褐毛鲿全人工繁殖技術(shù)研究

陳樸賢,曾志南

(福建省水產(chǎn)研究所,福建 廈門 361012)

褐毛鲿(Megalonibea fusca)屬石首魚科(Sciaenidea),毛鲿魚新屬(Megalonibea),是著名魚類學(xué)家朱元鼎教授等[1]命名的新種。為近海暖溫性底層大型魚類,成魚一般體質(zhì)量 30～50 kg,最大個(gè)體可達(dá)80～100 kg(圖1)。其鰾為極名貴的上等滋補(bǔ)品,浙江一帶歷史上每千克褐毛鲿魚鰾價(jià)格為 3～5萬(wàn)元,并流傳一句俗語(yǔ): “木橦充黃官”,褐毛鲿魚在溫州、舟山一帶俗稱“木橦”、“網(wǎng)橦”。“黃官”即黃唇魚,民間一個(gè)黃唇魚鰾售價(jià)數(shù)十萬(wàn)元,“ 橦木 ”能夠充“黃官”,可見其價(jià)值品位之高。在浙江沿海褐毛鲿之價(jià)值品位僅次于黃唇魚,具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

圖1 褐毛鲿Fig.1 Megalonibea fusca

褐毛鲿為中國(guó)極少數(shù)的大型魚類之一,自然海區(qū)資源十分稀少,近幾十年來(lái)已幾乎絕跡,是中國(guó)珍稀名貴的瀕危魚種。關(guān)于褐毛鲿的繁殖生物學(xué)、育苗生物學(xué)、養(yǎng)殖生物學(xué)等基礎(chǔ)生物學(xué)研究,人工繁育技術(shù)研究在國(guó)內(nèi)外均處于空白。1998年福建省水產(chǎn)研究所在寧德市進(jìn)榮水產(chǎn)開發(fā)有限公司育苗場(chǎng)開展褐毛鲿人工繁殖和育苗在國(guó)內(nèi)外首獲成功,自1998年5月4日～7月2日在室內(nèi)水泥池共培育出兩批變態(tài)完成的幼魚 6.667×105尾,其中第一批平均全長(zhǎng)分別為32.5 mm和37.5 mm的幼魚8.68×104尾于6月11日通過(guò)了福建省水產(chǎn)廳組織的專家組驗(yàn)收,第二批育苗自1998年6月2日～7月2日共培育出全長(zhǎng) 24.0 ～35.0 mm的變態(tài)幼魚 5.799×105尾[2]。項(xiàng)目實(shí)施期間,在國(guó)內(nèi)首次對(duì)褐毛鲿的生殖季節(jié)、產(chǎn)卵水溫、性成熟年齡、性腺發(fā)育與性周期,親魚的強(qiáng)化培育、促熟與催產(chǎn)、產(chǎn)卵類型與產(chǎn)卵量、親魚產(chǎn)卵率、 受精率,卵的生物學(xué)特性、受精卵孵化適宜的水溫與鹽度、孵化率,胚胎發(fā)育及仔稚幼魚形態(tài)發(fā)育,仔魚最適開口餌料及其餌料系列,生物餌料營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化對(duì)仔稚幼魚成活率的影響,仔稚幼魚生存發(fā)育適宜的水溫、鹽度,室內(nèi)人工育苗技術(shù),土池生態(tài)育苗技術(shù)都進(jìn)行了觀察、試驗(yàn)和研究,共培育出 24.0～180.0 mm的幼魚1.06×106尾,率先在國(guó)內(nèi)實(shí)現(xiàn)褐毛鲿全人工繁殖育苗,其總體研究水平在同類研究中居國(guó)內(nèi)領(lǐng)先地位[3]。褐毛鲿人工繁育的成功,為海水魚類養(yǎng)殖增添了名優(yōu)的新品種,福建、臺(tái)灣、廣東、海南、浙江、山東、江蘇都先后引進(jìn)養(yǎng)殖和育苗,目前褐毛鲿的養(yǎng)殖已形成年生產(chǎn)苗種上億尾,年養(yǎng)殖商品魚數(shù)萬(wàn)噸的產(chǎn)業(yè)規(guī)模。在廣大科技工作者的共同努力下,更多的研究也不斷地充實(shí)著褐毛鲿基礎(chǔ)生物學(xué)資料。有關(guān)褐毛鲿早期發(fā)育[4-5]、室內(nèi)人工育苗[6-8]、池塘養(yǎng)殖[9-10]試驗(yàn)研究都先后見諸報(bào)道,但褐毛鲿全人工繁殖技術(shù)研究仍未見到相關(guān)報(bào)道。作者整理了1998～2002年項(xiàng)目實(shí)施期間開展的褐毛鲿全人工繁殖技術(shù)研究資料,以期豐富充實(shí)褐毛鲿基礎(chǔ)生物學(xué)資料和為人工繁殖育苗提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)

