狄斯瓦螨對蜜蜂的影響——蜜蜂個體蜂螨數(shù)與殘疾、死亡率的關(guān)系

狄斯瓦螨（ Anderson and Trueman），一種以西方蜜蜂幼蟲、蛹和成年蜂的血淋巴為食的蜜蜂體外寄生蟲，對意大利蜜蜂蜂群危害嚴(yán)重。狄斯瓦螨對蜂群的寄生涉及到很多不同的侵染機制，受到侵害的蜂群通常在三到五年內(nèi)死亡。無論單只蜜蜂還是整個蜂群都是由于眾多內(nèi)部有害因素引起的蜂群消失。狄斯瓦螨對蜜蜂的傷害程度與侵染程度成正比，雄蜂蛹受侵染程度高于工蜂蛹，相當(dāng)于大約20個雌蜂螨侵入一個雄蜂蛹房。

在入侵封蓋的蜂房后不久，成年雌蜂螨以一種貫穿于整個幼蟲、蛹皮膚外的方式生存，以保證他們及其后代以血淋巴為食。起初，雌蜂螨在幼蟲的不同位置獨立取食。由于幼蟲皮外被一層很薄的彈性角質(zhì)層所覆蓋，短期內(nèi)蜂螨很難定位一些小的取食口，受傷的表皮也可能迅速愈合。隨著幼蟲的不斷生長，咬傷的傷口不斷增大，但深度不斷減小。形成的穿孔在寄主傷口周圍對寄主組織形成傷害，以吸取血淋巴為食的蜂螨及其后代不斷地在穿孔處取食。這些蜂螨通常在預(yù)蛹和蛹期各做一個穿孔取食，已達(dá)到不斷感染蜂群的效果。蜜蜂預(yù)蛹期時，蜂螨不斷的在蜜蜂的第六腹板取食，并形成穿孔。雌蜂螨最終在寄主蛹期蛻化時形成穿孔，其通常位于寄主蜜蜂腹部第二段的一側(cè)，傷口持續(xù)幾日不愈合，直至蛹期結(jié)束。蜂螨將致大約98～99%的雄蜂和75%的工蜂在胸部一側(cè)位置出現(xiàn)更大程度的穿孔。蛹化后測量這些穿孔，其直徑大概都在50～60 μm左右。在呈現(xiàn)褐色的蛹期，穿孔可能到達(dá)80～100 μm，甚至更大。

狄斯瓦螨的唾液被認(rèn)為是導(dǎo)致傷口持續(xù)的開裂和觀察到傷口畸形愈合的主要因素。理查德等人對從蜂螨上收集的唾液腺分泌物進行了電泳分析，發(fā)現(xiàn)至少有15種截然不同的蛋白條帶，其分子量范圍從17kDa到130kDa。與此同時，用蜂螨唾液腺的分泌物對孵育18小時的番茄蛾毛蟲血細(xì)胞進行連續(xù)滴定，表明唾液腺分泌物可破壞血細(xì)胞并抑制寄主偽足的生長和聚合物形成的能力。故狄斯瓦螨唾液腺分泌物能夠抑制血

山東省蜂業(yè)良種繁育推廣中心，泰安271000秦浩然譯

狄斯瓦螨（Varroa destructorAnderson and Trueman），一種以西方蜜蜂幼蟲、蛹和成年蜂的血淋巴為食的蜜蜂體外寄生蟲，對意大利蜜蜂蜂群危害嚴(yán)重。狄斯瓦螨對蜂群的寄生涉及到很多不同的侵染機制，受到侵害的蜂群通常在三到五年內(nèi)死亡。無論單只蜜蜂還是整個蜂群都是由于眾多內(nèi)部有害因素引起的蜂群消失。狄斯瓦螨對蜜蜂的傷害程度與侵染程度成正比，雄蜂蛹受侵染程度高于工蜂蛹，相當(dāng)于大約20個雌蜂螨侵入一個雄蜂蛹房。

