常見引起仔豬腹瀉的病原學(xué)特點

吳猛鋼 福建省永春縣石鼓鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 362621

2010年冬季至今，我國南方多省豬場發(fā)生嚴(yán)重的仔豬腹瀉，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。該病的主要特點為：初生仔豬發(fā)病前外觀和正常豬無肉眼可見差異，2～10日齡新生仔豬較易感染發(fā)病，主要臨床表現(xiàn)為腹瀉嚴(yán)重、嘔吐不止和大量脫水等癥狀。剖檢可見發(fā)病仔豬腸管呈充氣樣、腸壁變薄，偶見有仔豬膽囊膨脹。該病仔豬種群發(fā)病率為50%以上，最高可達(dá)整群100%發(fā)病。發(fā)病豬群群間死亡率較高，可達(dá)85%以上，部分大日齡仔豬（10日齡以上）治療后可耐過，但易成僵豬，沒有經(jīng)濟(jì)飼養(yǎng)價值。該病用傳統(tǒng)用于治療仔豬腹瀉的抗生素、抗菌肽制劑、細(xì)胞因子（干擾素）等效果不佳，已引起各級政府、主管部門、相關(guān)科研單位和養(yǎng)殖戶極大關(guān)注。

目前，國內(nèi)多家獸醫(yī)科研院所和獸醫(yī)病毒學(xué)專家對該病的潛在致病病原進(jìn)行研究，得到的結(jié)果也有一定的參考價值。當(dāng)前，從臨床收集的病料運用分子生物學(xué)方法（RT-PCR方法和PCR方法）檢測到多種病毒病原，檢出率較高的主要還是豬傳染性胃腸炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）和輪狀病毒（porcine rotavirus，RV）等三種常見引起仔豬腹瀉的病原，其中以TGEV及PEDV共感染檢出率最高，推測其為引起腹瀉的主要致病病原［1-2］。同時，國內(nèi)外還報道有豬嵴病毒（Kobuvirus）、豬博卡病毒（Bocavirus）、豬輸血傳播病毒（Torque Teno Virus）、豬圓環(huán)病毒（porcine circovirus）等小RNA病毒和DNA病毒在相應(yīng)臨床特征的病料中檢測出來，這幾種病毒在腹瀉豬群中檢測率非常高，甚至在健康豬群中也有一定的陽性檢出率，但其單獨致腹瀉力不高（豬嵴病毒、豬博卡病毒、豬輸血傳播病毒因無法分離純培養(yǎng)而無法回歸實驗），推測其為潛在的腹瀉致病原?，F(xiàn)就豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和輪狀病毒分子病原學(xué)和治療措施進(jìn)行簡要綜述。

1 豬傳染性胃腸炎病毒

豬傳染性胃腸炎［3］是一種高度接觸傳染性，以嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、脫水，致兩周齡內(nèi)仔豬高死亡率為特征的病毒性傳染病，最早于1945年在美國由Doyle和Hutchings首次報道。該病是由豬傳染性胃腸炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus，TGEV）引起，世界動物衛(wèi)生組織（Office International Des Epizooties，OIE）將其列為二類動物疫病。目前，TGE主要出現(xiàn)在歐洲、美洲（北美、南美和中美）、亞洲（包括中國、日本和韓國）和西非部分地區(qū)。

TGEV屬于冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒屬（Coronavirus），只有一個血清型，不同毒株間抗原關(guān)系密切。TGEV病毒粒子呈圓形或橢圓多邊形，病毒顆粒直徑約為90～200 nm，病毒粒子有雙層囊膜，外膜覆有花瓣樣長約18～24 nm突起，相互之間以小柄連接，末端呈球狀。

小腸是該病毒的靶器官。病毒通過呼吸道感染后，先在鼻和肺中增殖后進(jìn)入小腸，通過與小腸上皮細(xì)胞接觸感染增殖，小腸上皮細(xì)胞迅速脫落，使其不能水解乳糖和其他養(yǎng)分，導(dǎo)致豬體由于滲透壓的作用而引起腹瀉和脫水，仔豬由于小腸絨毛發(fā)育不完全而發(fā)病更嚴(yán)重。死亡原因主要是由于脫水、代謝性酸中毒以及高血鉀癥引起。

TGEV引起的仔豬主要病理變化為急性卡他性腸炎典型癥狀：充滿凝乳塊、黏膜充血；小腸充滿氣體、腸壁變薄，呈半透明或透明狀；內(nèi)容物呈黃色或透明色泡沫狀；腸系膜淋巴結(jié)腫脹。病理組織學(xué)變化可見小腸絨毛萎縮、變短甚至壞死；腸上皮細(xì)胞浸潤、固有層見有漿液性滲出和炎性浸潤。

2 豬流行性腹瀉病毒

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）是由豬流行性腹瀉病毒引起的，以腹瀉、嘔吐和脫水為典型特征的接觸性腸道傳染病，該病最早于1971年在英國報道。PEDV［4］屬于冠狀病毒科（Coronaviridae）冠狀病毒屬（Coronavirus），為不分節(jié)段的線性單股正鏈RNA，目前僅見有一個血清型，該病肉眼診斷易和TGEV混淆，需進(jìn)一步通過實驗室分子生物學(xué)和免疫學(xué)方法確診。