1998年2～7月實(shí)驗(yàn)在寧德市進(jìn)榮水產(chǎn)開發(fā)有限公司育苗場(chǎng)進(jìn)行,1998年9月～2000年12月實(shí)驗(yàn)點(diǎn)設(shè)在廈門華普水產(chǎn)有限公司育苗場(chǎng),2002年1月～12月實(shí)驗(yàn)在詔安縣海洋水產(chǎn)育苗場(chǎng)開展。

1.2 親魚的來(lái)源

1998年5～6月開展褐毛鲿人工繁育試驗(yàn)的原種親魚購(gòu)自廣東電白縣水東港。

1998年11月本項(xiàng)目引種褐毛鲿原種親魚29尾,親魚采自廣東茂名、電白、陽(yáng)江、陽(yáng)西一帶沿海養(yǎng)殖網(wǎng)箱,其養(yǎng)殖的苗種來(lái)源系自然海區(qū)偶爾捕獲的零星天然苗種,數(shù)量極少。收集到的親魚用1 000多噸的鋼質(zhì)活水船經(jīng)60多小時(shí)的海上航行運(yùn)抵廈門杏林灣。1999年6月采用同樣的方法又從廣東引進(jìn)第二批親魚 23尾,兩批共獲得原種親魚 52尾,個(gè)體4.5～6.5 kg。

2002年試驗(yàn)用的親魚系1999年5月利用原種親魚繁育成功的第一世代幼魚,經(jīng)過(guò)3 a的培育達(dá)到性成熟的第一代子代親魚。

1.3 親魚的強(qiáng)化培育

1998、1999年引種的原種親魚運(yùn)回廈門后置于杏林灣海上網(wǎng)箱精養(yǎng),網(wǎng)箱規(guī)格6.6 m×3.3 m×3.0 m,網(wǎng)目為5～6 cm,親魚培育密度為0.5尾/ m3,親魚培育為周年都投喂冰鮮優(yōu)質(zhì)餌料藍(lán)園鲹(Decapterus maruadsi)、槍烏賊(Loligo chinensis)、扁鰹(Auxis tapeinosoma)、鳀魚(Engraulis japonicus)、金色小沙丁魚(Sardinella aurita)脂眼鯡(Etrumeus micropus)、玉筋魚(Ammodytes personatus )等,每天投喂一次,日投餌率 1.1%～3.5%魚體質(zhì)量。親魚越冬前的 10月～12月及翌年春季產(chǎn)卵前的 3月～4月進(jìn)行強(qiáng)化培育,日投餌兩次,每周添加 VE、VC和復(fù)合維生素B 1次。繁殖季節(jié)前每隔半個(gè)月檢查1次性腺的發(fā)育情況,并注射促熟激素 1～2次: 雌魚 LRH- A31.5 μg/kg,雄魚HCG150 IU/kg+LRH- A31.5 μg/kg,促進(jìn)性腺成熟。周年培育水溫范圍為12.8～31.2℃,鹽度為18～32。

子代親魚強(qiáng)化培育方法與原種親魚相似。

1.4 人工催產(chǎn)

1.4.1 催產(chǎn)季節(jié)與水溫

每年春季 4～6月和秋季 9～11月的生殖季節(jié),春季當(dāng)水溫上升到 23.0℃以上,秋季水溫下降到26.0℃以下時(shí),親魚的性腺一般與水溫同步已發(fā)育成熟,即可開始人工繁殖催產(chǎn)。

1.4.2 催產(chǎn)親魚的挑選

從海上網(wǎng)箱培育的 3齡以上性腺成熟親魚中,挑選出腹部膨大柔軟、卵細(xì)胞達(dá)到500～600 μm、性腺發(fā)育已達(dá)Ⅳ期末的雌魚和輕壓腹部即有較濃精液流出的雄魚用于催產(chǎn)。挑選催產(chǎn)親魚采取逐尾檢查,方法是將待選親魚一次撈出 2～3尾移入盛有25×10-6丁香酚水溶液的布簍中麻醉 5～6 min(劑量太高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致親魚死亡),麻醉后親魚用布夾子托住使腹部朝上,雌魚用取卵器從生殖孔徐徐伸入卵巢腔轉(zhuǎn)動(dòng)兩下采出卵粒,以肉眼觀察卵粒分離清楚且飽滿,或在顯微鏡下測(cè)量卵徑達(dá) 550～600 μm以上;雄魚輕壓腹部即有飽滿且濃白精液流出的個(gè)體用做催產(chǎn)親魚,雌雄比例1 : 1.2以上。挑選出的親魚移入室內(nèi)產(chǎn)卵池催產(chǎn)或直接在海上網(wǎng)箱中催產(chǎn)。

