兩種不同工藝制備的芪茵顆粒對(duì)大鼠高脂血癥治療作用的研究

薛清方　聶繼紅

【摘要】目的：通過(guò)研究?jī)煞N不同工藝制備的芪茵顆粒對(duì)大鼠高脂血癥治療作用的效果，從而為芪茵工藝的制備工藝提供科學(xué)依據(jù)。方法：選用Wistar大鼠50只，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、血脂康膠囊陽(yáng)性對(duì)照組、芪茵顆粒劑水提組和芪茵顆粒劑水醇提組。采用高脂飼料喂養(yǎng)復(fù)制高脂血癥大鼠模型，模型成功后，除正常組和模型組給予生理鹽水外，其它各組大鼠連續(xù)給藥8周，觀察各組大鼠總膽固醇（Tc）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-c）和低密度脂蛋白（LDL-c）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量，并做病理切片，常規(guī)HE染色。結(jié)果：給藥組動(dòng)物血清TC、TG、FIDL-c、LDL-c和ALT水平與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）；芪茵顆粒水醇提工藝動(dòng)物血清Tc、TG、HDL-c、LDL-c和ALT水平與芪茵顆粒比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P

【關(guān)鍵詞】芪茵顆粒；高脂血癥；提取工藝

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1007-8517（2013）10-0010-02

高脂血癥是體內(nèi)脂類代謝紊亂導(dǎo)致血脂水平增高的一種疾病，并由此引發(fā)一系列的臨床病理表現(xiàn)。大量研究表明高脂血癥是冠心病、粥樣動(dòng)脈硬化形成的主要因素。隨著人們生活水平的不斷提高，高血脂的發(fā)病率有明顯增高的趨勢(shì)。

芪茵顆粒是我院曾斌芳主任醫(yī)師多年來(lái)的經(jīng)驗(yàn)方，臨床療效顯著。其功效為疏肝扶脾補(bǔ)腎，消導(dǎo)化痰，活血消積，用于肝郁脾虛脂肪性肝病。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究?jī)煞N不同工藝制備的芪茵顆粒對(duì)大鼠高脂血癥治療作用的效果，從而為芪茵工藝的制定提供科學(xué)依據(jù)。

1、材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠50只，體重180～220g，雌雄各半，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（新）2003-0002。

1.1.2 高脂飼料的制備 高脂飼料由膽固醇3kg（2%）、膽鹽1.5kg（1%）、丙硫氧嘧啶0.3kg（0.2%）、豬油15kg（10%）、蛋黃粉7.5kg（5%）、基礎(chǔ)飼料122.7kg（81.8%）配制而成。其中豬油為市售豬油加熱，濾過(guò)，去渣而成。蛋黃粉是將雞蛋煮熟后，將蛋黃剝出、過(guò)篩、60℃烘干。飼料的混勻壓制由新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心代為加工。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 TC測(cè)定試劑盒（批號(hào)：141611102），TG測(cè)定試劑盒（批號(hào)：141711022），LDL-c測(cè)定試劑盒（批號(hào)：142010027）。全自動(dòng)生化分析儀（深圳邁瑞B(yǎng)S320），低溫離心機(jī)（THERMO MULTIFUGE H32）。

1.1.4 藥物 血脂康膠囊，由北京北大維信生物科技有限公司提供（批號(hào)：20110803）。

工藝1 （水提工藝）：將茵黃顆粒的全部藥材進(jìn)行水提，加10倍量水提取2次，每次1小時(shí)，合并藥液，濾過(guò)，濾液濃縮至1.20～1.30（60℃）的稠膏，60℃以下干燥，粉碎成細(xì)粉。

工藝2 （水醇提工藝）：將茵黃顆粒中部分藥材進(jìn)行水提，加10倍量水提取2次，每次提取l小時(shí)，合并藥液，濾過(guò)，濾液濃縮至1.20～1.30（60℃）的稠膏，60℃以下干燥，部分藥材加10倍量80%乙醇醇提2次，每次1小時(shí)，合并藥液，濾過(guò)，濾液濃縮至1.20～1.30（60℃）的稠膏，60℃以下干燥，混合后，粉碎成細(xì)粉。

藥物配置：上述兩種工藝制備的浸膏配置成1g/4.4g（每克藥物相當(dāng)4.4g原生藥）的溶液。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 高脂血癥動(dòng)物模型的建立 選用Wistar大鼠50只，雌雄各半，除正常對(duì)照組10只外，其余大鼠采用高脂飼料喂養(yǎng)6周復(fù)制高脂血癥大鼠模型。

