不同藥物對(duì)創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙大鼠血漿促腎上腺皮質(zhì)激素和皮質(zhì)醇的影響

劉 敏，袁 紅，陳金宏，鄭春秀，張振文，梁立武，鄭靜晨

創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(posttraumatic stress disorder，PTSD)是指在強(qiáng)烈的精神創(chuàng)傷后發(fā)生的心理、生理應(yīng)激反應(yīng)所表現(xiàn)出的一系列臨床綜合癥狀［1］。PTSD 發(fā)生時(shí)，輕者出現(xiàn)感知覺(jué)過(guò)敏或減退，記憶減退，思維遲緩和情緒的焦慮，重者出現(xiàn)抑郁、孤獨(dú)、恐懼、緊張，表現(xiàn)為精神運(yùn)動(dòng)性興奮或抑制，出現(xiàn)幻覺(jué)、妄想、認(rèn)知力和定向力障礙等重型精神障礙癥狀［2］。普通人群中50%以上的人一生中至少有一次曾暴露于創(chuàng)傷事件，PTSD 的患病率為7% ～12%，其中女性創(chuàng)傷暴露率為51.2%，PTSD 患病率為10.4%;男性創(chuàng)傷暴露率為60.7%，PTSD 患病率為5.0%［3］。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙可引起明顯的職業(yè)、心理和社會(huì)功能殘疾，給患者本人及家庭帶來(lái)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此對(duì)PTSD 預(yù)防的研究有著重要的現(xiàn)實(shí)和社會(huì)意義。本研究采用大鼠單一延長(zhǎng)應(yīng)激(single prolonged stress，SPS)模型，觀察甘麥大棗湯、梔子豉湯、天麻素等藥物對(duì)PTSD 大鼠血漿促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和皮質(zhì)醇(COR)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)健康雄性SD 大鼠40只，起始體重(200 ±20)g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.1.2 藥物與試劑 (1)天麻素膠囊:天麻，將其溶于水;(2)甘麥大棗湯:浮小麥30 g，甘草10 g，大棗10 g 組成處方;將上述藥物放入容器中，水煎濃縮，加95%乙醇沉淀，回收乙醇;用玻璃質(zhì)濾器G4過(guò)濾，調(diào)整pH 至6.8，隔水煮沸30 min 滅菌，于4 ℃冰箱保存，供實(shí)驗(yàn)用。實(shí)驗(yàn)時(shí)用無(wú)菌生理鹽水稀釋成100 mg/ml;(3)梔子豉湯:炒梔子10 g，淡豆豉10 g 組成處方;制作同上法。皮質(zhì)醇放射免疫分析試劑盒及促腎上腺皮質(zhì)激素放射免疫分析試劑盒購(gòu)買(mǎi)于北京萊博泰瑞科技發(fā)展有限公司。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 BFM－96 型多管放射免疫計(jì)數(shù)器(眾成機(jī)電技術(shù)公司);LD5－10G 低速大容量離心機(jī)(北京雷渤爾離心機(jī)有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 分組及模型制備 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)14 d 后分組。隨機(jī)分為5 組:空白組，模型組，甘麥大棗湯組，梔子豉湯組，天麻素組，每組各8 只大鼠。采用國(guó)際公認(rèn)的創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙動(dòng)物模型SPS 制備方法，步驟如下:先將大鼠禁錮2 h，立即強(qiáng)迫游泳20 min，經(jīng)過(guò)15 min 的恢復(fù)，乙醚麻醉至意識(shí)喪失，在籠子中不再給予任何刺激。造模后，各藥物組給予藥物0.02 ml/(g· d)灌胃，空白組及模型組給予生理鹽水0.02 ml/(g·d)灌胃，共計(jì)14 d。

1.2.2 ACTH 和COR 含量檢測(cè) 用10%水合氯醛(0.35 ml/100 g)給大鼠腹腔注射，麻醉后開(kāi)腹，腹主動(dòng)脈抽取血液2 ml，置入含抗凝劑的離心管中。分別采用促腎上腺皮質(zhì)激素放射免疫分析測(cè)定盒和皮質(zhì)醇放射免疫分析測(cè)定盒檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s 表示，進(jìn)行方差分析，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組與空白組比較，血漿ACTH、COR 含量明顯升高(P ＜0.01);梔子豉湯組、天麻素組、甘麥大棗湯組與模型組比較，血漿ACTH、COR 含量明顯降低(P ＜0.01 或P ＜0.05)，但各藥物組之間ACTH、COR 含量比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05，表1)。

表1 各組大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素和皮質(zhì)醇的含量變化 (±s)

