蘆筍中硒元素的測(cè)定方法探究

于 輝， 呂瑞芳， 秦博文， 陳 超

(承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院， 河北 承德 067000)

蘆筍(Asparagus officinalis Linn)學(xué)名石刁柏，百合科，天門(mén)冬屬，多年生草本植物，藥食兩用蔬菜?！拔陡省⑿院?，入肺腎二經(jīng)”。現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)分析，蘆筍含有特別豐富的組織蛋白、葉酸、核酸和較多的硒、鉬、鎂、錳、銅、鐵等微量元素，能有效地控制細(xì)胞異常生長(zhǎng)，促使細(xì)胞生長(zhǎng)正常化，具有防止細(xì)胞癌變的作用，列30種抗癌植物之首，是世人公認(rèn)的抗癌藥物。硒能抑制致癌物的活力，提高機(jī)體的免疫力，適量補(bǔ)充硒可提高人體免疫力，預(yù)防腫瘤和心血管等疾病的發(fā)生［1］。硒的安全和適宜攝入量為50－400μg/d［2］。本文利用氫化物發(fā)生原子熒光法測(cè)定蘆筍中硒，旨在為蘆筍的研究開(kāi)發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料:AFS－230型雙道原子熒光光度計(jì);斷續(xù)流動(dòng)氫化物發(fā)生器進(jìn)樣系統(tǒng);SFG－01B.500黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱SFG－01B.500;WX－4000溫壓雙控微波消解系統(tǒng)。本法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純;實(shí)驗(yàn)用水為超純水(電阻率為18.3M ·cm)。鐵氰化鉀溶液(100 g/L):取10.0g鐵氰化鉀，溶于100 mL超純水中。載流:10%鹽酸溶液，取100mL濃鹽酸稀釋至1000mL。硼氫化鉀溶液(20g·L－1):稱取10.0g硼氫化鉀溶于500mL 2g·L－1的氫氧化鈉溶液中，臨用前配制。鹽酸(6mol/L):將濃鹽酸和水按體積1:1的混合。硒標(biāo)準(zhǔn)溶液:100μg/mL購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。蘆筍:產(chǎn)地，河南。

1.2 方法:取新鮮20.00g蘆筍自然風(fēng)干粉碎經(jīng)微波消解后冷卻，將消解液洗入干凈的50 mL小燒杯中，低溫蒸發(fā)至2.0 mL時(shí)，加入6.0 mol/L 的鹽酸5.0 mL，繼續(xù)加熱至微沸5min，使六價(jià)硒還原為四價(jià)硒。冷卻后完全轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，加入5.0mL 10%鐵氰化鉀，用10%鹽酸溶液定容到刻度，搖勻待測(cè)。測(cè)量條件設(shè)定為燈電流:60mA，負(fù)高壓:300V，原子化器高度8 mm，原子化器溫度:200℃，載氣流量:500mL/min，屏蔽氣流量:1000ml/min，讀數(shù)方式:峰面積，讀數(shù)延遲時(shí)間2s，讀數(shù)時(shí)間10s，測(cè)量方法:標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

1.3 樣品分析:開(kāi)機(jī)，按1.2設(shè)定儀器工作條件，輸入樣品重量、定容體積等有關(guān)參數(shù)，原子化器點(diǎn)火，預(yù)熱30 min。采用斷續(xù)流動(dòng)自動(dòng)進(jìn)樣［3］，依次測(cè)定空白、標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品的熒光強(qiáng)度，儀器自動(dòng)計(jì)算樣品測(cè)量結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:分別取 0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2方法步驟進(jìn)行處理，冷卻后完全轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加入5.0mL 10%鐵氰化鉀，用10%鹽酸溶液定容到刻度，制作的標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為:0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8μg/mL。

2.2 方法的精密度和準(zhǔn)確度:用0.6 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述條件下，平行測(cè)定11次，經(jīng)統(tǒng)計(jì)測(cè)量法計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.28%。進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，硒的加標(biāo)回收率為99.43%。

