SPME-GCMS在藥品分析中的應(yīng)用研究

王曉寧，睢超霞

漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 ，河南漯河 462002

目前，我國(guó)的對(duì)農(nóng)藥的使用最多的是有機(jī)磷農(nóng)藥，該農(nóng)藥具有毒性高的特點(diǎn)，由于其的廣泛使用，使得近年來瓜果農(nóng)藥殘留中毒事件發(fā)生的概率提高。在農(nóng)產(chǎn)品中，對(duì)殘留農(nóng)藥存在所受到的關(guān)注程度逐漸提高，對(duì)農(nóng)藥殘留、使用加強(qiáng)管理勢(shì)在必行，因此，建立靈敏、可靠、簡(jiǎn)便、快捷的監(jiān)測(cè)手段是當(dāng)務(wù)之急。

1 SPME-GCMS 簡(jiǎn)介

一般情況下，對(duì)有機(jī)磷污染物的測(cè)定首先要采用有機(jī)溶劑，或者超臨界流體萃取等技術(shù)對(duì)污染樣品進(jìn)行處理，這種方法在分離凈化的過程中存在一定的缺陷，如工作量大、步驟繁瑣、成本高、好市場(chǎng)，且所用的有機(jī)溶劑對(duì)生態(tài)環(huán)境、人體健康都會(huì)產(chǎn)生負(fù)面影響。SPME，及固相微萃取技術(shù)是一種無溶劑、直接的固體萃取分離技術(shù)，該技術(shù)采用不同色譜固定相或者吸附劑，涂于一根熔融石英纖維上，制成萃取頭，然后直接從樣品中提取分離欲測(cè)組分，固相微萃取裝置實(shí)質(zhì)就是微量進(jìn)樣器，與氣相色譜儀進(jìn)樣口相接，對(duì)待測(cè)物進(jìn)行高溫?zé)峤?。SPME 最大的優(yōu)勢(shì)就是可以與GC 聯(lián)用，集萃取、分離、進(jìn)樣、濃縮于一體，不需要有機(jī)溶劑，簡(jiǎn)單方便。采用SPME 方法對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行測(cè)定目前還不常見。本文主要采用SPME 和GCMS 聯(lián)用的方法，對(duì)蔬菜殘留有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分析測(cè)定，建立一種先進(jìn)可靠、實(shí)用有效的方法，為藥品分析奠定理論基礎(chǔ)。

2 儀器、材料及方法

2.1 儀器、材料

SPME 裝置，氣相色譜儀（HP5890II），聚二甲基硅氧烷萃取頭（膜厚100μm），磁力攪拌臺(tái)（nuvoaII），勻漿器（National）。

有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，去離子水，茼蒿。

2.2 方法

1）蔬菜樣品預(yù)處理。取新鮮茼蒿50g，置于勻漿器內(nèi)剪碎，加入去離子水，越150g，攪拌勻漿5min，即得到蔬菜勻漿液，總體積為150mL，按實(shí)驗(yàn)需求，勻漿后加入4 種有機(jī)磷農(nóng)藥，與蔬菜組織混合；

2）SPME 萃取及GCMS 進(jìn)樣。去蔬菜勻漿液5mL 裝于10mL 小容器瓶中，置于磁力攪拌臺(tái)上，在常溫下進(jìn)行攪拌，轉(zhuǎn)速為中等速度。然后在勻漿液中插入SPME 萃取頭，一段時(shí)間后取出，然后放于去離子水中清洗，清洗不能超過5s，將殘留在萃取頭上的蔬菜碎屑除掉，將萃取頭縮進(jìn)SPME 裝置針管內(nèi)，插入氣相色譜儀，推出萃取頭，過5min 后抽出萃取頭，拔出針管。萃取頭每次用完以后，放置在GC 進(jìn)樣口處，在270℃高溫及He 氣體條件下處理二三十分鐘，一般情況下，20min 后就可以保證萃取頭上無農(nóng)藥殘留；

3）氣相色譜條件。檢查室溫度：290℃，氣化室溫度：270℃、載氣：He，5mL/min；補(bǔ)充氣：N2，15mL/min；升溫：初溫35℃，持續(xù)6min，然后按照30℃/min，上升到200℃，停止3min，再以10℃/min 上升到280℃，持續(xù)15min。此時(shí)，不分流進(jìn)樣，5min 后打開分流閥。

