阻塞性黃疸大鼠抗內(nèi)毒素治療的研究

李樹學

【摘 要】目的：觀察術(shù)前抗內(nèi)毒素治療對阻塞性黃疸大鼠內(nèi)毒素血癥的抑制作用。方法：阻塞性黃疸大鼠分3組，在術(shù)前給予一般治療（OJ組），口服膽鹽（OJD1組）和皮下注射抗內(nèi)毒素抗體（0JD2組），觀察血漿內(nèi)毒素（ET）及腫瘤壞死因子（TNF）含量變化。結(jié)果：3組術(shù)ET和TNF水平無差異。OJD1 和OJD2組用藥后血漿ET水平均顯著下降，明顯低于0J組（p），術(shù)后進一步降低。OJD1和OJD2組術(shù)前和術(shù)后TNF水平與OJ組無明顯差異。結(jié)論：術(shù)前應(yīng)用膽鹽和抗體可有效降低阻黃大鼠圍手術(shù)前血漿ET水平。

【關(guān)鍵詞】阻塞性黃疸；內(nèi)毒素；膽鹽；抗內(nèi)毒素抗體

1對象與方法

1.1選擇健康成年清潔及雄性Wistar大鼠30只，體重250-300.

1.2實驗性藥品：口服膽鹽，抗內(nèi)毒素抗體。

1.3實驗試劑：鱟試劑盒 湛江博康海洋生物有限公司

TNF-a（ELISA）試劑盒 上海富眾生物有限公司

1.4分組及處理 隨機分為3組，每組10只。OJ組：阻塞性黃疸組；OJD1組：阻塞性黃疸口服膽鹽組（術(shù)前均胃內(nèi)給予0.2g日3次，給予7天。）OJD2組：阻塞性黃疸拮抗內(nèi)毒素治療組（術(shù)前皮下注射抗類脂A單克隆抗體200每克每天，給予3天。分別于術(shù)后7天、14天處死取血。

1.5檢測標準 血漿內(nèi)毒素含量用鱟試劑盒采用偶氮顯色法定量測量，單位為--- 。腫瘤壞死因子水平測定，采用ELISA法（大鼠腫瘤壞死因子（TNF-a）試劑盒）

1.6統(tǒng)計學處理 各組數(shù)值均用 ± s 表示

2 結(jié)果

2.1 血漿內(nèi)毒素含量變化見表1。

2.2 血漿腫瘤壞死因子含量變化 術(shù)后7天、14天TNF血漿水平與術(shù)前比較降低；拮抗內(nèi)毒素治療組術(shù)后與術(shù)前比較降低；OJD1組術(shù)前術(shù)后比較無明顯差異見表2。

3 討論

內(nèi)毒素是格蘭氏陰性菌細胞壁上的一種多脂糖，其主要成分是內(nèi)脂A，可激活中性粒細胞，能促進細胞介質(zhì)釋放出內(nèi)源性質(zhì)熱源，并作用于體溫調(diào)節(jié)中樞，還可啟動內(nèi)源性凝血過程，改變補體激活道路導致器官功能紊亂。內(nèi)毒素血癥是導致梗阻性黃疸死亡率和術(shù)后并發(fā)癥高的一個原因--。正常情況下肝臟的Kupffet細胞清除吸收入門靜脈的內(nèi)毒素，但在持續(xù)的膽道梗阻狀態(tài)下，Kupffet細胞受損，其吞噬功能會進一步的下降，使得部分細菌、內(nèi)毒素經(jīng)肝進入體循環(huán)，引發(fā)內(nèi)毒素血癥。膽鹽可以抑制腸道細菌的生長和抑制腸腔內(nèi)厭氧菌叢的繁殖，防止腸道吸收內(nèi)毒素，進而使腸源性門靜脈血中內(nèi)毒素的濃度降低。阻性黃疸中由于腸道內(nèi)膽鹽減少，導致血清中內(nèi)毒素明顯升高24%--68%了正常的內(nèi)毒素失活受到嚴重影響，導致腸道細菌的增加，內(nèi)毒素池的擴大，進而引起大量的毒素被吸收入門靜脈，進入血循環(huán)形成內(nèi)毒素血癥。已有研究證實，阻塞性黃疸與內(nèi)毒素血癥有相關(guān)，阻塞性黃疸時大量肝臟庫普弗（Kuffer）細胞的產(chǎn)生增高了內(nèi)毒素的敏感性，而內(nèi)毒素又可引起腫瘤壞死因子a（TNF-a）大量釋放以及細菌移位的發(fā)生。有研究證實，膽汁對維持腸粘膜緊密連接的完整性起重要作用。表明阻塞性黃疸腸道電生理參數(shù)依賴于腸緊密連接完整性，經(jīng)口服膽鹽后明顯改善。

從本實驗結(jié)果表明，OJD1組、OJD2組門靜脈血清內(nèi)毒素水平較OJ組明顯升高，有差異性（P<0.05）；隨梗阻時間的延長有顯著增高趨勢，有差異性（P<0.01）.證明阻塞性黃疸大鼠，伴有內(nèi)毒素血癥，細胞因子之間相互影響、相互作用，細胞免疫因子分泌紊亂，等一系列反應(yīng)導致機體嚴重損傷的病理生理變化。OJD1組和OJD2組術(shù)前和術(shù)后TNF水平OJ組比較均無明顯差異，其機制尚待進一步研究。本結(jié)果提示，術(shù)前應(yīng)用拮抗內(nèi)毒素抗體及口服膽鹽，可有效的降低術(shù)后血中內(nèi)毒素，有望進一步應(yīng)用于臨床降低阻塞性黃疸術(shù)后并發(fā)癥和死亡率。

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