1.4.3 室內(nèi)產(chǎn)卵池催產(chǎn)

產(chǎn)卵池面積 30～36m2,水深 1.5～1.6 m,親魚密度控制在0.25尾/m3,親魚移入室內(nèi)休息1 d后再催產(chǎn)。親魚產(chǎn)卵時(shí)間一般在18: 00～22: 00,在水溫23.0～26.0℃條件下,產(chǎn)卵效應(yīng)時(shí)間 30～36 h,催產(chǎn)一般選擇在上午進(jìn)行以順應(yīng)其產(chǎn)卵節(jié)律。催產(chǎn)激素采用DOM＋LRH-A或HCG+LRH-A,親魚經(jīng)丁香酚麻醉后行背肌或胸腔一次性注射,雌雄同劑量,催產(chǎn)后親魚放入產(chǎn)卵池流水刺激 5～6 h,使其自然產(chǎn)卵受精?？刂扑疁卦?3.0～26.0℃,鹽度為29～32。1998年親魚催產(chǎn)在室內(nèi)產(chǎn)卵池進(jìn)行。

1.4.4 海上網(wǎng)箱催產(chǎn)

選擇小潮期間潮流平緩、水質(zhì)清澈的時(shí)間催產(chǎn)。挑選催產(chǎn)親魚或注射催產(chǎn)激素均在麻醉后進(jìn)行,以免親魚掙扎拍打受傷。親魚經(jīng)注射激素后,放入一個(gè)預(yù)備好的普通養(yǎng)殖網(wǎng)箱中,網(wǎng)箱規(guī)格為 3.3 m×3.3 m×3.0 m,或 6.6 m×3.3 m×3.0 m,網(wǎng)目 5～6 cm。第二天傍晚親魚產(chǎn)卵前加套一個(gè)同樣規(guī)格大小的產(chǎn)卵網(wǎng)箱(用 60目篩絹制成),使其自然產(chǎn)卵受精。親魚密度控制小規(guī)格網(wǎng)箱4尾,大規(guī)格網(wǎng)箱6尾。催產(chǎn)期間要求水溫為 23.0～26.0℃,鹽度為 29～32。1999年、2000年親魚催產(chǎn)在海上網(wǎng)箱進(jìn)行。

1.5 受精卵的收集

海上產(chǎn)卵網(wǎng)箱內(nèi)受精卵的收集方法是: 在親魚產(chǎn)完卵的第二天早晨將親魚撈出產(chǎn)卵網(wǎng)箱,然后用一根竹桿橫隔在產(chǎn)卵網(wǎng)箱下方,從一端向另一端慢慢移動(dòng),同時(shí)邊收起網(wǎng)衣邊沖洗網(wǎng)衣上黏附的卵粒,使受精卵最后集中到產(chǎn)卵網(wǎng)箱的另一端,再用撈網(wǎng)將卵收集干凈,收起的卵放入盛有 30～33鹽度海水的大盆中,旋轉(zhuǎn)沉淀分離出上浮卵和沉底的死卵,沖洗干凈后稱量浮卵數(shù)和死卵數(shù),計(jì)算浮卵率,取樣計(jì)算受精率。海水鹽度低于 28時(shí)先加鹽調(diào)整至30左右,因?yàn)槭芫言邴}度28以下為沉性不易分離。

2 結(jié)果

2.1 親魚培育

1999年繁殖試驗(yàn)用的原種親魚系1998年11月26日引種的第一批親魚,親魚在11月底～12月底和翌年2月中旬～4月中旬進(jìn)行強(qiáng)化培育,每天投喂優(yōu)質(zhì)餌料兩次,培育期間水溫為 12.8～22.4℃,投餌率為1.1%～2.5%,親魚在12月底至翌年2月中旬越冬期間水溫低于13.0℃不會(huì)攝食。2月下旬親魚開始恢復(fù)攝食,3月份食量逐漸增加, 3月2日用取卵器取卵檢查,雌魚卵細(xì)胞已發(fā)育到Ⅲ期,肉眼能看清卵粒,但卵粒黏連尚未分離,檢查后全部親魚行胸腔注射一針促熟激素LRH-A31.5 μg/kg魚體質(zhì)量。4月11日重新檢查親魚性腺,雌魚卵細(xì)胞 500～550 μg,性腺發(fā)育已達(dá)Ⅳ期,卵粒分散且飽滿,雄魚也能擠出少量精液,親魚性腺發(fā)育良好,4月下旬親魚性腺已基本成熟可以開始催產(chǎn)繁殖。經(jīng)過(guò) 5個(gè)月的精心培育,1999年4月23日生物學(xué)測(cè)定,親魚個(gè)體已達(dá)7.5～8.0 kg,月平均增質(zhì)量 400 g,親魚存活 29尾,成活率為100%。

