COPD患者血漿SP－A、SP－D水平變化及意義

關鍵，羅倩，李敬萍，許西琳，高巖，張中宏

（石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院呼吸科，石河子832002）

慢性阻塞性肺疾?。–hronic obstructive pulmonary disease COPD）是一種常見的慢性呼吸系統疾病。COPD的發(fā)病機制至今未明，可能是一個多因素的復雜過程，在COPD的異常氣道炎癥反應中，可以觀察到氣道壁增厚，肺泡的破壞和空氣空間的擴大［1－2］。

SP－A、SP－D是由肺泡II型上皮細胞和呼吸性細支氣管上Clara細胞合成、分泌到肺泡腔中的一種膠原糖蛋白，參與肺表面活性劑的動態(tài)平衡和肺防御系統［3］，具有肺臟特異性，作為COPD的生物學標志物可能會有更好的效應［4］。本研究檢測COPD患者血漿SP－A、SP－D水平變化，探討其濃度變化與吸煙量、肺功能指標等其他因素的關系。

1 對象與方法

1．1 研究對象

2011年10月－2012年2月在我院呼吸科住院治療的COPD患者48例（COPD組）和體檢中心的健康體檢者40例（對照組）。納入標準：患者符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南（2007年修訂版）》中的診斷標準；排除標準：（1）合并其它部位感染的患者；（2）有免疫系統疾病者；（3）近期使用免疫抑制劑者；（4）有其它肺部疾患者；（5）有嚴重心、腦、腎、血管疾病、腫瘤、血液系統疾病者（因肺心病本身所引起的心、腦疾病不包括在內）以及其他可能致血清SP－A、SP－D濃度發(fā)生變化的疾病。其中通過完善血球分析、肝腎功能、胸部影像學等相關檢查鑒別排除納入標準中的疾病。

1．2 資料收集方法

收集研究對象的年齡、性別、吸煙指數、是否戒煙等臨床信息，并測定肺功能指標FEV1%，FEV1／FVC。

1．3 血標本收集和處理

所有納入對象入院后均于次日清晨采用抗凝管空腹抽取靜脈血3mL，以2000r／min轉速離心8 min，將血漿與血細胞迅速分離，取上層血漿，裝入編號EP管中，放入－80℃冰箱凍存，待標本收集完全后，采用酶聯免疫吸附法（ELISA法）測SP－A、SP－D的含量。

1．4 統計學方法

使用SPSS17．0統計軟件包進行統計分析。計量資料以ˉX±S表示，計數資料比較采用率表示，兩樣本之間采用兩獨立樣本t檢驗，對各因素之間的相關性采用Pearson相關分析，P＜0．05有統計學意義，P＜0．01有顯著統汁學意義。

2 結果與分析

2．1 COPD組與對照組一般資料比較

COPD組與對照組中年齡、吸煙指數、性別構成比之間差異無統計學意義（P＞0．05），而COPD組血漿SP－A含量顯著高于對照組（P＜0．01），SP－D含量顯著高于對照組（P＜0．01），差異有統計學意義。COPD組第1s用力呼氣容積占預計值百分比（FEV1%預計值）、第1s用力呼氣容積占用力肺活量百分比（FEV1／FVC）顯著低于對照組（P＜0．01），差異有統計學意義（表1）。

2．2 SP－A及SP－D與其他指標的相關性

COPD患者的血漿SP－A含量與FEV1%預計值具有顯著負相關，相關系數r為－0．308，其與FEV1／FVC也具有負相關性，相關系數r為－0．330（P＜0．05）；血漿SP－D含量與FEV1%預計值具有顯著負相關，相關系數r為－0．535（P＜0．01），與FEV1／FVC也具有負相關性，相關系數r為－0．43（P＜0．05）。SP－A、SP－D含量與吸煙指數均無相關性（表2）。

3 討論

COPD是一種具有氣流受限特征的可以預防和治療的疾病，氣流受限不完全可逆、呈進行性發(fā)展，與肺部對香煙煙霧等有害氣體或有害顆粒異常炎癥反應有關［1］。COPD的病因及發(fā)病機制至今尚未完全明確。一般認為COPD的發(fā)病受環(huán)境因素和遺傳因素的雙重影響。吸煙是COPD患病關系最重要的外部因素。本臨床研究的主要目的是為探索COPD穩(wěn)定期血漿SP－A、SP－D的變化及與其他因素的相關性，本研究發(fā)現COPD組血漿SP－A和SP－D水平顯著高于健康對照組（P＜0．01），SP－A、SP－D水平分別與FEV1%預計值呈顯著負向相關。

肺表面活性物質（PS）分布于肺泡氣液平面，是由Ⅱ型肺泡上皮細胞合成和分泌的脂質和蛋白質所形成的混合物。目前已發(fā)現的肺表面活性物質相關蛋白（SP）包括親水性的SP－A、SP－D和疏水性的SP－B、SP－C。其中SP－A 是最先被發(fā)現、表達最強烈、信號最豐富的蛋白。它具有降低肺泡表面張力，維持肺的穩(wěn)定性功能，增強支氣管清除能力，抵抗氧化和蛋白酶所致的肺損傷，調節(jié)免疫和形成屏障的作用。本研究發(fā)現COPD患者血漿SP－A含量高于對照組，與韓麗萍［5］研究COPD患者血清SP－A、IL－8、hsCRP水平及臨床意義的探討結論一致，提示由于COPD患者SP－A分泌減少減弱了對外周氣道微生物的防御作用，從而使細菌、病毒等入侵，這種感染性肺損傷可損傷肺血氣屏障，使肺泡毛細血管通透性增加，從而使SP－A更易于通過增加的肺毛細血管膜進入血循環(huán)系統，使血清中SP－A增高。進一步提示血清SP－A可反映肺泡毛細血管的滲漏情況。

