系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿IL－17和IL－23的表達(dá)及意義

王 曉，華春秀，柴華旗

(1南陽(yáng)市中心醫(yī)院，河南南陽(yáng)473009;2南陽(yáng)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校;3蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院)

近年研究發(fā)現(xiàn)，Th17細(xì)胞在自身免疫性疾病發(fā)病過(guò)程中起著重要作用［1，2］。IL－17 和 IL－23 是與Th17細(xì)胞密切相關(guān)的兩種細(xì)胞因子，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎［3］、干燥綜合征［4］、系統(tǒng)性硬化［5］等患者血漿和(或)病變組織中 IL－17 和(或)IL－23 表達(dá)增高，推測(cè)其可能參與了這些疾病的發(fā)病過(guò)程。但系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)作為常見(jiàn)的自身免疫性疾病，IL－17、IL－23是否也參與了其發(fā)病過(guò)程，這方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道，為此我們進(jìn)行了相關(guān)的初步探討?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本文SLE患者33例，均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病協(xié)會(huì)修正的SLE分類(lèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男3例、女30例，年齡18～56(36.52±11.82)歲?；颊呔懦诟腥尽⒙宰枞苑渭膊?、支氣管哮喘、肝病、腫瘤等疾病和過(guò)敏體質(zhì)者。根據(jù)SLE疾病活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)評(píng)分隨機(jī)將患者分為活動(dòng)組(SLEDAI評(píng)分≥10分)17例、非活動(dòng)組(SLEDAI評(píng)分＜10分)16例;在診斷SLE的前提下，如患者伴有持續(xù)尿蛋白＞0.5 g/d，或多次尿蛋白≥+++，或細(xì)胞管型尿(可為紅細(xì)胞、血紅蛋白、顆?；蚧旌闲凸苄?，或估算的腎小球?yàn)V過(guò)率小于60 mL/min，此類(lèi)患者納入腎炎組(15例)，無(wú)上述表現(xiàn)者納入非腎炎組(18例)。以同期28例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男2例、女26例，年齡23～53(37.29±8.62)歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 采集所有受試者空腹靜脈血2 mL，EDTA－K2抗凝，收集標(biāo)本后30 min內(nèi)1 000×g離心力離心15 min，分離獲得血漿，－70℃低溫冰箱凍存待測(cè)。IL－17和IL－23的檢測(cè)采用ELISA法，試劑盒由上海西唐生物科技有限公司提供，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，正態(tài)分布計(jì)量資料采用±s表示，比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析、雙變量相關(guān)分析等。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血漿IL－17、IL－23水平比較 見(jiàn)表1。

表1 三組血漿IL-17、IL-23水平比較(pg/m L，±s)

表1 三組血漿IL-17、IL-23水平比較(pg/m L，±s)

注:與活動(dòng)組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01

組別 n IL－17 IL－23對(duì)照組 28 33.66 ±23.55## 76.11 ± 57.26##活動(dòng)組 17 59.10 ±19.52 221.61 ±105.28非活動(dòng)組 16 44.93 ±14.67# 101.32 ± 45.22##

2.2 SLE、IL－17、IL－23 水平與 SLEDAI評(píng)分的關(guān)系SLE患者血漿IL－17水平與SLEDAI評(píng)分呈正直線相關(guān)(r=0.39，P ＜0.05);IL－23 水平與 SLEDAI評(píng)分呈正直線相關(guān)(r=0.60，P ＜0.01)。

2.3 SLE患者血漿IL－17和 IL－23水平與腎臟損害的關(guān)系 見(jiàn)表2。

3 討論

Th17細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)CD+4T細(xì)胞，主要分泌 IL－17A、IL－17F、IL－22、IL－21 和 TNF－α 等細(xì)胞因子，其中IL－17A即IL－17是最主要的效應(yīng)分子，具有很強(qiáng)的促炎作用;而IL－23主要由活化的抗原遞呈細(xì)胞分泌產(chǎn)生，是IL－12家族的新成員，在分子結(jié)構(gòu)上，與IL－12擁有共同的IL－12p40亞基，但二者分別具有獨(dú)特的 IL－23p19 亞基和 IL－12p35 亞基，IL－23對(duì)Th17細(xì)胞的增殖存活起著重要作用［6］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，IL－17和IL－23在自身免疫性疾病的病理過(guò)程中起著重要作用［7，8］，深入地研究 Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子可能對(duì)于自身免疫性疾病的治療有重要意義。

