形態(tài)檢查結(jié)果比較分析

李芳文，王 芳，常若云

（甘肅省人民醫(yī)院，甘肅 蘭州 730000）

自Birch和Fassett于1979年首先用相差顯微鏡觀察尿紅細(xì)胞（RBC）形態(tài)，將血尿分為腎小球性血尿和非腎小球性血尿以來(lái)，盡管傳統(tǒng)相差顯微鏡法尿RBC形態(tài)檢查對(duì)鑒別血尿來(lái)源特異性較高，但該方法敏感性較低，且操作繁瑣，易受尿液標(biāo)本及主觀因素影響。有報(bào)道指出，不同檢驗(yàn)人員發(fā)出報(bào)告的變異系數(shù)達(dá)到30%。隨著UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀（以下簡(jiǎn)稱UF-100）的廣泛使用，國(guó)內(nèi)外不少學(xué)者[1～3]對(duì)UF-100識(shí)別尿液中各種有形成分，如RBC、WBC、上皮細(xì)胞、管型、結(jié)晶、細(xì)菌，甚至霉菌及影響因素進(jìn)行了研究。本文采用相差顯微鏡法和UF-100法對(duì)150例血尿進(jìn)行尿RBC形態(tài)學(xué)檢查，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

150 例血尿標(biāo)本來(lái)自我院門診及住院病人，其中93例經(jīng)詳細(xì)的病史，血、尿生化和免疫學(xué)檢測(cè)及腎活檢等證實(shí)為腎小球疾病，包括輕微腎小球病變33例，IgA腎病24例，腎小球腎炎33例，其他腎炎3例。另57例根據(jù)病史及有關(guān)影像學(xué)檢查，結(jié)合膀胱鏡或病理活檢確診為非腎小球性疾病，包括輸尿管結(jié)石34例，急性膀胱炎11例，膀胱腫瘤4例，腎盂腫瘤2例，前列腺癌5例，其他疾病1例。

1.2 儀器與試劑

UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀為日本Sysmex公司生產(chǎn)，稀釋液、鞘液及雙色熒光染料均為配套試劑；相差顯微鏡為日本Olympus公司生產(chǎn)；離心機(jī)。

1.3 方法

取空腹第二次新鮮中后段晨尿20ml，分裝于兩只尿沉渣專用定量刻度離心管，其中一管用于UF-100自動(dòng)吸樣檢測(cè)；另一管置離心機(jī)以1500r/min離心5min，棄上清液留沉淀0.2ml，混勻后注入計(jì)數(shù)池置相差顯微鏡下高倍視野計(jì)數(shù)尿RBC數(shù)量，同時(shí)觀察200個(gè)尿RBC，計(jì)算尿RBC畸形率及畸形種類，1h內(nèi)完成尿沉渣分析。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

UF-100檢測(cè)結(jié)果參照Hyodo提供的實(shí)驗(yàn)診斷標(biāo)準(zhǔn)：≥80%尿RBC的前向散射光強(qiáng)度（Fsc）≥84ch稱為均一型RBC，即非腎小球性血尿；≥80% 尿RBC的Fsc≤126ch且＜80% 的RBC Fsc≥84ch稱為非均一型RBC，即腎小球性血尿；＜80%RBC的Fsc≤126ch，且＜80% 的RBC Fsc＞84ch稱為混合型血尿。相差顯微鏡檢查結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)＞80%的尿RBC形態(tài)呈均一型（大小形態(tài)一致）診斷為非腎小球血尿；當(dāng)＞80%的尿RBC呈多樣型（大小不等、形態(tài)多樣，有突起、棘細(xì)胞樣、面包圈樣、皺縮狀、靶樣等）時(shí)診斷為腎小球性血尿；均一型及多樣型均未達(dá)到80%診斷為混合型血尿。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包，相關(guān)性分析采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 相差顯微鏡法和UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析（見(jiàn)表1）