3 試驗(yàn)結(jié)果及討論

3.1 解熱時(shí)間

把萃取得到的附著在SPME 萃取頭上的待測(cè)化合物插入氣相色譜儀，氣化室270℃高溫目標(biāo)進(jìn)行解熱，依靠流動(dòng)相盜圖色譜柱，這個(gè)環(huán)節(jié)是SPME 與GCMS 聯(lián)用的重要步驟。在萃取等條件相同的基礎(chǔ)上，萃取頭的解熱時(shí)間分別為1、2、···、6 分鐘時(shí)，GCMS 影響無明顯變化，四種有機(jī)磷農(nóng)藥相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：二嗪農(nóng)4.75%、甲拌磷3.63%、乙硫磷7.65%、甲基對(duì)硫磷4.33%，因此可以知道，高溫?zé)峤獾臅r(shí)間可能較短，為了方便操作，使試驗(yàn)條件一直，本文所選定的解熱時(shí)間均為5min。

3.2 樣品勻漿處理

4 種有機(jī)磷農(nóng)藥都具有水溶性，不易揮發(fā)。對(duì)這些有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行提取分離需要借助SPME 萃取頭，先制備液態(tài)樣品，反復(fù)試驗(yàn)，采用上文所述預(yù)處理步驟，得到的蔬菜勻漿液比較均勻，蔬菜顆粒較小，有利于萃取，最主要的是有機(jī)磷農(nóng)藥的損失少，穩(wěn)定性好。

3.3 離子強(qiáng)度

溶液中的離子強(qiáng)度的增加可以在水樣中添加氯化鈉，從而有效的降低有機(jī)化合物的溶解，改善萃取的效率。為了檢驗(yàn)SPME 萃取時(shí)是否收到漿液中離子強(qiáng)度增大的影響，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)：取3 份漿液，各5mL，個(gè)加入標(biāo)準(zhǔn)混合農(nóng)藥，再加入NaCl 分別為0g、0.5g 和1g，混合后進(jìn)行萃取，然后進(jìn)行GC 測(cè)定，測(cè)定結(jié)果為，除NaCl 含量不同，其余條件均相同，氯化鈉含量越高，萃取的效率越低。因此可以肯定，加無機(jī)鹽的方法提高萃取效率并不是適合每一種待測(cè)組分。

3.4 攪拌速度

在萃取過程中，對(duì)試樣反復(fù)進(jìn)行攪拌，使待測(cè)組分均勻，達(dá)到分配平衡。本文所進(jìn)行的試驗(yàn)攪拌速度均為中等速度。如果分別采用不攪拌、低速攪拌、中速攪拌和高速攪拌，經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)于一種農(nóng)藥組分而言，在其余條件均相同時(shí)，SPME 吸附量上不攪拌小于高速攪拌8%，低速攪拌和中速攪拌分別達(dá)到高速攪拌的83%和87%?？梢姴粩嚢钑r(shí)的擴(kuò)撒速度最慢，主要是因?yàn)楣滔啾砻嬗幸粚屿o止水膜。在攪拌時(shí)，水膜破壞掉，吸附量增大。雖然高速攪拌時(shí)吸附量最大，萃取裝置中小磁轉(zhuǎn)子不穩(wěn)定，可能會(huì)出現(xiàn)不確定因素，因此選擇中等攪拌速度。

3.5 其它因素

除上述幾種影響因素之外，還有平衡時(shí)間、定量可行性分析等因素也會(huì)影響到試驗(yàn)的結(jié)果，在實(shí)際試驗(yàn)中，只要保持一段萃取 時(shí)間，就能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果，沒有必要等到平衡。為了提高精密度及靈敏度，需要達(dá)到一定的萃取量。雖然固相微萃取技術(shù)是一種動(dòng)態(tài)平衡技術(shù)，在一些相同條件下，采用外標(biāo)法測(cè)量是可以的，主要是被測(cè)樣品相同并且干凈的影響。此外，如果存在適用的內(nèi)標(biāo)物，進(jìn)行稱重時(shí)加入，可以校正處理時(shí)的損失，使得樣品處理和分析定量更加的準(zhǔn)確。

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