在入侵封蓋的蜂房后不久，成年雌蜂螨以一種貫穿于整個幼蟲、蛹皮膚外的方式生存，以保證他們及其后代以血淋巴為食。起初，雌蜂螨在幼蟲的不同位置獨立取食。由于幼蟲皮外被一層很薄的彈性角質(zhì)層所覆蓋，短期內(nèi)蜂螨很難定位一些小的取食口，受傷的表皮也可能迅速愈合。隨著幼蟲的不斷生長，咬傷的傷口不斷增大，但深度不斷減小。形成的穿孔在寄主傷口周圍對寄主組織形成傷害，以吸取血淋巴為食的蜂螨及其后代不斷地在穿孔處取食。這些蜂螨通常在預(yù)蛹和蛹期各做一個穿孔取食，已達(dá)到不斷感染蜂群的效果。蜜蜂預(yù)蛹期時，蜂螨不斷的在蜜蜂的第六腹板取食，并形成穿孔。雌蜂螨最終在寄主蛹期蛻化時形成穿孔，其通常位于寄主蜜蜂腹部第二段的一側(cè)，傷口持續(xù)幾日不愈合，直至蛹期結(jié)束。蜂螨將致大約98～99%的雄蜂和75%的工蜂在胸部一側(cè)位置出現(xiàn)更大程度的穿孔。蛹化后測量這些穿孔，其直徑大概都在50～60 μm左右。在呈現(xiàn)褐色的蛹期，穿孔可能到達(dá)80～100 μm，甚至更大。

狄斯瓦螨的唾液被認(rèn)為是導(dǎo)致傷口持續(xù)的開裂和觀察到傷口畸形愈合的主要因素。理查德等人對從蜂螨上收集的唾液腺分泌物進行了電泳分析，發(fā)現(xiàn)至少有15種截然不同的蛋白條帶，其分子量范圍從17kDa到130kDa。與此同時，用蜂螨唾液腺的分泌物對孵育18小時的番茄蛾毛蟲血細(xì)胞進行連續(xù)滴定，表明唾液腺分泌物可破壞血細(xì)胞并抑制寄主偽足的生長和聚合物形成的能力。故狄斯瓦螨唾液腺分泌物能夠抑制血

細(xì)胞介導(dǎo)傷口愈合并阻止對寄主的反饋，從而不斷的在寄主上取食。

臨近蛹期結(jié)束的時候，越來越多的傷口開始逐漸愈合。出現(xiàn)疤痕后，成年蜂在蜂螨出現(xiàn)前封蓋巢房，保護了蛹的生長環(huán)境以避免細(xì)菌感染。我們觀察到蜜蜂被單一的蜂螨感染后，從蛹脫皮到成蟲時表皮通常是完全閉合的。蛹房通常受到四至五只蜂螨的侵染，延遲蛹傷口愈合。就像成年蜂在脫蛹前一樣，我們在雄性蜂上觀察到患有高度寄生后愈合不完全的大傷口。這意味著剩余的傷口可能會使寄生蟲進入到寄主的體內(nèi)。在蛹發(fā)育時期，這些取食的傷口會受到細(xì)菌的感染。工蜂蛹的胸口及雄蜂蛹腹部穿孔處的傷口受到大量細(xì)菌侵染，因蜂螨的感染程度不同，約15～30%的蛹傷口出現(xiàn)大量細(xì)菌，但有沒觀察到相應(yīng)的死亡。

通過狄斯瓦螨對單個蜜蜂身體和生理的影響的研究，發(fā)現(xiàn)蜂螨可引起很多病癥。感染蜂螨后，初出房蜜蜂的濕重、干重及含水量與蜂螨數(shù)的增長呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。據(jù)估計，所有雌蜂螨都出現(xiàn)在蜜蜂的發(fā)育階段，寄主將流失其身體3%的水分。寄生蜂螨的蜜蜂頭部和腹部蛋白濃度降低，腹部的碳水化合物濃度同樣出現(xiàn)降低的現(xiàn)象，但檢測不到脂質(zhì)物質(zhì)，并沒有出現(xiàn)代謝物質(zhì)的損失。然而，判斷死亡率的高低和最終崩潰蜂群的蜂房中是否存在蜂螨直接相關(guān)。約8.5%的初出房蜜蜂形態(tài)畸形，且畸形率與蛹房中蜂螨數(shù)量呈正相關(guān)。但我們發(fā)現(xiàn)不同感染程度的蜜蜂都存在畸形，這可能與傳染性病原體等其他因素有關(guān)。蜂螨在24小時內(nèi)吸取以C14標(biāo)記的活蜂、死蜂，從而得出一個成年雌蜂螨24小時內(nèi)可以消耗0.67 μl血淋巴。這同樣證明了蜂螨從一個標(biāo)記的蜜蜂轉(zhuǎn)移寄主后，將C14標(biāo)記傳遞到了一個先前非放射性標(biāo)記的蜜蜂?；蚴窃醋苑潋谄鞯奈廴舅斐傻霓D(zhuǎn)移，這是支持蜂螨為病原體介質(zhì)（如病毒）的重要觀點。