2000年繁殖試驗(yàn)用的原種親魚系1998年11月引種的第一批親魚和 1999年 6月引種的第二批親魚。1999年10月由于遭受第14號(hào)強(qiáng)臺(tái)風(fēng)重創(chuàng),杏林灣內(nèi)絕大部分漁排損毀,網(wǎng)箱養(yǎng)殖遭受重大損失,褐毛鲿親魚兩個(gè)月沒有投喂餌料,越冬前的強(qiáng)化培育受到嚴(yán)重影響。親魚從翌年2月中旬至4月中旬才進(jìn)行強(qiáng)化培育,每天投喂優(yōu)質(zhì)的冰鮮雜魚兩次并添加VE、Vc、復(fù)合維生素B。原種親魚剩下39尾,其中雌魚14尾,雄魚25尾,個(gè)體11～13 kg。4月19日檢查性腺,雌魚卵細(xì)胞發(fā)育到Ⅳ期,雄魚性腺發(fā)育較差只有部分個(gè)體能擠出少量精液,親魚培育及性腺發(fā)育均較差。

2002年試驗(yàn)用的親魚系1999年5月利用原種親魚繁育成功的第一世代幼魚,經(jīng)過(guò)3 a的培育達(dá)到性成熟的第一代子代親魚,實(shí)現(xiàn)全人工繁育。觀察表明,褐毛鲿第一次性成熟為雌魚 3齡,雄魚 2齡即有20%～30%性成熟個(gè)體,3齡魚完全性成熟。親魚98尾自2001年10月初至12月底、2002年2月中旬～4月中旬進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化培育,每天投喂優(yōu)質(zhì)餌料兩次,每周添加VE、Vc、復(fù)合維生素B 1次。4月15日檢查親魚性腺,雌魚卵細(xì)胞 450～55 0μg,性腺發(fā)育已達(dá)到Ⅳ期,3齡雌魚性已成熟。雄魚70%～80%能擠出精液并且個(gè)別個(gè)體精液飽滿,親魚個(gè)體 6.5～8.0 kg。親魚經(jīng)精心培育性腺發(fā)育良好。

2.2 人工催產(chǎn)

1998年褐毛鲿人工繁育試驗(yàn)在寧德市進(jìn)榮水產(chǎn)開發(fā)有限公司育苗場(chǎng)進(jìn)行。親魚在繁殖季節(jié)到來(lái)之際從廣東用活水船經(jīng)海上90 h的航行于5月2日運(yùn)抵寧德三都灣,親魚 33尾(雌 14,雄 19),移入室內(nèi)后分置于兩口面積各為36 m2的產(chǎn)卵池。5月4日檢查親魚性腺,雌魚用取卵器采卵鏡檢,卵徑大部分在500～550 μm,卵粒分離性腺已達(dá)Ⅳ期,部分親魚有少量透明卵,卵徑為860 μm左右,卵已成熟說(shuō)明生殖季節(jié)已到。雄魚由于長(zhǎng)途運(yùn)輸原因性腺大部分退化擠不出精液。5月 4日挑選 4尾親魚(雌雄各2尾)注射激素 DOM5.0mg /kg +LRH-A35.0μg /kg進(jìn)行催產(chǎn),同日其余親魚(雌12尾,雄17尾)則注射一針促熟激素 LRH-A32.5 μg/kg,以促進(jìn)性腺成熟(DOM、LRH-A3均為寧波三生激素制品廠產(chǎn)品)。5月30日又從海上網(wǎng)箱移入親魚4尾(雌3尾,雄1尾),兩批親魚共37尾(雌17,雄20)。為探索和確立褐毛鲿適宜的產(chǎn)卵水溫和催產(chǎn)激素與劑量,自5月4日～6月1日在不同水溫、鹽度條件下,分別以不同激素組合與劑量試驗(yàn)催產(chǎn) 6批次。其中第一批親魚因促熟導(dǎo)致雌魚產(chǎn)卵7尾,剩下雌魚5尾于5月6日、10日、14日分3次催產(chǎn);5月30日移入的親魚4尾于5月30 日、6月1日分2次催產(chǎn)。共催產(chǎn)雌魚10尾,雄魚 22尾次,產(chǎn)卵水溫為 22.0～26.0℃,鹽度為 23～28,產(chǎn)卵效應(yīng)時(shí)間為 32～36 h,獲取受精卵1.578×107粒,平均受精率為 70.5%,1998年褐毛鲿室內(nèi)催產(chǎn)結(jié)果見表1。