注:與空白組比較，①P ＜0.05;與模型組比較，②P ＜0.05，③P ＜0.01

組別nACTH(pg/ml)COR(ng/ml)812.89 ±8.084.52 ±2.47模型組8134.77 ±9.20①22.91 ±4.08①梔子豉湯組889.77 ±26.58② 12.89 ±6.82③甘麥大棗湯組859.41 ±28.63③9.58 ±4.73③天麻素組859.90 ±39.55③ 10.15 ±4.38空白組③

3 討論

神經(jīng)內(nèi)分泌在維持機(jī)體內(nèi)穩(wěn)態(tài)及機(jī)體適應(yīng)環(huán)境中起著重要作用，參與機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)。有研究指出，PTSD 患者體內(nèi)存在嚴(yán)重的下丘腦－垂體－腎上腺(hypothalamic－pituitary－adrenal，HPA )軸激素紊亂［4，5］。國(guó)內(nèi)有研究指出，PTSD 的形成可能由于在各種先、后天因素所致心虛膽怯、肝郁不舒的基礎(chǔ)上，突然暴受驚嚇?biāo)拢?］。

甘麥大棗湯出自《金匱要略》，由甘草、小麥、大棗3 味藥組成，主治情志不舒，肝郁化火傷陰，或思慮過(guò)度，心脾兩傷導(dǎo)致的臟陰不足，心神失養(yǎng)，躁擾不寧的臟躁癥。心脾不足則神無(wú)所主，肝氣抑郁則悶悶不樂(lè)。其癥以“喜悲傷欲哭，象如神靈所作，數(shù)欠伸”為特征。治當(dāng)養(yǎng)心脾，緩肝急。方中以小麥為君藥，養(yǎng)心氣而和肝氣，配以甘草、大棗益心脾，和中緩急。三藥皆屬甘平之品，既可甘以補(bǔ)養(yǎng)心脾之虛，又可甘以緩肝之急。古今醫(yī)家常用于治療臟躁、精神障礙、更年期綜合征、失眠、癔癥、癲等［7］。

梔子豉湯出自《傷寒論》，由梔子和香豉2 味藥組成。方中梔子苦寒而色赤，其形似心，色赤應(yīng)心，寒能清熱，苦可通泄，素以清心除煩見(jiàn)長(zhǎng)，兼瀉三焦之火;豆豉色黑入腎，其氣香竄，其性升發(fā)，能宣散心經(jīng)郁熱，使心火透達(dá)于外，與梔子相配，又可能鼓動(dòng)腎水上達(dá)，以濟(jì)心陰，使心陽(yáng)不亢。如此則陰陽(yáng)協(xié)調(diào)，水火相濟(jì)，君主自安，逆亂自平，用于治療失眠［8］、小兒睡驚癥［9］、抑郁癥［10］、腦外傷引起的精神障礙、神經(jīng)衰弱等。

天麻在《神農(nóng)百草經(jīng)》被列為上品，天麻中存有一類苷類被稱為天麻苷，即天麻素，是天麻的主要活性成分之一。對(duì)天麻的藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，天麻素具有鎮(zhèn)靜催眠、抗驚厥、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)免疫、抗衰老和抗遺忘、神經(jīng)保護(hù)等作用。現(xiàn)代臨床中，天麻常用于治療眩暈［11］、頭痛［12］、卒中及卒中后遺癥［13］、帕金森病［14］、焦慮癥、神經(jīng)衰弱、癡呆、耳鳴耳聾、帶狀皰疹、骨折性關(guān)節(jié)炎等，有一定療效。

本研究通過(guò)對(duì)大鼠HPA 軸激素水平變化的觀察，發(fā)現(xiàn)模型組血漿ACTH、COR 含量較空白組增高，證實(shí)了HPA 軸具有對(duì)抗應(yīng)激反應(yīng)的功能，即增強(qiáng)機(jī)體對(duì)外來(lái)刺激的耐受。3 種藥物組與模型組比較，血中ACTH、COR 含量降低，表明甘麥大棗湯、梔子豉湯、天麻素等藥物對(duì)PTSD 引起的大鼠內(nèi)分泌功能紊亂具有調(diào)節(jié)作用。中醫(yī)治療疾病具有多途徑、多部位、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，甘麥大棗湯、梔子豉湯、天麻素等藥物除能糾正HPA 軸亢進(jìn)外，是否還通過(guò)其它機(jī)制發(fā)揮作用，以及藥物之間作用疊加對(duì)SPS模型大鼠HPA 軸的影響，尚需進(jìn)一步研究。

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