溶血對(duì)生化檢驗(yàn)準(zhǔn)確性的影響及糾正探析

徐建新

（湖南省邵陽縣人民醫(yī)院 湖南 邵陽 422100）

溶血指的是血細(xì)胞中的某些成分進(jìn)入血漿和血清，使得試驗(yàn)樣本中出現(xiàn)紅色增加的情況。在生化檢驗(yàn)中，溶血是對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行臨床檢驗(yàn)時(shí)經(jīng)常發(fā)生的現(xiàn)象之一，標(biāo)本出現(xiàn)溶血的現(xiàn)象，會(huì)造成生化檢驗(yàn)的結(jié)果出現(xiàn)誤差，從而導(dǎo)致臨床診斷出現(xiàn)一定的失誤。

1 資料與方法

1．1 資料：選取我院2012年6月進(jìn)行體檢的健康人員60例，其中男38例，女22例，年齡均在24－48歲之間，檢測(cè)對(duì)象各項(xiàng)身體檢查結(jié)果均正常。儀器設(shè)備使用美國貝克曼DXC－600生化分析儀，以及其相應(yīng)的配套試劑。

1．2 方法

1．2．1 標(biāo)本制備：體檢者在24h之內(nèi)沒有進(jìn)食高脂的飲食，采取清晨空腹采血的方法，使用真空采血管，對(duì)60例體檢者分別抽取兩支靜脈血，每支3ml，將其中一支在室溫條件之下放置15min，然后進(jìn)行離心處理，制備血清。另外一支置于冷凍室中進(jìn)行1h的冷凍，然后取出進(jìn)行解凍離心處理，取得上層發(fā)生溶血的血清。分為不同體積的樣本加入正常的血清之中，制成有著不同程度溶血現(xiàn)象的樣本。

1．2．2 檢測(cè)方法：依照說明書所標(biāo)注的方法，使用生化分析儀分別對(duì)試驗(yàn)者的不同程度溶血的血清以及正常的血清的AST、ALT、ALP、GGT、ALB、TP、LDH、Ur、Cre、Glu、UA、TC、TG 等21 項(xiàng)生化指標(biāo)進(jìn)行檢驗(yàn)。并使用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)者不同程度溶血以及正常血清的血紅蛋白的檢測(cè)。

2 結(jié)果

檢測(cè)分析結(jié)果表明，和正常血清相比，發(fā)生溶血現(xiàn)象的標(biāo)本中有11項(xiàng)生化指標(biāo)有顯著的差異，結(jié)果發(fā)生了降低或者升高，其中在電解質(zhì)、酶類以及膽紅素等方面有著較大的影響。臨床醫(yī)護(hù)人員應(yīng)該在最大限度上防止進(jìn)行檢驗(yàn)的標(biāo)本發(fā)生溶血現(xiàn)象，對(duì)于已經(jīng)發(fā)生溶血的標(biāo)本，生化檢驗(yàn)操作人員應(yīng)該采取適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)其進(jìn)行處理，使得溶血造成的結(jié)果誤差能夠降到最低。

3 討論

當(dāng)前的臨床生化檢驗(yàn)中，標(biāo)本的溶血是最為常見的影響干擾因素之一。溶血現(xiàn)象可以分為體內(nèi)溶血和體外溶血兩種。體外溶血主要是由物理因素，比如溶血發(fā)生的原因，大部分是抽血過程的不順利，或者標(biāo)本在運(yùn)送的過程中發(fā)生劇烈的震蕩，以及在血清的分離時(shí)其離心的速度過快等；化學(xué)因素，如血樣受到表面活性劑的影響；代謝因素，比如遺傳性的紅細(xì)胞增加等。而體內(nèi)溶血?jiǎng)t由物理因素，比如進(jìn)行血管手術(shù)之后；化學(xué)原因，如疾病以及藥物毒性等因素引起。