表1 1998年褐毛鲿室內(nèi)催產(chǎn)結(jié)果Tab.1 The result of induced spawning of Megalonibea fusca indoor pond in1998

從表1可以看出: 褐毛鲿在水溫為22.0～26.0℃,鹽度為 23～28的條件下都能獲產(chǎn),催產(chǎn)產(chǎn)卵率在50%～100%。其中5月6日至6月1日水溫范圍為24.0～26.0℃,催產(chǎn)親魚 5批次,親魚產(chǎn)卵率均為100%,表明該溫度范圍是褐毛鲿最適宜的產(chǎn)卵水溫;同時(shí)段鹽度范圍為 23～28,親魚在該鹽度條件下產(chǎn)卵率也均為 100%,值得關(guān)注的是 5月 10日鹽度為23 ,親魚產(chǎn)卵受精率達(dá) 95.2%,說(shuō)明低鹽環(huán)境并不影響褐毛鲿產(chǎn)卵受精率,但受精卵在鹽度為23 時(shí)全部下沉底部,不利于受精卵孵化,受精卵在鹽度 28以上為浮性,因此認(rèn)為合適的產(chǎn)卵鹽度應(yīng)在 28以上。不同的激素組合與劑量催產(chǎn)試驗(yàn)表明: 褐毛鲿下丘腦-腦垂體-性腺軸靶器官受體對(duì)外源激素應(yīng)答反應(yīng)相當(dāng)敏感,當(dāng)以單一低劑量的 LRH-A32.5 μg/kg注射促熟時(shí),即會(huì)導(dǎo)致性腺較好的親魚流產(chǎn)且平均受精率低,當(dāng)混合激素中 LRH-A3劑量提高到 6～7 μg/kg時(shí),受精率明顯下降,當(dāng)DOM 以5.0 mg/kg的劑量催產(chǎn)會(huì)導(dǎo)致親魚死亡,而以 DOM3.5 mg/kg+LRH-A35.0 μg/kg催產(chǎn)效果最好,親魚產(chǎn)卵率達(dá)100%,受精率最高達(dá) 95.2%。因此褐毛鲿催產(chǎn)注射激素劑量應(yīng)盡量精確,親魚促熟時(shí)注意激素劑量不能偏高。5月4日1號(hào)池促熟親魚產(chǎn)卵全部不受精,可能是雄魚性腺退化的緣故。雌魚產(chǎn)卵時(shí)一般只有一尾雄魚追逐與之交配,如果雄魚性腺差不會(huì)發(fā)情追逐交配,雌魚產(chǎn)出的卵就全部不受精,造成極大損失,所以選取的催產(chǎn)雄魚應(yīng)精液飽滿,雌雄比例要在1 : 1.2以上。雄魚性腺發(fā)育一般都較差且比雌魚滯后,注射激素催產(chǎn)時(shí)應(yīng)雌雄同劑量。雄魚發(fā)情求偶時(shí)會(huì)發(fā)出雄渾洪亮的“咕、咕、咕”叫聲。

1999年人工催產(chǎn)在廈門杏林灣海上網(wǎng)箱進(jìn)行。催產(chǎn)一般選擇在小潮期間,挑選出的性腺成熟親魚經(jīng)注射催產(chǎn)激素后放入一個(gè)普通養(yǎng)殖網(wǎng)箱內(nèi),第二天傍晚前再加套一個(gè)同樣規(guī)格大小的產(chǎn)卵網(wǎng)箱,避免產(chǎn)卵網(wǎng)箱張掛時(shí)間過(guò)久網(wǎng)目堵塞,影響網(wǎng)箱內(nèi)外水流交換造成親魚環(huán)境緊迫和缺氧。1999年海上網(wǎng)箱催產(chǎn)結(jié)果表2。

表2 1999年褐毛鲿海上網(wǎng)箱催產(chǎn)結(jié)果Tab.2 The result of induced spawning of Megalonibea fusca in marine cage in1999

從表2可以看出,自4月23日～6月1日,水溫23.0～25.8℃,鹽度 25～28,共催產(chǎn) 6批次,催產(chǎn)激素均為 DOM3.5mg/kg +LRH-A34.5μg/kg(DOM、LRH-A3為寧波三生激素制品廠產(chǎn)品),催產(chǎn)雌魚 13尾,獲產(chǎn)13尾,產(chǎn)卵率為100%,受精率在81.3%～91.6%,親魚總產(chǎn)卵量為 2.448×107粒,平均每千克魚體質(zhì)量產(chǎn)卵2.64×105粒,獲取受精卵2.043×107粒,平均受精率為 83.5%,從親魚的產(chǎn)卵率和受精率可以說(shuō)明催產(chǎn)激素和劑量是合適的,在海上網(wǎng)箱催產(chǎn)的方法也是可行的。5月11日催產(chǎn)配制催產(chǎn)劑時(shí)因激素取錯(cuò)規(guī)格,A3的劑量增加4倍,致使死卵明顯增加受精率降低至56.5%,排除這一失誤因素,其他5次的平均受精率應(yīng)為88.9%。1999年海上網(wǎng)箱催產(chǎn)效果良好。