研究表明，SP－D具有先天的局部免疫功能［6］。但它在慢性支氣管炎及肺氣腫的發(fā)病機制中也起著重要作用，最近研究表明：SP－D有促進細菌的聚集，抑制細菌進入細胞內，防止病原菌的擴散和全身分布，調節(jié)細菌細胞壁的滲透性以及通過呼吸爆發(fā)導致細菌的殺傷，增強吞噬細胞的調理作用［7－8］。還有實驗［9］證明SP－D基因敲除小鼠體內金屬基質蛋白酶活性增加，氧化產物增加，過氧化氯產生增加，可加重肺部炎癥、肺氣腫和肺纖維化。Dahl等［10］也報道，SP－D是一種與肺特定相關，并可在血中檢測到的蛋白，與肺部病理變化存在相關性，SP－D可能是COPD的肺部特異標記。說明SP－D與COPD發(fā)病及病情進展關系密切。雖然肺部損傷嚴重時，肺部合成SP－D是降低的，但是肺損傷后，已合成并儲存在肺內的SP－D可入血，使肺損傷者血清SP－D濃度升高。另外，COPD可導致全身炎癥反應，可能存在其他部位分泌SP－D入血。本研究顯示COPD患者血漿SP－D顯著高于健康人，這與 Mutti等［11］的研究相似，COPD存在持續(xù)慢性肺部炎癥，可促使SPD分泌增加，肺上皮滲漏作用增強，可能與SP－D濃度升高有關。本研究發(fā)現SP－A與FEV1預計值存在負相關性，這與韓麗萍等［5］研究一致。SP－D與FEV1預計值也呈負相關，Sin等的研究顯示，COPD患者血清SP－D濃度與FEV1值呈負相關。關于SP－A、SP－D與肺功能指標的關系還需進一步論證。

在COPD的發(fā)展過程中，吸煙是主要危險因素，在大多數工業(yè)化國家其患病率是增加的［12］。Ilumets等［13］研究發(fā)現吸煙COPD組中血清SP－A、SP－D濃度均明顯高于不吸煙組，表明SP－A、SP－D的水平與吸煙有關。但本研究結果顯示COPD患者血清SP－A、SP－D與吸煙量均無相關性（r分別為0．152，0．120）。提示SP－A、SP－D可能參與了與吸煙有關的肺部疾病的發(fā)病機制，但還需要進一步研究SP－A、SP－D在COPD中的作用［14］。

綜上所述，COPD患者血漿中SP－A、SP－D濃度顯著高于對照組，且分別與FEV1%預計值呈負向相關，提示SP－A、SP－D可能是檢測COPD嚴重程度的生物標記物。將會為COPD患者的早期診斷、病情進展程度及藥物干預治療后療效的評估提供一定的依據，對降低其發(fā)病率及病死率有著極其重要意義。

［1］中華醫(yī)學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組．慢性阻塞性肺疾病診治指南［J］．中華結核和呼吸雜志，2007，30（1）：8－16．

［2］Carla Winkler，Elera－Nasserman E N，Holz O，et al．Comprehensive characterisation of pulmonary and serum surfactant protein D in COPD［J］．Respiratory Research，2011，12（1）：29．

［3］Duvoix A，Miranda E，Perez J，et al．Evaluation of fulllength，cleaved and nitrosylated serum surfactant protein D as biomarkers for COPD［J］．COPD，2011，8（2）：79－95．

［4］Lonas D A，Silverman E K，Edwards L D，et al．Serum surfactant protein D is steroid sensitive and associated with exacerbations of COPD［J］．Eur Respir J，2009，34（1）：95－102．

［5］韓麗萍，王秋月．COPD患者血清SP－A、IL－8、hsCRP水平及臨床意義的探討［J］．中國實用內科雜志，2008，28（4）：295－297．

［6］Barnes P J，Chowdhury B，Khafitonov S A，et al．Pulmonary biomarkers in chronic obstructive pulmonary disease［J］．Am J Respir Crit Care Med，2006，174（1）：6－14．

［7］Shrive A K，Martin C，Burns I，et al．Structural characterization of ligand－binging determinants in human lung surfactant protein D influerce of Asp 325［J］．J Mol Biol，2009，394（4）：776－788．

［8］胡華，遲晶宇．肺泡表面相關蛋白A和D研究進展與意義［J］．國際呼吸雜志，2010，30（12）：745－749．

［9］Yoshidaa M，Whitsett J A．Alveolar macrophages and emphysema in surfactant protein－D－deficient mice［J］．Respirology，2006，11：37－40．

［10］Dahl M．Biomarkers for chronic obstructive pulmonary disease－Surfactant protein D and C－reactive protein［J］．American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine，2008，177（11）：1177－1178．

［11］Mutti A，Corradi M，Goldoni M，et al．Exhaled metallic elements and serum pneumoproteins in asymptomatic smokers and patients with COPD or asthma［J］．Chest，2006，129（5）：1288－1297．

［12］Rabe K F，Hurd S，Anzueto A，et al．Global strategy for the diagnosis，management，and prevention of chronic obstructive pulmonary disease：GOLD executive summary［J］．Am J Respir Crit Care Med，2007，176（6）：532－555．

［13］Ilumets H，Mazur W，Toljamo T，et al．Ageing and smoking contribute to plasma surfactant proteins and protease imbalance with correlations to airway obstruction［J］．BMC Pulmonary Medicine，2011，19：11－19．

［14］Mazur W，Toljamo T，Ohlmeier S，et al．Elevation of surfactant protein A in plasma and sputum in cigarette smokers［J］．Eur Respir，2011，38（2）：277－284．