山楂麥曲顆粒含量測(cè)定研究

★ 易長(zhǎng)勝 王鳳林 余良忠 廖 坤（.廣東省東莞市清溪鎮(zhèn)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 東莞 5660；.武警總醫(yī)院 北京 0009；.江西省中醫(yī)藥研究院 南昌 006；.廣東省東莞市清溪醫(yī)院 東莞 5660）

山楂麥曲顆粒載于部頒中藥第14冊(cè)，由山楂、麥芽、黔曲組成，功能為開胃消食，用于食欲不振，消化不良，脘腹脹滿。本次研究用高效液相色譜法對(duì)制劑中橙皮苷的含量進(jìn)行了測(cè)定。

1 儀器與試藥

HP-1100高效液相色譜儀（美國(guó)，HP化學(xué)工作站，DAD檢測(cè)器，四元梯度泵），SimplicityTM個(gè)人型超純水系統(tǒng)（Millipore公司），AG-135電子天平（梅特勒-托利多）。

橙皮苷對(duì)照品（批號(hào)：110721-200613，含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供），山楂麥曲顆粒（批號(hào)：20100401、20100601、20100602、20100801、20100802、20100803，江西省中醫(yī)藥研究院中試車間研制），乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18柱（4.6mm×250mm 5μ），流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（18：82），流速：1mL/分，檢測(cè)波長(zhǎng)283nm，柱溫：室溫。理論板數(shù)按橙皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2 500。在此條件下對(duì)照品、供試品在約15分鐘有一色譜峰（圖1）。

圖1 山楂麥曲HPLC圖

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含約50 g的溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品適量，研細(xì)，取約5.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4 陰性對(duì)照試驗(yàn)

按處方取不含黔曲的其他藥材，照本制劑的制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，再按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液，取陰性對(duì)照溶液10μL，按樣品測(cè)定方法注入液相色譜儀，結(jié)果在對(duì)照品橙皮苷色譜峰相應(yīng)的位置上，無(wú)其它色譜峰出現(xiàn)，陰性對(duì)照對(duì)樣品測(cè)定無(wú)干擾。

2.5 線性關(guān)系的考察

精密稱取橙皮苷對(duì)照品5.42mg，置25mL量瓶中，加甲醇近刻度，超聲處理使溶解，并加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1mL含橙皮苷0.2168mg）。取此對(duì)照品加甲醇稀釋成以下濃度：13.55、27.1、54.2、86.72、108.4、216.8μg/mL，分別吸取10μL，注入液相色譜儀中，按確定色譜條件測(cè)定，將樣品濃度與峰面積進(jìn)行回歸處理，回歸方程為：Y=8.426+1059.8X，r=0.99996（n=6），進(jìn)樣量0.1355-2.168μg，線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液10μL，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定橙皮苷峰面積值，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為1.94%。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液10μL，每間隔1、2、4、8、12小時(shí)測(cè)定橙皮苷峰面積值，結(jié)果表明，供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為1.36%。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批樣品（20100401）以確定方法進(jìn)行提取和測(cè)定，共6份，測(cè)定橙皮苷平均含量為0.2952 mg/g，數(shù)據(jù)結(jié)果分析RSD為2.37%。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批樣品（20100401），研細(xì)，共6份，取約2.5g精密稱定，置具塞三角瓶中，各精密加入橙皮苷對(duì)照品溶液（濃度為0.0312mg/mL，以50%甲醇為溶劑）25mL，余下同確定方法制成供試品溶液，并進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

2.10 樣品測(cè)定

取山楂麥曲顆粒制劑按確定的制備方法制成供試品溶液，注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得另5批樣品中橙皮苷含量為0.3232、0.3549、0.1174、0.1274、0.119 mg/g。

3 討論

黔曲為曲類中藥制劑，載于部頒中藥02冊(cè)，由陳皮、青皮、枳實(shí)等藥材經(jīng)發(fā)酵制成，具有健脾開胃，理氣導(dǎo)滯，清暑化濕的功效，用于食積飽脹，胸悶腹痛，不思飲食，暑濕感冒。由于在山楂麥曲顆粒制劑中沒(méi)有找到合適的山楂中的有效成分作為含量測(cè)定指標(biāo)，因此選取黔曲中的橙皮苷進(jìn)行測(cè)定，參照文獻(xiàn)資料[1-3]采用高效液相色譜法測(cè)定本制劑中橙皮苷的含量，進(jìn)行了方法學(xué)研究，對(duì)提取溶劑（甲醇、50%甲醇、乙醇、70%乙醇）、提取方法（超聲處理、回流）、提取溶劑用量（15mL、25mL、50mL）和提取時(shí)間（30、45、60分鐘）分別進(jìn)行了考察，并優(yōu)化了色譜條件，確定了最佳的實(shí)驗(yàn)方法。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：176-177.

[2]余良忠，文萍，李晶，等.維血康顆粒中藥材的鑒定及橙皮苷的測(cè)定[J].華西藥學(xué)雜志，2010，25（2）：195-197.

[3]文萍，趙雯，余良忠，等.黔曲質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（24）：77-79.