唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇、尿游離皮質(zhì)醇測定的相關(guān)性分析及其臨床價值

趙廣碧，賈 麗，儲小宏

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌實驗室，安徽 合肥 230022）

唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇、尿游離皮質(zhì)醇測定的相關(guān)性分析及其臨床價值

趙廣碧，賈 麗，儲小宏

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌實驗室，安徽 合肥 230022）

目的 探討正常人唾液皮質(zhì)醇、血漿皮質(zhì)醇和24 h尿游離皮質(zhì)醇三者之間的相關(guān)性。方法 選擇30例健康受試者同時檢測唾液皮質(zhì)醇、血漿皮質(zhì)醇和24 h尿游離皮質(zhì)醇。男子組和女子組各15例。采用化學(xué)發(fā)光技術(shù)測定，唾液標(biāo)本采用唾液收集器收集，血標(biāo)本為血漿，24 h尿液標(biāo)本用硼酸防腐。結(jié)果 唾液皮質(zhì)醇和血漿、24 h尿液皮質(zhì)醇在正常男女組之間均無顯著性差異（P＞0.05），唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇（r＝0.91）、唾液皮質(zhì)醇與24 h尿游離皮質(zhì)醇（r＝0.95），均存在顯著的相關(guān)性。結(jié)論 唾液皮質(zhì)醇可作為庫欣氏綜合征的篩查指標(biāo)。

唾液皮質(zhì)醇；血漿皮質(zhì)醇；尿游離皮質(zhì)醇；相關(guān)性

庫欣綜合征是臨床常見的需要鑒別診斷的疾病，血、尿皮質(zhì)醇增多是其重要的特征。目前常用的檢測方法是血皮質(zhì)醇水平和24 h尿游離皮質(zhì)醇。但存在的問題是頻繁采血和留取24 h尿的防腐處理和不方便，在門診檢查存在諸多不便，甚至造成檢測誤差。臨床上一直在探索一種準(zhǔn)確、簡便、無創(chuàng)的檢測皮質(zhì)醇方法。唾液皮質(zhì)醇能有效反映血漿皮質(zhì)醇濃度［1-2］。本文采用化學(xué)發(fā)光法對健康人群進行唾液皮質(zhì)醇測定，并與血漿皮質(zhì)醇、24 h尿游離皮質(zhì)醇進行相關(guān)性分析，為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。

1 材料

1.1 實驗對象 收集到30例健康受試者的樣本。其中男子組：男15例，年齡 20～57歲，平均年齡（33.5±7.2）歲。女子組：女15例 ，年齡20～45歲，平均年齡（30±6.5）歲。

1.2 標(biāo)本收集 血漿標(biāo)本采集，采用早晨8點抽血，用肝素抗凝、離心后備用。同天留取 24 h尿液標(biāo)本，用每 100 mL加入1 g硼酸防腐。同天午夜 12點采集唾液標(biāo)本，先用清水漱口后，棄去第一口唾液，然后將唾液收集器中的棉棒置于舌下5 min左右，取出。因棉棒中的脫脂棉可吸附唾液中的黏蛋白，防止唾液皮質(zhì)醇與之結(jié)合，使結(jié)果更加準(zhǔn)確。

2 方法

2.1 儀器與試劑 全自動化學(xué)發(fā)光免疫測定儀，由美國貝克曼公司提供，用于化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)所用試劑定標(biāo)液均由貝克曼公司提供。測定嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行，并同時進行室內(nèi)質(zhì)量控制。

2.2 尿液標(biāo)本的提取 取離心后的尿標(biāo)本0.5 mL加入 1 mL預(yù)冷的二氯甲烷混勻 5 min，再以3 000 r·min-1低速離心5 min，棄上清液后取400 μL提取液，置室溫揮發(fā)后，加入200 μL稀釋液充分混勻后待測。

2.3 唾液標(biāo)本的測定 將收集的唾液標(biāo)本棉棒取出置低溫離心機中3 000 r·min-1分離心10 min，取上清液2 mL進行測定。

2.4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用 SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較用 t檢驗和并進行相關(guān)性分析。

3 結(jié)果

3.1 不同組別皮質(zhì)醇結(jié)果分析 男子組血漿皮質(zhì)醇、24 h尿游離皮質(zhì)醇及唾液皮質(zhì)醇水平與女子組比較均無顯著性差異（P＞0.05）。見表1。

3.2 相關(guān)性分析 唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇比較，有顯著的相關(guān)性（r＝0.91，P＜0.001）；唾液皮質(zhì)醇與24 h尿游離皮質(zhì)醇比較，亦有顯著的相關(guān)性（r＝0.95，P＜0.001）。見表2。

表1 不同性別組三種標(biāo)本皮質(zhì)醇測定結(jié)果的比較

表2 唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇、24 h尿游離皮質(zhì)醇的相關(guān)性分析

3.3 三指標(biāo)不同標(biāo)本的正常值確定 以標(biāo)準(zhǔn)差（x±2s）的范圍確定正常值，血漿皮質(zhì)醇（早晨8點）正常值為 323.6～638.8 nmol·L-1，尿游離皮質(zhì)醇正常值（提取后）為 37.5～64.3 μg／24 h尿，唾液皮質(zhì)醇（午夜12點）正常值3.90～6.74 nmol·L-1。