表1 相差顯微鏡法與UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析

表1顯示，兩種方法檢測(cè)各型RBC的符合率分別為90.7%、92.0%、75.0%，說(shuō)明相差顯微鏡法與UF-100法檢測(cè)結(jié)果符合率較高，相關(guān)性較好（P＜0.01）。

2.2 相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率比較分析（見(jiàn)表2）

表2 相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率[n（%）]

表2顯示，相差顯微鏡和UF-100檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率分別是93.5%、94.7%和89.2%、87.7%，儀器法稍高于相差顯微鏡法，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，相差顯微鏡和UF-100檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率較高，相關(guān)性較好。

3 討論

（1）腎小球性血尿形成的機(jī)理目前尚不清楚，可能形成的原因是：RBC通過(guò)病變的腎小球?yàn)V膜受到擠壓損傷；腎小管不同的pH和滲透壓持續(xù)變化，介質(zhì)張力及代謝產(chǎn)物（脂肪酸、溶血卵磷脂、膽酸等）等多種因素的影響，使已受損的尿RBC發(fā)生形態(tài)改變甚至破裂。尿RBC形態(tài)學(xué)檢查對(duì)血尿來(lái)源的鑒別診斷及腎小球疾病的治療及療效觀察有重要意義。

（2）尿RBC形態(tài)學(xué)檢查方法較多，但迄今為止無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，常用的是相差顯微鏡法和儀器法。各種方法本身有其優(yōu)缺點(diǎn)，目前認(rèn)為相差顯微鏡法高倍鏡檢查細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)不清楚，尿RBC少時(shí)無(wú)法識(shí)別其形態(tài)，有報(bào)道指出，不同檢驗(yàn)人員報(bào)告的變異系數(shù)達(dá)到30%。國(guó)內(nèi)顧可梁教授強(qiáng)調(diào)采用多種不同放大倍數(shù)，不同鏡頭識(shí)別尿中各種成分的重要性[1]。UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀采用了流式細(xì)胞計(jì)數(shù)分析原理，能提供尿RBC數(shù)量、散點(diǎn)圖、直方圖及尿RBC前向散射光多項(xiàng)指標(biāo)，對(duì)尿RBC形態(tài)的鑒別診斷具有重要價(jià)值，但大量細(xì)菌、酵母菌、結(jié)晶存在尿中可干擾檢測(cè)結(jié)果[2，3]。本文對(duì)150例血尿標(biāo)本尿RBC形態(tài)進(jìn)行了相差顯微鏡法和UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析，兩種方法檢測(cè)尿RBC形態(tài)符合率較高，相關(guān)性較好。有報(bào)道指出，腎小球性血尿時(shí)尿蛋白陽(yáng)性多見(jiàn)（約占54.3%），以+～++為主；非腎小球性血尿，尿蛋白陽(yáng)性僅占20%左右，且以±～+為主。腎小球性血尿，尿潛血以+～++為主，而非腎小球性血尿則以+++為主。尿S G和pH值改變對(duì)尿RBC形態(tài)產(chǎn)生影響。因此，筆者認(rèn)為，可結(jié)合相差顯微鏡法、UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀、尿化學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合分析，對(duì)血尿來(lái)源作出更為準(zhǔn)確、可靠的診斷。

（3）從尿RBC形態(tài)相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率比較分析，說(shuō)明UF-100法對(duì)鑒別血尿來(lái)源是一種可靠的方法，但大量細(xì)菌、酵母菌、結(jié)晶存在尿中可干擾檢測(cè)結(jié)果，依然需要特異性較高的相差顯微鏡法進(jìn)行驗(yàn)證。

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[2]武蓉珍，劉勝勇，徐麗珍，等.草酸鈣結(jié)晶對(duì)UF-100尿沉渣分析儀測(cè)定結(jié)果的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2002，20（4）：222-223.

[3]馬駿龍，叢玉隆.菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x測(cè)定紅細(xì)胞的影響[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1999，22（4）：205-207.