PEDV編碼典型的冠狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白：N蛋白、M蛋白、sM蛋白、ORF3和S蛋白。ORF3蛋白較小，研究發(fā)現(xiàn)PEDV野生型（強(qiáng)毒株）編碼的ORF3蛋白具有離子通道活性，具有與SARS冠狀病毒3a蛋白類似的功能，而PEDV弱毒株的ORF3基因由于存在缺失突變，導(dǎo)致編碼產(chǎn)物失去了離子通道活性。此外，研究還發(fā)現(xiàn)ORF3基因表達(dá)受到抑制之后可明顯降低病毒在Vero細(xì)胞上增殖的效率。

PED和TGE一樣應(yīng)用抗生素治療無效，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所已研制出PED甲醛氫氧化鋁滅活疫苗，保護(hù)率達(dá)85%以上。中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所和哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司還研制出PED和TGE二聯(lián)滅活疫苗，免疫妊娠母豬，乳豬通過初乳獲得保護(hù)，降低PED和TGE的發(fā)生。但目前，PEDV的免疫作用機(jī)制和入侵機(jī)理研究較少，要從根本上控制PED的流行，還需要更進(jìn)一步加大對PEDV分子病原學(xué)的深入研究，通過基因工程技術(shù)研制出更高效的基因工程疫苗。

3 輪狀病毒

輪狀病毒感染是由輪狀病毒（porcine rotavirus，RV）引起仔豬消化道功能紊亂的急性腸道傳染病，多呈隱性感染。RV［5］屬于呼腸病毒科（Reoviridae）輪狀病毒屬（Rotavirus），輪狀病毒為雙鏈RNA病毒，二十面體的蛋白質(zhì)殼體結(jié)構(gòu)、無囊膜，直徑大約為75 nm左右。其兩層外殼包裹著蛋白核心，外層殼體呈輪緣狀，環(huán)繞核心基因編碼蛋白。輪狀病毒主要有 A、B、C、D、E、F和 G群，導(dǎo)致動物腹瀉的 RV主要屬于A群。此外，B群、C群和E群RV也可感染豬群。

RV 有 6 個病毒蛋白 VP（VP1、VP2、VP3、VP4、VP6與VP7）架構(gòu)了整個病毒顆粒（病毒體），和5個僅在輪狀病毒感染的細(xì)胞中產(chǎn)生的非結(jié)構(gòu)性蛋白NS（NS1、NS2、NS3、NS4 和 NS5）。這些蛋白與 RV 在體內(nèi)RNA合成與包裝相關(guān)，推測其通過mRNA進(jìn)行病毒復(fù)制以及rRNA轉(zhuǎn)譯與基因表現(xiàn)調(diào)節(jié)。VP6蛋白是RV的主要抗原結(jié)構(gòu)蛋白，基于該蛋白建立的免疫學(xué)方法可用來對輪狀病毒的種類進(jìn)行區(qū)分。VP7蛋白是RV病毒體外層表面的糖蛋白，其不僅維持病毒結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，還和VP4蛋白質(zhì)一樣，可用于對RV的抗感染研究。

4 防控建議

病毒的傳播途徑主要有垂直傳播和水平傳播兩種。垂直傳播就是母豬將傳染源通過哺乳傳染給仔豬，可通過不吃母乳來切掉此途徑；水平傳播是導(dǎo)致腹瀉病原流行傳播的主要方式。當(dāng)前，我國動物的異地運輸和“死淘”動物的處理措施還不是很規(guī)范，在一線執(zhí)行力較差，或者片面追求短期經(jīng)濟(jì)利益而對國家相關(guān)的法律法規(guī)置若罔聞，畜禽養(yǎng)殖飼養(yǎng)和運輸人員流動混雜，豬場的進(jìn)出過程消毒不徹底等等都存在著傳播疾病的隱患。

此外，在一線豬場還應(yīng)加強(qiáng)對豬群常見傳染病如豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病、豬瘟和豬偽狂犬病的疫苗免疫及抗體監(jiān)測［6］，并對抗體水平不符合的豬群進(jìn)行重復(fù)接種，同時還應(yīng)注意對疫苗免疫和野毒感染進(jìn)行仔細(xì)區(qū)分，提高豬群的養(yǎng)殖福利，增強(qiáng)豬群免疫力和健康水平，防治繼發(fā)感染和多重感染，避免造成更嚴(yán)重的危害。

［1］ Wang L，Ge C，Wang D，et al.The survey of porcine teschoviruses，porcine circovirus and porcine transmissible gastroenteritis virus infecting piglets in clinical specimens in China［J］.Trop Anim Health Prod，2013，45（5）:1087-1091.

［2］ Kim S，Kim I，Pyo H，et al.Multiplex real-time RT-PCR for the simultaneous detection and quantification of transmissible gastroenteritis virus and porcine epidemic diarrhea virus［J］.J Virol Methods，2007，146（1/2）:172-177.

［3］ Sirinarumitr T，Paul P S，Halbur P G，et al.An overview of immunological and genetic methods for detecting swine coronaviruses，transmissible gastroenteritis virus，and porcine respiratory coronavirus in tissues ［J］.Adv Exp Med Biol，1997，412:37-46.

［4］ Yang X，Huo J Y，Chen L，et al.Genetic variation analysis of reemerging porcine epidemic diarrhea virus prevailing in central China from 2010 to 2011［J］.Virus Genes，2013，46（2）:337-344.

［5］ Mor S K，Chander Y，Marthaler D，et al.Detection and molecular characterization of porcine astrovirus strains associated with swine diarrhea ［J］.J Vet Diagn Invest，2012，24（6）:1064-1067.

［6］ 錢峰，向軍.豬免疫抑制疾病的免疫抑制機(jī)理研究［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2010，31（9）:156-157.