紫丁香苷的提取工藝研究及其含量測定

劉 聰 金川粲 劉 甜

一汽總醫(yī)院，吉林 長春 130011

紫丁香苷的提取工藝研究及其含量測定

劉 聰 金川粲 劉 甜

一汽總醫(yī)院，吉林 長春 130011

目的：對紫丁香葉中紫丁香苷提取工藝及其含量進行研究，為紫丁香葉的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。方法：采用高效液相色譜法對紫丁香葉中紫丁香苷的提取工藝進行了比較研究。結(jié)果：紫丁香苷的最佳提取工藝為水煎法。

紫丁香葉；紫丁香苷；提取工藝

紫丁香葉為木樨科丁香屬紫丁香的干燥葉［1］，具有抗菌、消炎、抗病毒和保肝利膽等藥理活性。紫丁香葉含有多種化學(xué)成分，大多以苷的形式存在，其苷元大致可分為羥基苯類、黃酮類、苯丙素類和環(huán)烯醚萜類等。據(jù)調(diào)查顯示，紫丁香葉有很好的應(yīng)用前景和經(jīng)濟效益，對其有效部位的確定以及深入的研究具有重要的價值，也為進一步的藥效等方面研究奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與材料

日本島津高效液相色譜儀（SPD－10Avp紫外檢測器；AT－330柱溫箱；浙大N2000工作站）；MellterCE240電子天平（上海）；UV－2401PC日本島津紫外分光光度計（北京）；HH SY21－Ni4－C水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）；PTHW型電熱套 （鞏義市英峪予華儀器廠）。紫丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品購于中國藥品生物制品檢定所；所用試劑均為分析純；紫丁香葉為2006年9月份采摘的新鮮葉，由長春食品藥品檢驗所鑒定。

2 方法與結(jié)果

2.1 紫丁香苷的提取方法

2.1.1 水煎法 取干燥的紫丁香葉100g，加水文火煎煮三次。第1次12倍量水煎2h，后2次加10倍量水，煎1.5h，合并提取液，過濾，濃縮，減壓干燥，得到水煎液的干燥粉末，稱重。同法做三次平行實驗，計算平均得膏率，結(jié)果見表1。

2.1.2 超聲波法 取干燥的紫丁香葉100g，加10倍量溶劑（水或70%乙醇）超聲提取3次，每次30～40min，合并提取液，過濾，濃縮，減壓干燥，得到超聲水提取物的干燥粉末和超聲乙醇提取物的干燥粉末，稱重。同法做三次平行實驗，計算平均得膏率，結(jié)果見表1。

2.1.3 不同濃度乙醇回流提取法 分別稱取干燥的紫丁香葉100g，用30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇回流提取3次，每次1.5h，溶劑量分別為12倍、10倍、8倍量。合并提取液，過濾，濃縮，減壓干燥，得到乙醇回流提取的干燥粉末，稱重。同法做三次平行實驗，計算平均得膏率，結(jié)果見表1。

2.2 紫丁香苷的含量測定

2.2.1 色譜條件 Chmmasil Cl8柱（4.6mm×150mm，5μm）；測定波長：265nm；流動相：甲醇－水（20：80）；流速：1.0 ml／min，進樣量：5μl。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 精密稱取紫丁香苷標(biāo)準(zhǔn)品1.0mg，置5ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，得到濃度為0.2mg／ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液2、4、6、8、10、12μl注入液相色譜儀，測定紫丁香苷色譜峰的積分面積。以峰面積為 （Y）為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（mg）為橫坐標(biāo)進行線性回歸，得回歸方程：Y＝1090076.1897X＋5831.4416（r＝0.9997）表明在0.4～2.45μg之間線性關(guān)系良好。

2.2.4 供試品溶液的制備 分別取上述提取方法得到的干燥粉末1g，25ml甲醇溶解，稱重，超聲30min，補足損失的重量，搖勻過濾，取續(xù)濾液1m l，過0.45μm的微孔濾膜，即得。

2.2.5 樣品的測定吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液5μl及供試品溶液10μl，分別注入液相色譜儀，測定，計算紫丁香苷含量，結(jié)果見表1。

表1 紫丁香苷不同提取方法含量比較

結(jié)果表明50%乙醇回流提取紫丁香苷含量最高，但是水煎法的含量也很高，與50%乙醇回流提取相差很少，考慮到經(jīng)濟合理，所以采用水煎法提取紫丁香苷。

3 討論

3.1 紫丁香苷流動相的選擇，實驗中嘗試過甲醇－水（20：80），乙腈－水（45：55）［2］為流動相，經(jīng)過比較，以甲醇－水 （20：80）作為選流動相重復(fù)性最佳，出峰時間較快，峰形尖銳、對稱性好，且對紫丁香苷主峰與雜質(zhì)峰明顯分離。

3.2 紫丁香葉中的紫丁香苷可能是抗肝炎病毒的主要有效成分，實驗只確定了紫丁香苷的粗提工藝。為了紫丁香葉新藥的進一步研究與開發(fā)，還應(yīng)對其有效部位繼續(xù)做分離純化及其藥理活性研究。

［1］孫傳奇.遼寧省中藥資源名錄 ［M］.遼寧省中藥資源普查辦公室，1987：46.

［2］Munro Ic.Biological availability of arsenic in fish［A］.In Proceedings at the 13th Annual Meeting of Society of toxicology［C］.Wahsington，1974：9.

The Research of Syringoside Content Determ ination Method and Extraction Process from Syringa Leaves

LIU Cong，JIN Chuan－can，LIU Tian
Faw General Hospital，Jilin changchun 130011，China

Objective：Study on the effective component of Syringa leaves to have a better use of the Syringa leaves ofmedicinal resources for the development of Chinesemedicine lay the foundation for new durgs.Methods：Usingmacroporous resin，HPLC and othermethods to stydy its effective components，such as Syringoside.Resu lts：The water reflux is better than othermethods in the extraction of syringoside and flavones.

Syringa leaves；Syringoside；Extraction methods

R284.2

A

1007－8517（2013）18－0024－02

2013.06.25）

劉聰 （1978～），女，吉林松原人，碩士，主治醫(yī)師。