1.2.2 動(dòng)物分組及給藥方法 除正常大鼠（給予L 0ml/100g生理鹽水）外，將40只造模大鼠隨機(jī)分為4組：模型對(duì)照組（給予1.0ml/100g生理鹽水）、血脂康膠囊陽(yáng)性對(duì)照組（給予1.0ml/100g血脂康藥液）、芪茵顆粒水提組（2ml/100水提溶液）、芪茵顆粒水醇提組（2ml/100g水醇提溶液）。模型動(dòng)物均用高脂飼料飼養(yǎng)，正常對(duì)照組用基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)，用藥共計(jì)8周。

1.2.3 樣本取材及處理 高脂血癥大鼠模型建立前50只大鼠尾部取血測(cè)定相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)，高脂飼料常規(guī)喂養(yǎng)6周后尾部取血測(cè)定相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)（確定模型是否成功）；給藥8周后于末次給藥1小時(shí)后，10%水合氯醛腹腔麻醉，腹主動(dòng)脈采血，于4000rpm離心15min，取上層血清，一20℃保存待測(cè)；并取肝臟組織放人中性福爾馬林溶液固定。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn) 本實(shí)驗(yàn)中所有計(jì)量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±s）表示。采用PEMS3.1統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用方差分析。

2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過(guò)表1可以看出，模型組大鼠血脂較正常組明顯升高。各治療組組大鼠經(jīng)過(guò)治療后TC、TG、HDL-c和LDL-C值及ALT與模型組比較有顯著性差異（p<0.05或p

通過(guò)表2可以看出，模型組大鼠血脂較正常組明顯升高。各治療組組大鼠經(jīng)過(guò)治療后TC、TG、HDL-c和LDL-c值及ALT與模型組比較有顯著性差異（p

3、討論

3.1 高脂血癥模型的建立 現(xiàn)在常用于形成高脂血癥的動(dòng)物有小鼠、大鼠、家兔、豚鼠等。目前采用較多的動(dòng)物模型，有高脂飼料喂養(yǎng)法建立的模型和腹腔注射建立的急性高脂血癥模型，前者與臨床較接近。動(dòng)物多選用大鼠、家兔，其中大鼠由于造模方法簡(jiǎn)單，成本適中，血量較小鼠多，易飼喂，食性與人相近等優(yōu)點(diǎn)，為首選動(dòng)物。高脂飼料配方大同小異，均有豬油、膽固醇、蛋黃等，其中豬油的比例較重要，脂類含量越高，模型成立所需的天數(shù)越少，配方中加用膽鹽可加強(qiáng)外源性膽固醇的吸收。甲狀腺抑制藥丙基硫氧嘧啶，可抑制體內(nèi)膽固醇分解，使血液中的膽固醇和甘油三脂升高。綜合文獻(xiàn)方法，確定本次實(shí)驗(yàn)高脂飼料組方。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出：模型組（水提組和水醇提組）與正常組比較TC，TG，LDL-C明顯升高，HDL-C明顯降低，均有非常顯著的差異（P<0，01），表明本實(shí)驗(yàn)所造模型成功。

3.2 對(duì)調(diào)脂療效的評(píng)價(jià) 從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出：雌雄組大鼠的TC、TG和LDL-C與模型組比較，均呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明芪茵顆粒提取物對(duì)高脂血癥大鼠的血脂有降低作用。而水醇提組較水提組下降趨勢(shì)明顯，可能原因?yàn)檐我痤w粒經(jīng)水醇提取后，提取物中黃酮、蒽醌類極性較小的化合物含量增加，有文獻(xiàn)報(bào)道黃酮類成分通過(guò)提高肝臟SOD活性，減少自由基產(chǎn)生，能夠降低血清和肝臟MDA含量，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，從而防止脂質(zhì)代謝紊亂，降低血脂。故在后續(xù)試驗(yàn)中將選用工藝2（水醇提工藝）進(jìn)行進(jìn)一步研究。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)芪茵顆粒降血脂作用的研究?jī)H僅是個(gè)開(kāi)端，僅得出了其對(duì)高血脂癥大鼠有一定治療作用的結(jié)果，還需進(jìn)行大量相關(guān)研究，使芪茵顆粒能夠進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，有望成為治療或預(yù)防心腦血管疾病的藥品。