虎舌紅不同部位揮發(fā)性成分差異研究

楊海寬，江香梅，趙玲華，肖復(fù)明

(江西省林業(yè)科學(xué)院 江西省植物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330032)

虎舌紅(Ardisia mamillata)，又名紅毛氈、寶鼎紅、天仙紅衣、毛涼傘、金絲紅珠等，為紫金?？谱辖鹋賉1－3]。虎舌紅葉片紫紅色，果實(shí)呈鮮紅色，葉果并美，是室內(nèi)觀葉植物的首選佳品?；⑸嗉t生命力旺盛，栽培時(shí)間越長(zhǎng)，單株自然壽命可達(dá)20年以上[4－5]。原產(chǎn)我國(guó)，分布于福建、廣西、廣東、云南、四川、貴州、江西等地[6－7]?！对颇现胁菟庍x》中記載虎舌紅全草可入藥，有清熱利濕、活血止血、去腐去肌等功效，對(duì)跌打損傷、風(fēng)濕骨痛、肺癆咳嗽、疳積肝炎均有療效[8]。曾有報(bào)道[5]采用超臨界CO2萃取虎舌紅，并對(duì)揮發(fā)性油進(jìn)行化學(xué)成分分析。水蒸氣蒸餾法，作為植物性天然香料生產(chǎn)中最常用的技術(shù)，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、容易操作、成本低、產(chǎn)量大等特點(diǎn)[9]。同時(shí)與超臨界CO2萃取法相比較，所提取揮發(fā)油中化學(xué)成分組成也有顯著差異[10－13]。本研究采用水蒸氣蒸餾法，分別對(duì)虎舌紅根、莖和葉進(jìn)行揮發(fā)油提取，利用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定各部位揮發(fā)油化學(xué)成分及其百分含量，為虎舌紅的合理開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料和儀器

本試驗(yàn)所用虎舌紅于2012年11月采自江西省林業(yè)科學(xué)院虎舌紅基因資源收集圃內(nèi);無水乙醇，分析純;無水硫酸鈉，分析純。

美國(guó)Perkin Elmer GC－MS色譜儀，Elite－5MS色譜柱。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 水蒸汽蒸餾 將新鮮采摘的虎舌紅全株，用水洗凈，置于陰涼潔凈處陰干，分別進(jìn)行根、莖、葉不同部位切取試樣，每試樣稱取300 g，水蒸氣蒸餾6 h提取揮發(fā)油，經(jīng)無水硫酸鈉干燥后，進(jìn)行GC－MS檢測(cè)。

1.2.2 GC－MS檢測(cè)方法 Perkin Elmer Clarus 680型氣相色譜儀，色譜柱Elite－5MS，石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。進(jìn)樣口溫度280℃，色譜升溫程序:柱溫50℃保持5 min，以3℃/min升至140℃，再以10℃/min升至240℃保持10 min，共運(yùn)行55 min。載氣He，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量 0.5 μL，分流比 10∶1。

Perkin Elmer Clarus 600C型質(zhì)譜儀，質(zhì)譜條件:EI－MS。EI離子源溫度180℃，連接線溫度260℃，掃描范圍50～620(m/z)。

樣品進(jìn)行氣相色譜－質(zhì)譜分析，各分離組分采用Nist譜庫(kù)檢索，采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 虎舌紅葉揮發(fā)性油成分分析

虎舌紅葉揮發(fā)性成分GC－MS檢測(cè)總離子流圖如圖1所示，成分分析結(jié)果見表1。

由表1可知，虎舌紅葉揮發(fā)性成分共鑒別出29種化合物。占揮發(fā)油總含量的72.94%，其中含量＞1%的化合物共 11種，分別是:葉綠醇(26.09%)、3－己烯 －1－醇(13.89%)、水楊酸甲酯(10.32%)、異龍腦(2.91%)、氧化喇叭烯(2.50%)、1 － 己醇(1.92%)、桉葉油素(1.74%)、匙葉桉油烯醇(1.69%)、6，10，14 － 三甲基 － 十五烷酮(1.40%)、9 － 十六碳烯(1.18%)、α － 萜品醇(1.12%)。其中葉綠醇含量最高，其百分含量26.09%。

表1 虎舌紅3個(gè)部位揮發(fā)油化學(xué)成分分析結(jié)果Tab.1 Analysis results of volatile oil from 3 different parts in Ardisia mamillata

由表1可知，在所確定的29種虎舌紅葉揮發(fā)性化學(xué)成分中，按化合物種類劃分，醇類化合物16種，占總含量的52.30%;烴類化合物有6種，占總含量的5.68%;酯類化合物4種，占總含量的11.60%;氧化物1種，占總含量的1.74%;酮類化合物1種，占總含量的1.40%;醛類化合物1種，占總含量的0.28%。

