有凝固物漿膜腔積液的細(xì)胞塊制作方法

張世瓊，傅春玲，劉定榮

(重慶市涪陵中心醫(yī)院病理科，重慶408000)

有凝固物漿膜腔積液的細(xì)胞塊制作方法

張世瓊，傅春玲，劉定榮

(重慶市涪陵中心醫(yī)院病理科，重慶408000)

目的探討有凝固物的漿膜腔積液的細(xì)胞塊制作方法。方法將帶有凝固物的胸、腹水離心，取離心沉淀物制成細(xì)胞塊，按常規(guī)組織標(biāo)本處理程序，石蠟包埋、切片、HE染色。結(jié)果此方法制成的切片細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保持完好，核漿染色對(duì)比良好，圖像清楚，免疫組化染色效果好，原位雜交定位清楚、準(zhǔn)確。結(jié)論有凝固物的漿膜腔積液制作細(xì)胞塊操作簡(jiǎn)便，實(shí)用性強(qiáng)，細(xì)胞塊可用作HE染色及免疫組化染色和原位雜交檢查，對(duì)漿膜腔積液的正確診斷有較大的幫助。

細(xì)胞塊；凝固；漿膜腔積液；病理技術(shù)

漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查是一種簡(jiǎn)單、特異性較高的檢查方法，對(duì)疾病的診斷起到了較大作用。實(shí)際工作中，常常遇見(jiàn)送檢的胸、腹水中有凝固物，此時(shí)若行常規(guī)離心涂片染色，其陽(yáng)性率必然降低，影響疾病的正確診斷。此前，對(duì)有凝固物的胸腹水，多數(shù)情況將之丟棄，致使再次穿剌檢查，增加患者痛苦?；诖朔N情況，筆者收集了2011年5月至2012年4月有凝固物的胸、腹水30例，嘗試將送檢的胸腹水連同凝固物離心后制成細(xì)胞塊，行HE染色及免疫組化檢查，取得滿意的效果，現(xiàn)介紹如下：

1 材料與方法

1.1 材料10%中性福爾馬林；乙醇；二甲苯；石蠟；Leica ASP300S脫水機(jī)；TD4-Ⅱ臺(tái)式自動(dòng)平衡離心機(jī)；一次性10 ml塑料離心管；Shandon Finesse 325切片機(jī)。

1.2 方法將胸、腹水內(nèi)的凝固物用鑷子輕輕夾出放入一次性塑料離心管中，取剩下的胸腹水底部部分10 ml混入盛有凝固物的塑料離心管內(nèi)，平衡后放入離心機(jī)離心10 min，棄上清液，用鑷子輕輕夾出凝固物，將底部沉淀物常規(guī)涂片兩張行HE染色，再將凝固物放回一次性塑料離心管中，加入10%中性福爾馬林液固定至少30 min，用濾紙包裹凝固物放入脫水盒，與組織標(biāo)本一起入Leica ASP300S脫水機(jī)，常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，根據(jù)需要做免疫組化染色。

2 結(jié)果

對(duì)比細(xì)胞塊切片及常規(guī)涂片，細(xì)胞塊切片HE染色細(xì)胞量大，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，核漿對(duì)比良好，染色鮮艷（圖1）；常規(guī)涂片細(xì)胞量較少，結(jié)構(gòu)不清，細(xì)胞空泡變性、胞膜破裂、核染色模糊現(xiàn)象較為常見(jiàn)。免疫組化染色，細(xì)胞塊切片著色清楚，背景干凈（圖2），且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑耗用量少；常規(guī)涂片厚薄不均，染色模糊，背景著色，試劑用量大。

圖1 胸水細(xì)胞塊HE切片可見(jiàn)散在的癌細(xì)胞，背景中可見(jiàn)中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞(HE×400)；圖2胸水細(xì)胞塊切片免疫組化染色，TTF1癌細(xì)胞核陽(yáng)性(SP×400)

3 討論

漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)疾病的正確診斷意義重大，體液細(xì)胞塊制作技術(shù)是對(duì)脫落細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)的一項(xiàng)重要發(fā)展。有凝固物的胸、腹水制作的細(xì)胞塊，由于體液本身的纖維蛋白支架取代了外源性的細(xì)胞支架（如蛋清、脫脂棉等），使其更接近組織塊。該細(xì)胞塊具有以下優(yōu)點(diǎn)：細(xì)胞塊切片HE染色接近組織切片HE染色，利于觀察；可根據(jù)需要再行多次切片及長(zhǎng)期保存細(xì)胞塊；免疫組化染色效果與組織塊差異不明顯[1]，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信度高，并且可有針對(duì)性地滴加試劑，節(jié)約試劑用量；細(xì)胞塊原位雜交檢查定位準(zhǔn)確[2]；所需設(shè)備簡(jiǎn)單，操作容易?；诖耍覀冋J(rèn)為此方法值得推廣。如果加大離心管容量，取液量增加至50～100 ml，效果將會(huì)更佳。

[1]陳歷國(guó),丁顯平.粘附分子相關(guān)蛋白在漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)中的表達(dá)意義[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,16(11):1405-1408.

[2]蔣文化,吳毅林,文一智,等.細(xì)胞塊上檢測(cè)p16、HPV16用于篩查ASCUS中高度宮頸上皮內(nèi)瘤變的臨床探討[J].海南醫(yī)學(xué),2008, 19(9):15-17.

R329.2

B

1003—6350（2013）05—0737—01

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.05.0317

2012-09-21)

張世瓊。E-mail：cqflzsq@sina.com