CYP11B2基因多態(tài)性與缺血性腦卒中關聯(lián)性的Meta分析

林慧中，林 濤，陳 慧

（1.福建醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院心內(nèi)科，福建 福州 350004；2.福建醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學系，福建 福州 350004；3.福建省立醫(yī)院心內(nèi)科，福建 福州 350003）

CYP11B2基因多態(tài)性與缺血性腦卒中關聯(lián)性的Meta分析

林慧中1，林 濤2，陳 慧3

（1.福建醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院心內(nèi)科，福建 福州 350004；2.福建醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學系，福建 福州 350004；3.福建省立醫(yī)院心內(nèi)科，福建 福州 350003）

目的：對醛固酮合成酶基因CYP11B2的（－344C／T）基因位點多態(tài)性與缺血性腦卒中（IS）的關聯(lián)性進行Meta分析，為IS的治療提供依據(jù)。方法：聯(lián)合檢索1990－2012年中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫、維普中文期刊數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、PubMed和Cochrane Collaboration Database電子數(shù)據(jù)庫。采用RevMan 5.0軟件對納入文獻進行Meta分析，并進一步進行異質(zhì)性檢驗、敏感性分析和偏倚評估。結果：共納入6篇相關文獻。IS組與對照組TT／（TT＋CC）合并OR（95%CI）值為1.51（1.06，2.16，P＜0.05）。大動脈粥樣硬化性腦卒中（LAA）組與對照組 TT／（TT＋CC）合并OR（95%CI）值為1.85（1.11，3.08，P＜0.05）；多發(fā)腔隙性腦卒中或小動脈閉塞性腦卒中（MLI）組與對照組TT／（TT＋CC）合并OR（95%CI）值為2.46（1.21，4.99，P＜0.05）。結論：CYP11B2基因TT基因型與IS有關聯(lián)性，TT基因型與LAA和 MLI亦有關聯(lián)性，提示CYP11B2基因可能為IS的遺傳候選基因。

醛固酮合成酶；缺血性腦卒中；基因多態(tài)性；Meta分析

醛固酮合成酶基因（CYP11B2基因）編碼的醛固酮合酶是醛固酮合成的關鍵酶，在高血壓、心力衰竭和心腦血管疾病發(fā)生發(fā)展中起著十分重要的作用。近年來國內(nèi)外關于CYP11B2（－344C／T）基因多態(tài)性與缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS）關系的研究較多，但結論不一。Saidi等［1］和 Munshi等［2］研究顯示：CYP11B2基因的TT基因型與IS有關聯(lián)性，而Brenner等［3］的研究結果則顯示其無關聯(lián)。Tu等［4］的研究顯示相反的結果。本研究應用Meta分析方法，對已發(fā)表的CYP11B2（－344C／T）基因位點多態(tài)性與IS關聯(lián)性的病例對照研究進行系統(tǒng)綜述，旨在定量評價二者之間的關系，提供一定的循證醫(yī)學證據(jù)。

1 資料與方法

1.1 文獻來源 聯(lián)合檢索1990－2012年中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫、維普中文期刊數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、PubMed和Cochrane Collaboration Database電子數(shù)據(jù)庫，以“CYP11B2、基因多態(tài)性、醛固酮合成酶、腦梗死、 缺 血 性 腦 卒 中、stroke、ischemic cerebrovascular disease、cerebral infarction”為檢索詞在文獻題名、摘要和關鍵詞中檢索符合要求的文獻。末次檢索時間為2012年9月15日。

1.2 文獻納入和剔除標準 納入標準：①研究類型均為病例對照研究；②對照組與病例組研究對象的人口學特征相似；③病例組患者均行頭顱CT或MRI確診；④根據(jù)1993年TOAST診斷標準［5］，對IS進行病因學分型：大動脈粥樣硬化性腦卒中（1arge－artery atherosclerosis，LAA）、心源性腦栓塞（cardioembolism，CE）、多發(fā)腔隙性腦卒中或小動脈閉塞性腦卒中（multiple lacunar infarctions，MLI）、 其 他 原 因 腦 卒 中 （stroke of other determined etiology，SOD）和不明原因性腦卒中（stroke of undetermined etiology，SUD）； ⑤ 有OR值或通過數(shù)據(jù)可以計算出OR值；⑥文中報告數(shù)據(jù)完整或根據(jù)報告結果能推算出分析所需要的數(shù)據(jù)。剔除標準：①對于重復發(fā)表、重復收錄的同一樣本人群的文獻，只選擇其中數(shù)據(jù)最完整、質(zhì)量最好的1篇；②數(shù)據(jù)不完整的文獻。