圖1 虎舌紅葉揮發(fā)油總離子流Fig.1 Total ion chromatogram of leaf volatile oil in A.mamillate

2.2 虎舌紅莖揮發(fā)性油成分分析

虎舌紅莖揮發(fā)性成分GC－MS檢測(cè)總離子流圖如圖2所示。

由表1可知，虎舌紅莖揮發(fā)性成分共鑒別出16種化合物。占揮發(fā)油總含量的86.16%，其中含量＞1%的化合物共9 種，分別是:葉綠醇(43.50%)、芳樟醇(19.10%)、1 － 己烯 －3 － 醇(9.41%)、油酸酰胺(3.78%)、11，13－二甲基 －12－十四烯酸乙酯(1.78%)、α －萜品醇(1.54%)、突厥烯酮(1.33%)、法尼烯(1.28%)、龍腦(1.14%)。其中葉綠醇含量最高，其百分含量 43.50%。

圖2 虎舌紅莖揮發(fā)油總離子流Fig.2 Total ion chromatogram of stem volatile oil in A.mamillate

由表1可知，在所確定的16種虎舌紅莖揮發(fā)性化學(xué)成分中，按化合物種類劃分，醇類化合物7種，占總含量的75.75%;酯類化合物2種，占總含量的2.48%;烴類化合物有2種，占總含量的1.79%;酮類化合物2種，占總含量的1.70%;酰胺類化合物1種，占總含量的3.78%;氧化物1種，占總含量的0.37%;醛類化合物1種，占總含量的0.29%。

2.3 虎舌紅根揮發(fā)性油成分分析

虎舌紅根揮發(fā)性成分GC－MS檢測(cè)總離子流圖如圖3所示。

由表1可知，虎舌紅根揮發(fā)性成分共鑒別出33種化合物。占揮發(fā)油總含量的84.68%，其中含量＞1%的化合物共21種，分別是:芳樟醇(19.28%)、異龍腦(12.98%)、反式 － 橙花叔醇(7.26%)、β －萜品醇(5.88%)、糠醛(5.14%)、喇叭烯(3.30%)、油酸酰胺(3.10%)、2 － 十九烷酮(2.20%)、氧化石竹烯(1.76%)、匙葉桉油烯醇(1.76%)、3，7 －二甲基 －6 － 壬烯醇乙酯(1.66%)、壬醛(1.52%)、樟腦(1.50%)、乙酸龍腦酯(1.40%)、α －萜品醇(1.36%)、水楊酸甲酯(1.32%)、突厥烯酮(1.22%)、軟脂酸乙酯(1.12%)、對(duì)傘花烴 －8 －醇(1.06%)、桉葉油素(1.04%)、香葉基香葉醇(1.00%)。

圖3 虎舌紅根揮發(fā)油總離子流Fig.3 Total ion chromatogram of root volatile oil in A.mamillate

由表1可知，在所確定的33種虎舌紅根揮發(fā)性化學(xué)成分中，按化合物種類劃分，醇類化合物11種，占總含量的52.22%;酯類化合物6種，占總含量的6.82%;烴類化合物有5種，占總含量的6.16%;酮類化合物5種，占總含量的6.12%;醛類化合物2種，占總含量的6.66%;氧化物2種，占總含量的2.80%;酰胺類化合物1種，占總含量的3.10%;酸類化合物有1種，占總含量的0.80%。

2.4 虎舌紅不同部位揮發(fā)油成分比較

虎舌紅3個(gè)部位揮發(fā)油化學(xué)成分GC－MS檢測(cè)結(jié)果如表1所示。由表1可知，虎舌紅葉、莖、根3個(gè)不同部位揮發(fā)油中共鑒定出54種化學(xué)成分。但3個(gè)部位共有成分只有3種，分別為:桉葉油素、α－萜品醇和水楊酸甲酯。葉和莖共有的成分有7種，分別為:1－己烯－3－醇、桉葉油素、α－萜品醇、水楊酸甲酯、古蕓烯、3，7，11，15－四甲基 －2－ 十六烯 －1－ 醇、6，10，14－ 三甲基 － 十五烷酮和葉綠醇。葉和根共有成分有11種，分別為:3－己烯－1－醇、1－己醇、桉葉油素、異龍腦、α－萜品醇、水楊酸甲酯、乙酸龍腦酯、欖香醇、反式－橙花叔醇、匙葉桉油烯醇、喇叭烯。莖和根共有成分有8種，分別為:糠醛、桉葉油素、芳樟醇、α－萜品醇、水楊酸甲酯、突厥烯酮、香葉基香葉醇、油酸酰胺。

