標(biāo)本溶血對常規(guī)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

張勇軍，郭越文（新疆維吾爾自治區(qū)哈密地區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 839000）

標(biāo)本溶血是由于采血不當(dāng)、檢驗(yàn)過程未按正規(guī)操作要求進(jìn)行等原因而造成的紅細(xì)胞破壞，血細(xì)胞一些物質(zhì)進(jìn)入血清致樣品出現(xiàn)特有的紅色的現(xiàn)象[1－2]；而溶血又是一種常見的、可干擾和影響臨床生化檢驗(yàn)的因素。紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板等血細(xì)胞的破壞會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)某些細(xì)胞成分釋放，這些成分在細(xì)胞內(nèi)濃度如果與血漿不同，其逸出將會影響血漿中該成分的濃度，使測定結(jié)果發(fā)生改變[3]。本文結(jié)合有關(guān)溶血對部分臨床生化檢驗(yàn)指標(biāo)測定結(jié)果的影響，分析標(biāo)本溶血原因并提出相應(yīng)對策。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本 正?；旌涎?00mL，由100例健康體檢者的血清混合而成。

1.2 儀器與試劑 日立7080全自動生化分析儀。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒，批號0312071；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒，批號0312071；總膽固醇（TC）試劑盒，批號0412071；三酰甘油（TG）試劑盒，批號0312071；尿酸（UA）試劑盒，批號0312071；葡萄糖（GLU）測定（GOD法）試劑盒，批號0212061；肌酐（Cr）（酶法）試劑盒，批號0312171；總膽紅素（TBIL）試劑盒，批號 0412141；總蛋白（TP）試劑盒，批號0312071；清蛋白（ALB）試劑盒，批號0412081；尿素（UREA）試劑盒，批號0312191。以上試劑均由四川省新成生物科技有限責(zé)任公司提供。

1.3 方法

1.3.1 嚴(yán)格按照試劑盒說明書在日立7080全自動生化分析儀上設(shè)定各檢測項目的參數(shù)。

1.3.2 清晨分別抽取100例體檢者空腹血5mL，分別置于2支試管中，每支2.5mL，其中1支采取室溫自然分離，30min后以1 200r/min離心10min，分離血清，取1mL血清作為正常血清備用，標(biāo)識為對照組；另1支試管中的標(biāo)本采用人工方法使其溶血，然后以相同條件離心，分離溶血血清1mL備用，標(biāo)識為溶血組。

1.3.3 采用日立7080全自動生化分析儀，四川省新成生物試劑測定血清中ALT、AST、TC、TG、Cr、UREA、GLU、UA等11項指標(biāo)水平，操作方法和步驟均按試劑盒說明書規(guī)定執(zhí)行，每份正常血清和溶血血清共進(jìn)行10次測定，取均值，分別計算100例標(biāo)本各指標(biāo)的測定均值，得到正常標(biāo)本的測定均值及溶血標(biāo)本的測定均值，并對測定結(jié)果進(jìn)行對比觀察。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

溶血組和對照組樣本生化檢驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 兩組11項生化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