1.3 文獻質(zhì)量評價 病例組IS患者病例診斷明確，對照組研究對象為非腦血管疾病的住院病例或健康人群，且基因型分布符合Hardy－Weinberg遺傳平衡定律。

1.4 敏感性分析 選用不同的效應模型、剔除異質(zhì)性的文獻等從不同角度進行敏感性分析。

1.5 統(tǒng)計學分析 對各研究的基因型分布進行Hardy－Weinberg遺傳平衡檢驗。采用 Meta分析軟件包RevMan 5.0進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以OR和95%CI表示，設α＝0.05。同時采用I2定量分析異質(zhì)性大小，其檢驗水準設為α＝0.05，即如果I2＜50時，認為各研究結果之間無顯著異質(zhì)性，采用固定效應模型（FEM）的Peto法進行定量合并分析；當I2≥50時認為研究結果間存在顯著異質(zhì)性，采用基于隨機效應模型（REM）的Inverse Variance（IV）法進行合并分析。采用RevMan 5.0統(tǒng)計軟件繪制漏斗圖，若漏斗圖不對稱，計算失安全系數(shù)以評估發(fā)表偏倚。

2 結 果

2.1 納入文獻 檢索到有關CYP11B2基因多態(tài)性與IS關聯(lián)性的文獻共13篇，通過閱讀題目、摘要和全文，根據(jù)本研究文獻的納入及排除標準，進一步對文章質(zhì)量進行篩選，剔除文獻如下：同一研究重復發(fā)表文獻3篇，研究對象為高血壓并發(fā)IS患者文獻2篇，樣本量過少（病例組42例）且研究對象亦為高血壓并發(fā)IS文獻1篇，對照組研究對象基因頻數(shù)分布不符合Hardy－Weinberg遺傳平衡定律文獻1篇。共剔除7篇文獻。本研究最終納入CYP11B2基因多態(tài)性與IS關聯(lián)性的病例對照研究共6篇［1－4，6－7］，其中2篇文獻不僅研究IS，而且進一步研究了IS的各種亞型，2篇文獻只研究IS（其中1篇包括2個獨立的研究），1篇文獻只研究LAA，1篇文獻只研究MLI。關于CYP11B2基因多態(tài)性與IS關聯(lián)性的文獻有4篇（共5個研究）［1－4］，關于 CYP11B2基因多態(tài)性與 LAA 關聯(lián)性的文獻有3篇［1－2，6］，關于 CYP11B2基因多態(tài)性與 MLI的關聯(lián)性的文獻有3篇［1－2，7］，其他亞型（如SOD、SUD等）因相關文獻太少，本研究未予進一步分析。納入的6篇文獻（共7個研究）基本情況見表1。IS及其亞型與對照組CYP11B2（－344C／T）基因型分布情況見表2～4。并對其進行Hardy－Weinberg遺傳平衡檢驗，結果顯示均符合遺傳平衡定律（P＞0.05）。

2.2 異質(zhì)性檢驗 IS與CYP11B2基因關聯(lián)性：TT／（TT＋CC）基因型頻數(shù)的OR值Q檢驗統(tǒng)計量為75.45，P＜0.01，I2＝91%，各研究存在異質(zhì)性，故采用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)合并。LAA與CYP11B2基因關聯(lián)性：TT／（TT＋CC）基因型頻數(shù)的OR值Q 檢驗統(tǒng)計量為8，P＜0.05，I2＝75%，各研究存在異質(zhì)性，故采用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)合并。MLI與CYP11B2基因關聯(lián)性：TT／（TT＋CC）基因型頻數(shù)的OR值Q檢驗統(tǒng)計量為11.39，P＜0.01，I2＝82%，各研究存在異質(zhì)性，故采用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)合并。

表1 納入文獻基本特征Tab.1 General characteristics of included literatures

表2 IS組與對照組研究對象CYP11B2基因型和等位基因頻數(shù)分布Tab.2 Distribution of genotypic and allelic frequencies of CYP11B2gene in subjects in IS and control groups

2.3 CYP11B2基因多態(tài)性與IS的關聯(lián)性 IS與CYP11B2基因關聯(lián)性分析：IS組與對照組TT／（TT＋CC）OR 值 （95%CI）為1.51 （1.06，2.16），Z＝2.28，P＜0.05。表明攜帶TT基因型與IS有關聯(lián)。IS亞組與CYP11B2基因關聯(lián)性分析：LAA組與對照組TT／（TT＋CC）合并OR值 （95%CI）為1.85 （1.11，3.08），Z＝2.36，P＜0.05；MLI組與對照組TT／（TT＋CC）OR值 （95%CI）為2.46 （1.21，4.99），Z＝2.49，P＝0.01。表明攜帶TT基因型與LAA和MLI有顯著關聯(lián)。見圖1～3。