2000年催產(chǎn)工作仍在杏林灣海上網(wǎng)箱進(jìn)行。催產(chǎn)分兩個(gè)階段,第一階段4月19日～4月21日,產(chǎn)卵水溫20.4～21.8℃,鹽度22～25;第二階段5月14日～6月 21日,產(chǎn)卵水溫 25.8～27.0℃,鹽度 25～28。共催產(chǎn)9批次,催產(chǎn)雌魚38尾次,雄魚45尾次。2000年褐毛鲿海上網(wǎng)箱催產(chǎn)結(jié)果見表3。

表3 2000年褐毛鲿海上網(wǎng)箱催產(chǎn)結(jié)果Tab.3 The result of induced spawning of Megalonibea fusca in marine cage in 2000

從表3可以看出,4月19日～4月21日催產(chǎn)兩批次,催產(chǎn)激素與劑量為 DOM3.5mg/kg+LRHA24.5μg/kg(LRH-A2為上海麗珠生物制品公司產(chǎn)品),催產(chǎn)水溫 20.4～21.8℃,親魚產(chǎn)卵率為 25%～50%,產(chǎn)卵率低、產(chǎn)卵量少并且全部死卵,鑒于催產(chǎn)效果差可能是雄魚性腺不好及水溫偏低,催產(chǎn)工作暫停,親魚繼續(xù)精養(yǎng)和等待水溫回升。5月14日海區(qū)水溫上升至25.8℃時(shí)催產(chǎn)工作重新開始。但從5月14日～6月 21日連續(xù)幾次催產(chǎn)中,親魚屢次發(fā)生脹鰾、生殖孔外突難產(chǎn)死亡,產(chǎn)卵率低、卵胚胎每次發(fā)育到胚盤形成期就不能進(jìn)一步發(fā)育而全部死亡的不正?，F(xiàn)象,雖然催產(chǎn)過(guò)程不斷調(diào)整激素劑量,其中有5次催產(chǎn)激素劑量與 1999年催產(chǎn)劑量一樣,均為DOM3.5mg/kg+LRH-A24.5 μg/kg(1999年催產(chǎn)激素LRH-A3為寧波三生激素制品廠產(chǎn)品),且5月14日、5月16日、5月23日產(chǎn)卵水溫也都在正常范圍,但催產(chǎn)都沒獲得成功,有 7個(gè)批次催產(chǎn)獲產(chǎn)共產(chǎn)卵2.491×107粒,但全部死卵,整個(gè)催產(chǎn)過(guò)程沒有獲得受精卵,并發(fā)生親魚嚴(yán)重死亡,網(wǎng)箱催產(chǎn)親魚死亡現(xiàn)象均發(fā)生在水溫 26.0℃以上和親魚密度太高情況下。2005年催產(chǎn)失敗原因主要是親魚越冬前沒有強(qiáng)化培育,親魚性腺發(fā)育受到嚴(yán)重影響,但也不排除促黃體素釋放激素 LRH-A2產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題。

2002年實(shí)驗(yàn)在詔安縣海洋水產(chǎn)育苗場(chǎng)進(jìn)行。研究中發(fā)現(xiàn)褐毛鲿的性周期為周年中有兩次性腺成熟,生殖季節(jié)分別是春季的4～6月和秋季的9～11月。2002年分別開展了春季和秋季的繁殖試驗(yàn),結(jié)果表明: 春季6月催產(chǎn)結(jié)束后的親魚經(jīng)過(guò)強(qiáng)化培育,到秋季 9月下旬親魚性腺第二次成熟,雌魚卵細(xì)胞重新發(fā)育到Ⅳ期,雄魚性腺也發(fā)育成熟大部分能擠出精液,且精液飽滿,進(jìn)入了秋季的生殖產(chǎn)卵季節(jié)。