表2 SLE腎炎組與非腎炎組患者血漿IL-17、IL-23 水平(pg/m L，±s)

表2 SLE腎炎組與非腎炎組患者血漿IL-17、IL-23 水平(pg/m L，±s)

注:與對(duì)照組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01

組別 n IL－17 IL－23對(duì)照組28 33.66 ±23.55 76.11 ± 57.26腎炎組 15 51.63 ±20.25# 161.74 ±107.85##非腎炎組 18 52.73 ±17.54## 164.57 ± 98.33##

在狼瘡鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究中，Hsu等［9］發(fā)現(xiàn)，BXD2小鼠血清中IL－17表達(dá)和脾臟中Th17細(xì)胞數(shù)量均明顯增加，BXD2小鼠可自發(fā)形成生發(fā)中心，使用IL－17抑制劑時(shí)可抑制生發(fā)中心的形成，加入外源性IL－17可促進(jìn)生發(fā)中心的形成，并且能夠促進(jìn)IgM和IgG型自身抗體分泌。Dong等［10］對(duì)狼瘡性腎炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)也發(fā)現(xiàn)了類(lèi)似現(xiàn)象，經(jīng) IL－17刺激后培養(yǎng)液中IgG、抗dsDNA抗體和IL－6表達(dá)明顯增高，表達(dá)量與IL－17水平呈劑量依賴(lài)性，抗IL－17抗體可終止這種作用。兩項(xiàng)研究結(jié)果提示IL－17可能通過(guò)直接或間接作用促進(jìn)自身反應(yīng)性B淋巴細(xì)胞激活，從而介導(dǎo)自身免疫的發(fā)生。

為闡明IL－17在SLE患者體內(nèi)的表達(dá)水平及其與疾病的關(guān)系，本研究進(jìn)行了初步的探索，實(shí)驗(yàn)表明，在疾病活動(dòng)期，血漿IL－17表達(dá)明顯增高，并且與疾病活動(dòng)呈正相關(guān)性，但與腎臟損害與否沒(méi)有明顯關(guān)系;Wong等［11］也發(fā)現(xiàn)，SLE 患者血漿中 IL－17表達(dá)水平明顯增高，且與SLEDAI評(píng)分具有明顯的相關(guān)性;并使用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)對(duì)SLE患者PBMC中能夠分泌IL－17的細(xì)胞進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IL－17分泌細(xì)胞明顯增多。但 Kurasawa等［12］對(duì) 16例SLE患者和24例系統(tǒng)性硬化患者進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)性硬化患者血清IL－17表達(dá)明顯增高，但其中9例SLE患者血清IL－17表達(dá)無(wú)明顯異常(作者未注明SLE患者疾病活動(dòng)性)。劉冠賢等認(rèn)為，SLE活動(dòng)期PBMC中IL－17 mRNA表達(dá)明顯增高，但患者血漿IL－17水平正常，可能與IL－17釋放至胞外后很快降解有關(guān)。

另外，本研究對(duì)IL－17上游的細(xì)胞因子IL－23進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)SLE患者活動(dòng)期IL－23的表達(dá)亦明顯增高，與疾病活動(dòng)性相關(guān)，與腎臟損害與否無(wú)關(guān)。Huang等通過(guò)RT－PCR方法亦檢測(cè)到活動(dòng)期SLE患者IL－23p19亞基和IL－12p40亞基表達(dá)比非活動(dòng)期SLE患者高，但經(jīng)激素或其他免疫抑制劑治療的患者IL－23p19亞基和IL－12p40亞基明顯減低。兩項(xiàng)研究結(jié)果均表明，SLE患者活動(dòng)期IL－23表達(dá)增高明顯，提示IL－23可能參與了SLE疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，尤其是疾病活動(dòng)期的病理過(guò)程。

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