食用菌母種快繁新技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)的比較試驗

宋 瑩 劉巖巖 劉 剛

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝分院，沈陽 110161；2. 彰武縣中等職業(yè)技術(shù)專業(yè)學(xué)校，遼寧 彰武 123200）

食用菌母種快繁新技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)的比較試驗

宋 瑩1劉巖巖1劉 剛2

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝分院，沈陽 110161；2. 彰武縣中等職業(yè)技術(shù)專業(yè)學(xué)校，遼寧 彰武 123200）

食用菌母種；接種方法；快繁；菌絲；比較

食用菌母種質(zhì)量的差異對出菇的時間、品質(zhì)和產(chǎn)量等方面均有較大的影響。目前，賓王菇（煙色離褶傘）、大球蓋、香菇、蟲草、滑菇等幾個食用菌品種的母種傳統(tǒng)接種方法通常是采用接種針挑取高粱米粒大小菌塊接于斜面瓊脂培養(yǎng)基上，然后進行適溫培養(yǎng)。而賓王菇、靈芝、大球蓋菇、香菇這4個品種的母種菌絲均有生長較緩慢，母種生產(chǎn)周期長，制種成品率低的現(xiàn)象；蟲草、滑菇母種經(jīng)常會出現(xiàn)菌絲扭結(jié)，在接種點處容易產(chǎn)生子實體原基突起，乃至形成子實體（具有菌蓋、柄）的現(xiàn)象，嚴(yán)重影響菌絲體活力，導(dǎo)致菌種質(zhì)量下降。為了加快生長速度，常采用兩點或三點式接種方法，但接種點過多，菌絲的使用率會降低，這是因為我們在接原種時，一般不主張把包括接種點在內(nèi)的菌塊接到原種里。為了解決這個問題，筆者經(jīng)過多次試驗，在選擇適合不同品種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上對接種方法進行了改進，取得了較好的效果。

1 材料和方法

1.1 供試菌株 賓王菇、靈芝、大球蓋菇、蟲草、滑菇母種均由遼寧省農(nóng)科院園藝分院食用菌研究室提供。

1.2 培養(yǎng)基配方

（1）賓王菇培養(yǎng)基：草炭30 g，麥麩10 g（煎汁），土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，牛肉膏3 g，維生素B120 mg，水1 000 mL。

（2）靈芝培養(yǎng)基：木屑30 g，麥麩10 g（煎汁），土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，蛋白胨3 g，維生素B120 mg，水1 000 mL。

（3）大球蓋菇培養(yǎng)基：麥麩40 g（浸泡12 h煎汁），土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，蛋白胨3 g，維生素B120 mg，水1 000 mL。

（4）北蟲草培養(yǎng)基：胡蘿卜200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，牛肉膏3 g，水1 000 mL。

（5）滑菇培養(yǎng)基：木屑30 g，麥麩10 g（兩者混合均勻煎汁），土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，蛋白胨3 g，水1 000 mL。

1.3 接種方法

（1）涂抹式接種。在待轉(zhuǎn)的母種上取4×4 （mm）帶培養(yǎng)基的菌塊，菌絲朝下置于待接的試管斜面培養(yǎng)基上，用接種針劃動菌塊，將菌絲均勻涂抹在培養(yǎng)基上，一個菌塊可以反復(fù)涂抹3～5支斜面試管。

圖1 各品種兩種接種方式的菌絲生長情況

（2）對照。采用常規(guī)一點式接種，取高粱米粒大小的菌絲接于試管培養(yǎng)基上，置于培養(yǎng)基中間位置。

1.4 試驗方法 用18×18（cm）的試管，每個品種各裝7支，培養(yǎng)基裝量為試管長的1/5，121 ℃滅菌30 min，冷卻制成等長斜面培養(yǎng)基，備用。接種方法采用傳統(tǒng)一點式接種和涂抹式接種兩種方法，接種后置于24 ℃培養(yǎng)箱無光培養(yǎng)。接種后第3 天開始，每天觀察菌絲密度和菌絲形態(tài)；并記錄各管滿管天數(shù)，測量從起始線至管底的長度，對于菌絲生長極弱的菌絲則測量起始線至菌絲體斜面的長度，求出菌絲體的日平均長速，同時記錄各管菌絲體的密度和氣生菌絲量作為菌絲體的長勢，以日均長速和長勢共同作為菌絲體生長指標(biāo)，記錄菌絲長速、生長勢以及菌絲滿管時間。設(shè)3次重復(fù)，每個處理7支。將培養(yǎng)好的菌種置于4 ℃冰箱中保藏3個月，觀察菌絲變化。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同接種方法的效果 從表1可以看出，采用涂抹式接種方法，這幾類食用菌的生長速度、長勢以及滿管時間與其對照相比，優(yōu)勢非常明顯。賓王菇涂抹式日均長速5.95 mm，快于對照的3.89 mm；滿管天數(shù)為11天，比對照提早7天；菌絲長勢均較強。靈芝日均長速10.52 mm，快于對照的6.15 mm；滿管時間比對照縮短4天；菌絲長勢稍弱于一點式接種。北蟲草菌絲日均生長速度為12.22 mm，快于對照的2.85 mm，滿管天數(shù)是傳統(tǒng)一點式接種的1/2；菌絲長勢均勻，顏色也較均勻。大球蓋菇菌絲日均長速5.96 mm，快于對照2.95 mm；采用涂抹式接種滿管天數(shù)為8天，比對照需要13天短5天；菌絲長勢較強。由此可見這種涂抹式接種方法用在賓王菇、靈北蟲草、滑菇，以及大球蓋菇上均較合適。

表1 不同接種方法的菌絲生長情況

2.2 不同接種方法貯藏3個月后的菌絲狀態(tài)從表2可以看出，菌種保存3個月時，一點式接種方法接種的蟲草和滑菇都有少量的原基出現(xiàn)，而涂抹式接種未見原基。

4 小結(jié)與討論

表2 不同接種方法貯藏3個月后的菌絲狀態(tài)

這種涂抹式母種快繁的接種方法在本試驗的5種菇類經(jīng)過多次試驗比較，無論是菌絲生長速度還是長勢及滿管天數(shù)，都優(yōu)于傳統(tǒng)一點式接種法。說明此種接種方法比較適合這5種菇類。而對其他菇類則需繼續(xù)進行試驗。

在保存時間上，影響原基出現(xiàn)的原因很多，接種方法只是其中的一個影響因子。要想避免試管母種的原基出現(xiàn)，必須在培養(yǎng)基配方、保存方式、人為管理等方面進行全方位控制。

[1] 席敏. 不同培養(yǎng)基對平菇類食用菌試管子實體的抑制效果[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2002, 30（3）: 421-423.

[2] 陳歡, 劉巖, 王偉功. 大球蓋菇母種培養(yǎng)基的研究 北方園藝[J]. 2011（6）: 178-17.

[3] 許慶國. 不同碳氮源對北蟲草菌絲生長的影響[J].食用菌, 2011（4）: 10-11.

[4] 張敏, 陳平, 孫軍德. 滑菇母種培養(yǎng)基的篩選[J].食用菌, 2005（2）: 21-22.