秋季繁殖試驗(yàn)分海上網(wǎng)箱催產(chǎn)和室內(nèi)催產(chǎn)兩種方法。海上網(wǎng)箱催產(chǎn)6批次,催產(chǎn)雌魚18尾,雄魚23尾。其中 9月 22～30日催產(chǎn) 4批次,注射激素HCG250IU/kg＋ LHRH-A24.5μg/kg,水溫26.7～27.5℃,親魚仍發(fā)生脹鰾難產(chǎn)死亡,無(wú)產(chǎn)現(xiàn)象,主要原因是水溫太高。9月30日～10月2日水溫25.3～26.5℃,催產(chǎn)兩批次激素HCG250IU/kg＋LHRH-A34.5μg/kg 獲產(chǎn),獲取受精卵 4.7×106粒,產(chǎn)卵率71%,受精率85.7%～96.6%。10月4日挑取親魚18尾(雌6雄12)移入詔安實(shí)驗(yàn)點(diǎn)室內(nèi)產(chǎn)卵池催產(chǎn),產(chǎn)卵池面積30m2,水深1.6 m。 10月5日注射催產(chǎn)激素 HCG270IU/kg+ LHRH-A35.0 μg/kg,水溫26.5℃,鹽度32,效應(yīng)時(shí)間28 h,共產(chǎn)受精卵8.1×106粒,產(chǎn)卵率100%,受精率92%。

3 討論

3.1 褐毛鲿的繁殖生物學(xué)

1998～2002年的實(shí)驗(yàn)和觀察表明,褐毛鲿第一次性成熟為雌魚3齡,雄魚2齡即有20%～30%性成熟個(gè)體,3齡魚完全性成熟。最小性成熟體質(zhì)量6～7 kg。性周期為周年中有二次性成熟,生殖季節(jié)分別為春季的 4月下旬～6月中旬、秋季的 9月下旬～11月中旬,產(chǎn)卵盛期分別為 5月和 10月。產(chǎn)卵水溫23.0～26.5℃,盛產(chǎn)水溫在 25.0℃左右,適宜產(chǎn)卵鹽度 29～32。褐毛鲿為分次產(chǎn)卵類型,在一個(gè)生殖季節(jié)里可以產(chǎn)卵 1～3次,總產(chǎn)卵量為 5.0×105～6.0×105粒/kg魚體質(zhì)量, 第一次產(chǎn)卵量為每千克魚體質(zhì)量 2.65×105粒左右,兩次產(chǎn)卵時(shí)間間隔在 10～15 d。在生殖季節(jié)里雄魚發(fā)情求偶時(shí)會(huì)發(fā)出雄渾洪亮的“咕、咕、咕”叫聲。

3.2 親魚的強(qiáng)化培育

餌料營(yíng)養(yǎng)對(duì)親魚的性腺發(fā)育有著極為密切的關(guān)系。親魚在每年 12月底至翌年 2月中旬水溫低于13.0℃的越冬期間不會(huì)攝食,2月下旬水溫上升至13.0℃以上時(shí)才恢復(fù)攝食并逐漸增加食量。而3月初雌魚的卵母細(xì)胞已發(fā)育到Ⅲ期,整個(gè)越冬期間正處于親魚性腺?gòu)蘑蚱诎l(fā)育到Ⅲ期的大生長(zhǎng)期卵黃蓄積階段,需要體內(nèi)蓄積大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)換到性腺發(fā)育上去。顯然親魚如果在越冬前沒有進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化培育,越冬期間性腺發(fā)育就沒有營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,性腺發(fā)育就會(huì)受到影響。2000年人工催產(chǎn)失敗的原因正是親魚越冬前沒有強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng),而是到 2月中旬才開始強(qiáng)化培育,親魚的性腺發(fā)育受到影響,性腺成熟度差,特別是雄魚到 5月中旬性腺還不太好,從而影響親魚產(chǎn)卵交配導(dǎo)致產(chǎn)出的卵子全部無(wú)受精。多年的繁殖經(jīng)驗(yàn)表明: 褐毛鲿親魚必須在越冬前進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和周年培育中投喂優(yōu)質(zhì)餌料,并適當(dāng)加入營(yíng)養(yǎng)添加劑 VE、VC、復(fù)合維生素 B,以提高親魚的生殖性能。