表1 兩組11項生化指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

項目 AST（U/L）ALT（U/L）TBIL（μmol/L）UA（mmol/L）UREA（mmol/L）Cr（μmol/L）TC（mmol/L）TG（mmol/L）ALB（g/L）TP（g/L）GLU（mmol/L）對照組 33.50±18.36 30.48±17.59 12.77±3.43 289.31±80.60 5.24±0.54 76.03±15.02 4.82±0.57 1.54±0.12 39.16±3.21 77.00±2.84 4.89±1.06溶血組 41.21±22.27 37.42±18.23 10.34±2.46 292.17±81.29 5.13±0.39 62.22±15.71 4.27±0.19 1.19±0.16 42.66±3.34 83.54±3.17 4.01±0.78升降（%） 23.01 22.77 19.03 0.99 2.10 18.16 12.32 22.73 8.94 8.49 18.00 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 討 論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性在診療中的作用越來越重要，而多數(shù)診療的決定是根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果作出的。隨著各類先進(jìn)自動化儀器的廣泛使用以及高質(zhì)量試劑盒的應(yīng)用、檢驗(yàn)人員素質(zhì)的普遍提高、檢驗(yàn)科質(zhì)控工作的不斷完善，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性得到了不斷提高；但生化檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性受諸多因素影響，實(shí)驗(yàn)前的誤差占70%[4－5]。在基層檢驗(yàn)工作中，由于采血不當(dāng)、試管不潔、檢驗(yàn)過程中未按操作規(guī)范進(jìn)行操作等原因，均可引起不同程度的標(biāo)本溶血，而標(biāo)本溶血又成為日常檢驗(yàn)工作中最常見的影響生化檢驗(yàn)結(jié)果的原因。除此之外，反應(yīng)時間和溫度也可影響臨床生化檢驗(yàn)指標(biāo)的測定[6]。由表1可以看出，11項生化檢驗(yàn)中，溶血后AST、ALT、ALB以及TP較溶血前均有顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），分別升高23.01%、22.77%、8.94%和8.49%；溶血后TBIL、Cr、TC、TG及GLU較溶血前均有明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），分別降低19.03%、18.16%、12.32%、22.73%以及18.00%；UA、UREA溶血前后比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。數(shù)據(jù)結(jié)果表明，樣本溶血幾乎對所有生化檢驗(yàn)結(jié)果均有影響。而臨床標(biāo)本溶血對生化檢驗(yàn)有影響的因素主要有以下幾方面：（1）紅細(xì)胞的內(nèi)液和外液濃度相差大，細(xì)胞內(nèi)濃度明顯高于血清的生化檢驗(yàn)指標(biāo)ALT、AST等，溶血后上述物質(zhì)釋放到血清中，導(dǎo)致測定結(jié)果偏高；（2）血紅蛋白紅色對比色分析法的干擾，如血紅蛋白能將膽紅素氧化成膽綠素，使血清膽紅素降低，同時溶血后，各細(xì)胞成分溶解于血清中，增加了血清體積，血清中UREA及GLU等物質(zhì)濃度相對下降，測定結(jié)果將低于真實(shí)值[7－8]。（3）溶血標(biāo)本中血紅素中的正鐵離子，可被試劑中的氧化劑氧化成為黃色的高鐵血紅素，對兩點(diǎn)比色法造成干擾；當(dāng)紅細(xì)胞外血紅蛋白達(dá)到一定程度可造成TP、ALB測定值增高；（4）血紅蛋白還可以競爭性地抑制分析物與試劑中的反應(yīng)物結(jié)合，使測定結(jié)果低于實(shí)際值。

從上述試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，只要標(biāo)本溶血，對許多的生化檢查項目的結(jié)果影響都很大，這樣的結(jié)果就可能干擾臨床醫(yī)生對患者的正確診斷，甚至造成誤診。在當(dāng)今醫(yī)療糾紛越來越多的情況下，正確的檢驗(yàn)結(jié)果在臨床診療中起著重要的作用。所以檢驗(yàn)科工作人員在日常工作中，遇到溶血標(biāo)本時應(yīng)及時通知臨床醫(yī)生重新抽血，以獲取合格的生化標(biāo)本；并且對患者及其家屬做耐心的解釋，以便得到理解和支持；負(fù)責(zé)抽血的人員也應(yīng)加強(qiáng)技術(shù)訓(xùn)練，以便減少因抽血不合格而對患者造成不必要的痛苦。另一方面，從方法學(xué)上克服和減少溶血的影響也很重要，對于溶血后血紅蛋白對光度比色的影響可通過設(shè)置樣品空白等措施加以克服，以提高臨床生化檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。如確實(shí)不能獲取合格的標(biāo)本，檢驗(yàn)科也應(yīng)該在結(jié)果上注明溶血及溶血程度，便于臨床醫(yī)生對所檢查的項目進(jìn)行綜合分析，從而對疾病作出正確診斷。

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