溶血對(duì)生化檢驗(yàn)有著多方面的影響。首先，可能對(duì)血紅素紅色對(duì)比色的分析造成正干擾，使用兩點(diǎn)比色法以及標(biāo)本空白等方法可以部分消除這一干擾。然而血紅素中蘊(yùn)含的正鐵離子可能和試劑中的氧化劑發(fā)生反應(yīng)，變?yōu)辄S褐色，造成兩點(diǎn)比色法的干擾。其次，血紅蛋白可能對(duì)蛋白質(zhì)分析造成正干擾，比如血紅蛋白電泳以及血清總蛋白的測(cè)定等方面。另外血紅蛋白還可能對(duì)膽紅素的測(cè)定產(chǎn)生負(fù)干擾。再次，血液中紅細(xì)胞含有高濃度的LDH、鉀、ACP，這些物質(zhì)在溶血現(xiàn)象中進(jìn)入血清，會(huì)導(dǎo)致血清其濃度的升高，而紅細(xì)胞之內(nèi)某些物質(zhì)的濃度較低，隨著溶血現(xiàn)象，也可能造成血清中這部分物質(zhì)的稀釋，尤其是在重度溶血中，稀釋作用更加不能忽視。最后，紅細(xì)胞之內(nèi)還有著較多的非糖還原物質(zhì)或者有機(jī)磷酸酯等，這些物質(zhì)隨著溶血在血清中有著較高的濃度，會(huì)對(duì)某些檢驗(yàn)的結(jié)果造成一定的干擾。另外和正常血清的標(biāo)本相比，發(fā)生溶血現(xiàn)象的標(biāo)本中DBIL、TBIL、AST、TP等項(xiàng)目的測(cè)定值有著顯著的升高，其原因在于和血漿之中比起來，紅細(xì)胞中LDH 其活性高出180倍，而ALT、AST 物質(zhì)的活性分別是7倍和38倍，CK 活性則比血漿高出14倍。當(dāng)RBC 發(fā)生破裂時(shí)，紅細(xì)胞之內(nèi)蘊(yùn)含的高濃度鉀、血紅蛋白以及多種酶等進(jìn)入血清，會(huì)導(dǎo)致其濃度指標(biāo)發(fā)生異常的增高。釋放進(jìn)入血清的Hb中珠蛋白等成分可能造成ALB、TP的升高。另外Hb還會(huì)造成血清可見光譜中短波吸光度發(fā)生明顯的增高，所使用的分析方法不同，其受到的干擾程度也就不同，使用終點(diǎn)法所受到Hb吸光度的干擾最大，而動(dòng)力學(xué)方法所受到的干擾則相對(duì)較小。

生化檢驗(yàn)其結(jié)果能否對(duì)患者血清的情況進(jìn)行真實(shí)的反映，對(duì)臨床治療有著重要的意義。從上述實(shí)驗(yàn)來看，溶血現(xiàn)象幾乎會(huì)對(duì)所有的檢驗(yàn)結(jié)果造成干擾和影響。因此在進(jìn)行標(biāo)本采集、分離、運(yùn)送以及檢測(cè)的過程中，相關(guān)部門應(yīng)該盡量防止人為原因造成標(biāo)本的溶血現(xiàn)象。在抽血之時(shí)應(yīng)該盡量選擇合理的穿刺部位，下針應(yīng)該盡量準(zhǔn)確，向試管之內(nèi)注血時(shí)不應(yīng)該過快，防止在試管中注入泡沫。在進(jìn)行血液的存放時(shí)不應(yīng)該將在冰箱冷凍室進(jìn)行存放，以避免融化之后引發(fā)溶血。最重要的一點(diǎn)進(jìn)行血標(biāo)本的離心時(shí)，應(yīng)該使離心速度平穩(wěn)地升高和降低，使其能夠自然地停穩(wěn)。

綜上所述，為了減少誤差和失誤的概率，提高生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，在檢驗(yàn)中如果有溶血現(xiàn)象發(fā)生，應(yīng)該采取相應(yīng)的措施，首先對(duì)于輕度溶血的標(biāo)本可以進(jìn)行校正，或者重新進(jìn)行標(biāo)本的抽取，另外，能夠從方法學(xué)上對(duì)溶血的影響和干擾進(jìn)行克服，比如在Hb對(duì)吸光度所造成的干擾等方面，能夠使用樣品空白的設(shè)置以及動(dòng)力學(xué)方法的措施來進(jìn)行避免。隨著近年來全自動(dòng)的生化分析儀的不斷普及，對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行溶血的檢查，已經(jīng)成為了試驗(yàn)中非常重要的質(zhì)量控制環(huán)節(jié)之一。

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