2.3 樣品含量:按1.2設(shè)定儀器工作條件，對(duì)蘆筍樣品溶液進(jìn)行三次平行測(cè)定，得到樣品溶液硒的濃度為0.456μg/mL，經(jīng)計(jì)算樣品含量 0.57μg/g。

3 討論

微波消解的特點(diǎn)是化學(xué)反應(yīng)快;試劑用量少，空白值較低;樣品交叉污染機(jī)會(huì)少，可避免硒的揮發(fā)，回收率高;效率高，操作簡(jiǎn)單，不污染工作環(huán)境;節(jié)能，降耗［4］。試驗(yàn)考察了濃硝酸、濃硝酸與過(guò)氧化氫、濃硝酸與濃高氯酸不同消解體系以及比例和用量。結(jié)果表明，濃硝酸與濃高氯酸(8+2)mL的消化效果最好。在消解過(guò)程中，為了避免反應(yīng)過(guò)于激烈，防止壓力驟升，采用功率400W，壓力400kPa，時(shí)間設(shè)定為10min。原子化器高度是影響熒光信號(hào)的一個(gè)重要參數(shù)。通過(guò)作原子化器的高度與熒光強(qiáng)度的關(guān)系試驗(yàn)，表明原子化器的高度為8mm時(shí)，熒光強(qiáng)度最好;信噪比最佳，原子化效率最好。對(duì)于光電倍增管，負(fù)高壓越高，測(cè)定的靈敏度越好，但負(fù)高壓過(guò)高使信號(hào)噪音偏高。通過(guò)作 210、240、260、270、280、290、300、310V 條件下，測(cè)定 1.0μg/mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度，計(jì)算信噪比。負(fù)高壓在300V時(shí)信噪比最大，故負(fù)高壓為300V。作1.0μg/mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液的燈電流與熒光強(qiáng)度曲線，計(jì)算信噪比。燈電流在60－70mA信噪比最好。因此，選擇燈電流60mA。硼氫化鉀濃度最關(guān)鍵，影響氫化物生成速度，試驗(yàn)表明，當(dāng)硼氫化鉀濃度在20g/L左右變化時(shí)，熒光強(qiáng)度趨于恒定，所以用20g/L硼氫化鉀進(jìn)行測(cè)定。

在最佳測(cè)量條件下，方法的線性范圍為0－0.8μg/L，線性方程為:I=57.429C －2.919，線性相關(guān)系數(shù) r=0.9998，檢出限(3S/N)為0.024μg/mL?？梢?jiàn)氫化物發(fā)生原子熒光法測(cè)定藥用植物中的硒是可行的。測(cè)定結(jié)果表明，鮮蘆筍的含硒量達(dá)0.57μg/g，比一般蔬菜(0.006－0.237)的含量高幾倍甚至幾十倍，具有一定保健功能，所含的天門(mén)冬酰胺、香豆素、蘆丁等有抑制癌細(xì)胞、擴(kuò)張血管、利尿解毒的多種作用，對(duì)預(yù)防癌癥、心腦血管病、高血壓、糖尿病、腎病、脂肪肝、皮膚病、支氣管病等有一定療效。營(yíng)養(yǎng)學(xué)家和素食界人士均認(rèn)為它是健康食品和全面的抗癌中草藥。

［1］李冬華，袁瑞榮，孫燕，等.中藥蘆筍的實(shí)驗(yàn)和臨床研究 Ⅰ、蘆筍抗腫瘤作用和免疫調(diào)節(jié)功能的初步實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，1988，4(1):32 －39.

［2］趙向東.硒的飲食推薦量［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)地理學(xué)分冊(cè)，1998，19(1):9－11.

［3］卑占宇，楊木華.氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測(cè)定荊芥中汞和砷［J］.理化檢驗(yàn) － 化學(xué)分冊(cè)，2010，46(8):971 －972.

［4］徐桂杰，可成友，邊薔，等.有機(jī)樣品中硒消解方法的研究進(jìn)展［J］.山西中藥，2009，25(11):49－51.