葉中特有成分有13種，分別為:2－氨基苯甲酸－3，7－二甲基－1，6－辛二烯－3－醇酯、2－壬烯－1－醇、己酸－3－己烯酯、肉豆蔻醛、氧化喇叭烯、氧化沒紅藥烯、愈創(chuàng)木烯、桉葉醇、3，7，11－三甲基－十一醇、1－二十醇、異植醇、9－十六烯－1－醇、9－十六碳烯。其中含量＞1%成分為:氧化喇叭烯(2.50%)和9 － 十六碳烯(1.18%)。

莖中特有成分有2種，分別為:龍腦(1.14%)和法尼烯(1.28%)。

根中特有成分有17種，分別為:側(cè)柏烯、甲基庚基酮、壬醛、樟腦、β－萜品醇、對(duì)傘花烴－8－醇、月桂烯、石竹烯、氧化石竹烯、杜松烯、植酮、2－十九烷酮、肉豆蔻酸甲酯、軟脂酸乙酯、3，7－二甲基－6－壬烯醇乙酯、8，11，14－二十碳三烯酸、油酸乙酯。其中含量 ＞1%成分為:β－萜品醇(5.88%)、2 － 十九烷酮(2.20%)、氧化石竹烯(1.76%)、3，7 － 二甲基 －6 － 壬烯醇乙酯(1.66%)、壬醛(1.52%)、樟腦(1.50%)、軟脂酸乙酯(1.12%)、對(duì)傘花烴 －8 － 醇(1.06%)。

由表1可知，虎舌紅葉、莖、根3個(gè)部位揮發(fā)油主成分存在較大差異。葉和莖中均為葉綠醇含量最高，分別為26.09%和43.50%;根中主要成分芳樟醇含量19.28%。葉中含量列第2位成分:3－己烯－1醇(13.8%)，莖中含量列第2位成分:芳樟醇(19.10%)，根中含量列第2位成分:異龍腦(12.98%)。

3 結(jié)論與討論

(1)本研究采用水蒸氣蒸餾法，分別對(duì)虎舌紅葉、莖、根3個(gè)部位提取揮發(fā)油，結(jié)合GC－MS測(cè)定。結(jié)果表明:虎舌紅3個(gè)部位揮發(fā)油組成存在較大差異。研究從虎舌紅3個(gè)部位揮發(fā)油中共鑒別出54種化合物，但3個(gè)部位共有成分只有3種，葉和莖共有成分7種，葉和根共有成分11種，莖和根共有成分8種。葉中特有成分13種，莖中特有成分2種，根中特有成分17種。葉中含量最高成分為葉綠醇(26.09%)，其次為3－己烯 －1醇(13.8%);莖中含量最高成分為葉綠醇(43.50%)，其次為芳樟醇(19.10%);根中含量最高成分為芳樟醇(19.28%)，其次為異龍腦(12.98%)。

(2)凌育趙等[5]于2003年9月以廣東封開黑石頂森林保護(hù)區(qū)虎舌紅為原料，采用超臨界CO2萃取提取揮發(fā)性油，并進(jìn)行化學(xué)成分分析，但未研究不同部位揮發(fā)油成分差異。本研究測(cè)定的主要成分種類及其含量與該研究結(jié)果存在較大差異。導(dǎo)致這種差異的原因可能有2個(gè):一是種源不同，本研究所用試樣種源來源于江西省，凌育趙的研究所用原材料采自廣東省。二是提取方式不同，本研究采用水蒸氣蒸餾法，而凌育趙的報(bào)道采用的是超臨界CO2萃取法。

(3)虎舌紅揮發(fā)性精油富含豐富的藥用化學(xué)成分，具有較好的開發(fā)利用價(jià)值。其中:葉綠醇是葉綠素的重要組成成分，也是合成維生素K1、維生素E的中間體。芳樟醇等萜烯類化合物，對(duì)大腸桿菌、變形桿菌、腸炎膜桿菌、葡萄球菌、釀酒酵母菌、白色含球菌、黑曲霉菌、瓊脂等有很好的抗菌活性，同時(shí)也是合成異植物醇、VE、VK的原料。3－己烯－1－醇，又稱葉醇，有非常濃郁的青香，廣泛用于日用化學(xué)工業(yè)。水楊酸甲酯可用作溶劑和中間體，制造殺蟲劑、殺菌劑、香料、涂料、化妝品油墨及纖維助染劑等。

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