與未感染狄斯瓦螨的蛹相比，感染狄斯瓦螨的蛹其血液中蛋白質(zhì)含量較低。由于蛋白質(zhì)通常與個體發(fā)育中重要器官的形成有關(guān)，這可能表明血淋巴中蛋白含量的降低，對蛹期感染蜂螨的蜜蜂組織出現(xiàn)畸形或不生長的原因。在蛹發(fā)育期，未感染的蜜蜂人工孵化后立即出現(xiàn)感染，與未感染的蜜蜂相比咽下腺發(fā)育不成熟，這證明了寄生蟲利用幼小寄主的能量和營養(yǎng)，從導(dǎo)致寄主發(fā)育不良。

對感染等量狄斯瓦螨后，相同初生重的雄性蜂蛹和工蜂蛹的影響進行比較，發(fā)現(xiàn)不同性別蜂都出現(xiàn)了體重下降的現(xiàn)象，這表明蜂螨從工蜂和雄性蜂血淋巴上獲取的營養(yǎng)物質(zhì)是相同的。同時也證明了，除在孵化時出現(xiàn)體重下降外，與未感染狄斯瓦螨的蜜蜂相比，蛹期感染狄斯瓦螨的存活時間較短。

通過熱量法、呼吸運動計量法和資源利用率，測定了蜂螨代謝所需的能量和營養(yǎng)。通過熱量生成速率計算得到蜂螨的能量代謝，對不同性別和不同發(fā)育周期的無蜂螨蜜蜂進行檢測，發(fā)現(xiàn)這在蜂群崩潰的眾多原因中顯得微不足道。蜂蛹的感染水平不同，蜂螨的代謝速率在1.1～2.4%之間。由于蜂螨的代謝機制較低，但對營養(yǎng)物質(zhì)的要求又非常高，故在幼蟲階段可利用幼蟲組織中高達(dá)25%的營養(yǎng)物質(zhì)。蜂螨的侵染將導(dǎo)致蜜蜂乃至整個蜂群的畸形和虛弱。

狄斯瓦螨作為細(xì)菌和真菌的載體，已被證明為感染潛伏病毒的載體和誘導(dǎo)物。被寄生蟲侵染、破壞的寄主組織和免疫系統(tǒng)，通過釋放被破壞組織的感染物和刺激病毒性傳染物的復(fù)制來誘導(dǎo)潛在病毒感染。通過提取蜂螨的個體和部分組織，我們可以觀察到直徑為27nm的病毒顆粒。凈化制備病毒制劑，同時準(zhǔn)備一種抗血清物質(zhì)來檢測單個蜂螨中的病毒。免疫組織學(xué)研究表明，胃盲囊被嚴(yán)重感染，而在像唾液腺、腦、直腸或生殖器官等其他組織中沒發(fā)現(xiàn)病毒的增殖。在電子顯微鏡下發(fā)現(xiàn)胃盲囊細(xì)胞中對位結(jié)晶格的大聚焦病毒顆粒。像小核糖核酸這樣的病毒顆粒主要存在于細(xì)胞質(zhì)中，而大部分病毒顆粒稀疏的分布在液泡中。有時在細(xì)胞中的小泡膜或長管式膜結(jié)構(gòu)中，可以觀察到病毒顆粒，這表明病毒是在蜂螨中進行復(fù)制的。

大量實驗證明，狄斯瓦螨是殘翅病毒（DWV）在蜜蜂中廣泛傳播的介質(zhì)。除了可能存在的濃度效應(yīng)外，在自然感染DWV蜂蛹中發(fā)現(xiàn)的成年雌蜂螨，其存在的病毒可能遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過那些在他們寄主上發(fā)現(xiàn)的病毒。我們發(fā)現(xiàn)蜂螨的增長和單個蜜蜂形態(tài)畸形的發(fā)病率、死亡率之間存在一定的關(guān)系，蜂螨大量的傳播病毒顆粒，最終導(dǎo)致蜜蜂在出房之前就已經(jīng)死亡。