表3 LAA組與對照組研究對象CYP11B2基因型和等位基因頻數(shù)分布Tab.3 Distribution of genotypic and allelic frequencies of CYP11B2gene in subjects in LAA and control groups

表4 MLI與對照組研究對象CYP11B2基因型和等位基因頻數(shù)分布Tab.4 Distribution of genotypic and allelic frequencies of CYP11B2gene in subjects in MLI and control groups

圖1 CYP11B2基因TT／（TC＋CC）基因型與IS關聯(lián)性的Meta分析Fig.1 Meta－analysis on the relationship between CYP11B2gene TT／（TT＋CC）genotype and IS

圖2 CYP11B2基因TT／（TC＋CC）基因型與LAA關聯(lián)性的Meta分析Fig.2 Meta－analysis on the relationship between CYP11B2gene TT／（TT＋CC）genotype and LAA

圖3 CYP11B2基因TT／（TC＋CC）基因型與MLI關聯(lián)性的Meta分析Fig.3 Meta－analysis on the relationship between CYP11B2gene TT／（TT＋CC）genotype and MLI

2.4 發(fā)表偏倚與敏感性分析 對IS組CYP11B2基因TT基因型與IS有關聯(lián)性這一結果進行發(fā)表偏倚和敏感性分析，繪制漏斗圖 （圖4），漏斗圖的分布不對稱，進一步計算P＝0.05時的失安全系數(shù) （Nfs0.05） ［Nfs0.05＝ （∑Z／1.64）2－K］以評估發(fā)表偏倚。經(jīng)計算，IS組的失安全系數(shù)為61（超過納入文獻篇數(shù)的10倍），說明發(fā)表偏倚較小。改變模型，采用固定效應模型進行Meta分析，合并 OR （95%CI）值為 1.38 （1.23，1.56），P＜0.000 01；去掉權重最大的1篇文獻［4］后，重新進行Meta分析，合并OR（95%CI）值為1.68 （1.11，2.55），P＜0.05；Brenner等［3］的研究中對照組研究對象為住院患者，其他研究的對照組研究對象基本上均為健康人群，去掉該篇文獻后，重新進行 Meta分析，合并OR （95%CI）值為1.68 （1.11，2.55），P＜0.05。經(jīng)敏感性分析，未改變之前的結論，說明結果穩(wěn)定性較好。

3 討 論

IS是各種原因引起的腦部血液供應障礙，使局部腦組織發(fā)生不可逆性的損害，導致腦組織缺血、缺氧性壞死。LAA是腦大動脈粥樣硬化基礎上發(fā)生的腦梗死；MLI是在高血壓、動脈硬化的基礎上，腦深部的微小動脈發(fā)生閉塞。LAA和MLI是IS的2個常見亞型。CYP11B2基因的－344T／C突變位于CYP11B2基因類固醇生成轉錄因子1 （SF－1）結合區(qū)，該變異影響醛固酮（ALD）的合成分泌。ALD的過度分泌可使體內(nèi)水、電解質(zhì)平衡失調(diào)，水、鈉潴留，血容量增加，內(nèi)皮功能障礙，使血管平滑肌肥大、增殖，管壁增厚。Balkestein 等［8］研究發(fā)現(xiàn)：攜帶 CYP11B2－344T等位基因和ACE基因D等位基因與人群的大動脈內(nèi)膜中層厚度相關。Sharma等［9］相關分析顯示：CYP11B2基因多態(tài)性與動脈粥樣斑塊有關，Oberleithner等［10－11］研究顯示：CYP11B2基因 TT型可導致小動脈彈性指數(shù) （C2）減退，可能與TT型者有較高的ALD合成酶活性有關。另外一些研究［12－14］也顯示：CYP11B2基因與血漿 ALD水平和血壓水平有關聯(lián)：TT和CT基因型者的血漿ALD水平高于CC基因型者；TT基因型或攜帶T等位基因者血漿ALD水平及 （或）血壓水平增高。一項Meta分析［15］顯示：攜帶C等位基因的人患高血壓的風險低于攜帶TT等位基因的人。這些研究表明：CYP11B2基因－344T／C多態(tài)性通過影響ALD的合成分泌，從而在血壓、動脈彈性和粥樣斑塊等方面產(chǎn)生影響，導致IS的發(fā)生。