4 討論

本文測定了正常成人的唾液皮質(zhì)醇、血清皮質(zhì)醇和尿游離皮質(zhì)醇，結(jié)果顯示，不同樣本男、女間均無顯著性差異（P＞0.05）；唾液皮質(zhì)醇與血皮質(zhì)醇、24 h尿游離皮質(zhì)醇的相關(guān)性分析顯示均有非常顯著的正相關(guān)（P＜0.001）。國外早期研究，唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇晝夜節(jié)律水平變化完全一致［3］，這與本文的相關(guān)性研究結(jié)果非常相近。

血漿皮質(zhì)醇的測定對于診斷腎上腺皮質(zhì)功能及垂體前葉功能異常非常重要，但由于受血皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白（corticosteroid-binding globulin，CBG）的影響如肝硬化、腎臟病變、妊娠等引起的低蛋白血癥，使結(jié)果減低，從而造成假陰性，不能反映血漿皮質(zhì)醇的真實水平。而唾液皮質(zhì)醇是一個很好的衡量的游離皮質(zhì)醇水平，特別是在 CBG濃度發(fā)生變化的情況下可以彌補血漿總皮質(zhì)醇測定的不足［4］。

24 h尿游離皮質(zhì)醇水平也是反映腎上腺皮質(zhì)功能的一個可靠指標(biāo)［5］。皮質(zhì)醇由腎上腺皮質(zhì)分泌，僅游離皮質(zhì)醇具有生物活性，可以間接反映血中游離皮質(zhì)醇的水平，因此24 h尿游離皮質(zhì)醇水平的準(zhǔn)確測定是評價腎上腺皮質(zhì)功能的重要指標(biāo)，對相關(guān)疾病 （如Cushing綜合征、Addison病、垂體前葉功能減退癥等）的明確診斷起著十分重要的作用。但24 h尿游離皮質(zhì)醇測定受色素、藥物（強的松）、腎臟病、糖尿病、飲水量等因素的影響較大，而且留取標(biāo)本的方法繁瑣，尤其是兒童和老人。測定前需提取，故24 h尿游離皮質(zhì)醇測定有很多局限性。而唾液標(biāo)本的留取只需將唾液收集器放置測試者舌下5 min即可，留取方便快速。

近年來唾液皮質(zhì)醇的測定已在國內(nèi)外廣泛開展 ，由于它反映的是具有活性的游離皮質(zhì)醇，故對評估腎上腺皮質(zhì)功能非常重要。在診斷庫欣氏綜合征方面，午夜唾液皮質(zhì)醇的靈敏度和特異性均超過 90%以上，故唾液皮質(zhì)醇的測定可作為庫欣氏綜合征的一線篩查指標(biāo)［6-10］。唾液皮質(zhì)醇采集方便，可以反復(fù)多次、連續(xù)留取標(biāo)本，故可用于周期性或偶發(fā)性庫欣氏綜合征的腎上腺功能評估。尤其在庫欣氏綜合征早期癥狀不典型時或間歇期，僅測定一次深夜唾液皮質(zhì)醇皮正常，并不能排除庫欣氏綜合征，所以一次測試無法診斷亞臨床庫欣綜合征和可能發(fā)現(xiàn)的腎上腺腺瘤［11］。

唾液皮質(zhì)醇在精神緊張和心理壓力方面也有報道，如護士職業(yè)倦怠引起唾液皮質(zhì)醇結(jié)果升高，顯示唾液皮質(zhì)醇結(jié)果與個人成就感呈負相關(guān)，與情緒枯竭和去人格化呈正相關(guān)［12］。抑郁癥病人唾液皮質(zhì)醇濃度升高，可作為抑郁癥診斷的一種輔助手段。無論如何，不同程度的緊張刺激等應(yīng)激，通過較高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和下丘腦—垂體—腎上腺軸，最終導(dǎo)致唾液皮質(zhì)醇水平升高。

5 小結(jié)

唾液皮質(zhì)醇與血漿皮質(zhì)醇、24 h尿游離皮質(zhì)醇有顯著的相關(guān)性，且無性別差異。由于標(biāo)本收集簡便、無創(chuàng)，可反復(fù)連續(xù)收集，不受血液 CBG的影響，無尿游離皮質(zhì)醇干擾因素的影響，而且運輸、保存較為方便，特別適宜兒童、老年人以及行動不便的患者。唾液皮質(zhì)醇可作為庫欣氏綜合征的一線篩查指標(biāo)，廣泛應(yīng)用于臨床。

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Correlation analysis of salivary cortisol，plasma cortisol and urinary free cortisol and its clinical value

ZHAO Guang-bi，JIA Li，CHU Xiao-hong
（Endocrine Laboratory，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei，Anhui 230022，China）

Objective To investigate the correlation among normal salivary cortisol，plasma cortisol and 24-hour urine free cortisol of healthy human beings.Methods A total of 30 healthy subjects were selected and equally divided into male group and female group.The levels of salivary cortisol，plasma cortisol and 24-hour urine free cortisol were detected by chemiluminescence technique.Salivary specimens were collected using salivary collector.Blood specimens were blood plasma.24-hour urine specimens were antisepticized by using boric acid.Results The levels of salivary cortisol，plasma cortisol and 24-hour urine free cortisol showed no significant difference between male group and female group（P＞0.05）.The correlation analysis results showed that the levels of three kinds of cortisol were highly related（P＜0.001）.Conclusions Salivary cortisol testing can be used as screening indicator of Cushing’s syndrome.

salivary cortisol；plasma cortisol；urinary free cortisol；correlation

10.3969／j.issn.1009-6469.2014.05.021

2013-10-05，

2013-12-09）