3.3 催產(chǎn)方法

選擇采用海上網(wǎng)箱催產(chǎn)方法主要是考慮親魚體型大,在移入室內(nèi)的裝載運(yùn)輸過(guò)程中極易受傷并感染,造成性腺退化,從而影響正常產(chǎn)卵,并且海上網(wǎng)箱產(chǎn)卵后的親魚可以立即恢復(fù)攝食,對(duì)于分次產(chǎn)卵類型的魚類來(lái)講,生殖期間得到營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充顯然對(duì)其性腺的發(fā)育和下一次的產(chǎn)卵較為有利。但不利的因素也顯而易見。首先海上網(wǎng)箱催產(chǎn)受天氣、潮汐的變化影響大,水溫、鹽度變化較劇烈,同時(shí)要選擇小潮期間潮流較平緩、水質(zhì)較清澈的時(shí)間催產(chǎn),生產(chǎn)受到一定的限制。而且產(chǎn)卵箱網(wǎng)目容易堵塞,影響箱內(nèi)外水流交換,在水溫高于26.0℃,親魚密度較高情況下,經(jīng)常發(fā)生由于親魚對(duì)環(huán)境緊迫的不適而產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng),導(dǎo)致脹鰾難產(chǎn)死亡、不產(chǎn)和雄魚不交配的現(xiàn)象?？偨Y(jié)多年來(lái)褐毛鲿的催產(chǎn)經(jīng)驗(yàn): (1)褐毛鲿的催產(chǎn)最好在室內(nèi)進(jìn)行,室內(nèi)催產(chǎn)池水質(zhì)穩(wěn)定,環(huán)境適宜,親魚產(chǎn)卵率、受精率較高,較少發(fā)生催產(chǎn)死亡現(xiàn)象,親魚產(chǎn)卵后應(yīng)及時(shí)移回海上網(wǎng)箱精養(yǎng);(2)催產(chǎn)時(shí)間應(yīng)選擇產(chǎn)卵盛期的 5月和 10月,催產(chǎn)水溫應(yīng)在23.0～26.0℃,最適催產(chǎn)水溫在 25.0℃;(3)親魚應(yīng)選擇3齡以上,體質(zhì)量在8 ～15 kg為佳,雄魚應(yīng)選擇性腺發(fā)育良好,輕壓腹部即有精液流出且飽滿的個(gè)體,雌: 雄比例要在1 : 1.2以上;(4)水溫超過(guò)26.0℃不宜在海上網(wǎng)箱催產(chǎn),因?yàn)槿菀自斐捎H魚脹鰾難產(chǎn)死亡,這已屢試不爽;(5)網(wǎng)箱催產(chǎn)親魚密度不能太高,規(guī)格3.3 m×3.3 m×3.0 m的產(chǎn)卵網(wǎng)箱只能放親魚4尾;規(guī)格6.6 m×3.3 m×3.0 m的產(chǎn)卵網(wǎng)箱不能超過(guò)6尾,以免造成環(huán)境緊迫而產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)。

3.4 激素與劑量

褐毛鲿在人工圈養(yǎng)條件下不會(huì)自然產(chǎn)卵,只能在外源激素作用下才發(fā)會(huì)發(fā)生產(chǎn)卵交配行為。褐毛鲿對(duì)外源激素作用敏感,當(dāng)以單一低劑量的LRH-A32.5 μg/kg注射促熟時(shí),即會(huì)導(dǎo)致性腺較好的親魚流產(chǎn)且受精率低,因此親魚促熟時(shí)應(yīng)注意激素劑量不能偏高;當(dāng)混和激素中 LRH-A3劑量提高到 6～7 μg/kg時(shí),受精率明顯下降;而DOM5.0 mg/kg的劑量會(huì)導(dǎo)致親魚死亡。因此催產(chǎn)注射激素劑量應(yīng)盡量精確。多年催產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)表明: 褐毛鲿催產(chǎn)激素與劑量以DOM3.5mg/kg+LRH-A34.5 μg/kg,或 HCG 250IU/kg+LRH-A34.5 μg/kg混合使用效果最好(DOM、HCG、LRH-A3均為寧波三生激素制品廠產(chǎn)品)、親魚產(chǎn)卵率可達(dá)100%,受精率最高達(dá)98.8%。

3.5 褐毛鲿的全人工繁殖與資源恢復(fù)

褐毛鲿自然資源十分稀少,獲取原種親魚極其困難。本項(xiàng)目 1998年首批繁育成功的種苗經(jīng)過(guò) 3a的培育達(dá)到性成熟,成為子1代親魚,2001年實(shí)現(xiàn)全人工繁殖育苗,突破了親魚來(lái)源極其困難的瓶頸,為大規(guī)模的人工繁育奠定了最重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。從2001～2012年,中國(guó)南方的福建、廣東、海南各省沿海育苗場(chǎng)便先后利用本課題繁殖的子 1代、子 2代、子3代、子4代親魚開展褐毛鲿大規(guī)模人工繁育,以池塘生態(tài)育苗為主要模式,每年生產(chǎn)的褐毛鲿種苗上億尾,年養(yǎng)殖商品魚數(shù)萬(wàn)噸,形成產(chǎn)業(yè)化規(guī)模。褐毛鲿全人工繁殖育苗的實(shí)現(xiàn),使這一珍稀名貴的瀕危魚種資源得以恢復(fù),還創(chuàng)造了極大的經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。

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