本研究應用Meta分析方法，采用TT／（CC＋CT）比較模型對收集的病例對照研究結果進行分析，得出陽性結果：IS組與對照組TT／（TT＋CC）的合并 OR 值 （95%CI）為1.51 （1.06，2.16）；LAA組與對照組TT／（TT＋CC）的合并OR值 （95%CI）為1.85 （1.11，3.08）；MLI組與對照組TT／（TT＋CC）的合并OR值（95%CI）為2.46 （1.21，4.99），差異均有統(tǒng)計學意義。CYP11B2基因多態(tài)性與IS有關聯(lián)，IS亞組分析顯示：CYP11B2基因TT基因型與LAA和MLI的發(fā)生亦存在關聯(lián)性，且似乎關聯(lián)性更密切。本研究結果顯示：CYP11B2基因－344T／C多態(tài)性TT基因型可能為IS的危險因素。本研究為IS與CYP11B2基因－344T／C多態(tài)性的關聯(lián)性研究提供了客觀的循證醫(yī)學證據(jù)。

本研究納入的文獻存在異質(zhì)性，分析可能的來源：①入選的病例的基線水平存在一定的差別 （如種族、年齡、對照人群的選擇和匹配等）；②樣本量的差異；③入選病例的排除標準有差異。對IS組的Meta分析結果進行敏感性分析，采用固定效應模型，去除樣本量大的研究及對照組非健康人群的研究后，未改變之前的結果。進一步對IS的2個主要亞型 （LAA和MLI）進行亞組分析，亦得出陽性結果，說明結果的穩(wěn)定性較好。

本研究亦存在一定的局限性：①目前國內(nèi)外關于CYP11B2基因多態(tài)性與IS的研究較少，故限制了樣本量，這在一定程度上對結果有影響，尤其是在亞組分析時，入選的文獻篇數(shù)不多，可能更容易得出陽性的結果；②本研究包括了不同種族，但由于種族遺傳背景的差異，故也對結果有所影響；③本研究只檢索了以中文和英文發(fā)表的文獻，對于以其他語言發(fā)表的文獻未涵蓋。

IS是遺傳因素與環(huán)境因素共同作用的復雜性疾病，因此IS的遺傳學研究必須重視遺傳因素與環(huán)境因素的交互作用。未來仍需更多設計合理的大樣本研究，進一步明確兩者之間的關聯(lián)性。

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Association between CYP11B2gene polymorphisms and ischemic stroke：a Meta－analysis

LIN Hui－zhong1，LIN Tao2，CHEN Hui3
（1.Department of Cardiovascular Medicine，Union Hospital，F(xiàn)ujian Medical University，F(xiàn)uzhou 350004，China；2.Department of Epidemiology and Health Statistics，School of Public Health，F(xiàn)ujian University，F(xiàn)uzhou 350004，China；3.Department of Cardiovascular Medicine，F(xiàn)ujian Provincial Hospital，F(xiàn)uzhou 350003，China）

Objective To investigate the association between aldosterone synthase CYP11B2 （－344C／T）gene polymorphism and ischemic stroke （IS）by Meta－analysis and to provide evidence for the treatment of IS.Methods Case－control studies on the association between CYP11B2gene polymorphism and IS from 1990to 2012 were collected from China national knowledge internet，Chinese biological medicine disk，Vip fulltext database，Wanfang fulltext database，PubMed and Cochrane Collaboration Database.Meta－analysis was carried out after strict screening.Heterogeneity test，sensitivity analysis and publication bias assessment were also performed.Results A total of 6studies were included.In IS group，the pooled OR（95%CI）of TT／（TT＋CC）genotype was 1.51（1.06，2.16，P＜0.05）.In large artery atherosclerotic stroke LAA group，the pooled OR（95%CI）of TT／（TT＋ CC）genotype was 1.85（1.11，3.08，P＜0.05）.In multiple lacunar stroke（MLI）group，the pooled OR（95%CI）of TT／（TT＋ CC）genotype was 2.46（1.21，4.99，P＜0.05）.Conclusion The TT genotype of CYP11B2gene is associated with IS，and TT genotype is also associated with LAA and MLI，which indicats that CYP11B2gene is possiblely the candidate gene of IS.

CYP11B2；ischemic stroke；gene polymorphism；Meta－analysis

R734.3

A

1671－587Ⅹ（2013）03－0578－06

10.7694／jldxyxb20130332

2012－10－21

福建省自然科學基金重點項目資助課題 （C0420003）

林慧中 （1981－），女，福建省福州市人，醫(yī)師，醫(yī)學碩士，主要從事心腦血管病的基礎、臨床和循證醫(yī)學的研究。

陳 慧 （Tel：0591－87557768，E－mail：chen.hui＠m(xù)edmail.com.cn）