乙型肝炎患者病毒前S1抗原與HBeAg及HBV-DNA相關(guān)性分析

周 秦

(江蘇省南京市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇南京,210006)

乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的一種傳染病,它以肝臟病變?yōu)橹?流行廣泛,危害嚴(yán)重。臨床目前開展的檢測(cè)HBV感染方法主要是檢查傳統(tǒng)的乙肝血清標(biāo)志物(HBsAg、HB-sAb 、HBeAg、HBeAb、HBcAg),乙型肝炎患者病毒前S1抗原(Pre-S1)和乙肝病毒(HBV)DNA。其中,HBeAg一直被臨床認(rèn)為是HBV復(fù)制及傳染性最常用的指標(biāo),而血清HBV-DNA陽(yáng)性檢出常作為HBV復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)[1]。前S1抗原是病毒復(fù)制的另一個(gè)指標(biāo),出現(xiàn)在感染HBV的最早期。本研究對(duì)293份乙肝感染者的血清樣本進(jìn)行了前S1抗原、HBV-DNA 及HBeAg檢測(cè),探討 Pre-S1對(duì)乙肝病毒復(fù)制的診斷價(jià)值,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

選取2012年1—10月在本院門診或住院治療的乙型肝炎患者293例,血清表面抗原均為陽(yáng)性,診斷均符合2000年9月由中華醫(yī)學(xué)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì) 肝病學(xué)會(huì)聯(lián)合修訂的肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。其中男 157例,女 136例,年齡 12～65歲,平均年齡40.5歲。所有受試者抽取空腹靜脈血,分離血清,-20℃保存待檢。

前S1蛋白和HBeAg檢測(cè)采用ELISA雙抗夾心法,試劑由上海市實(shí)業(yè)科華有限公司生產(chǎn),使用E-STAR全自動(dòng)酶免分析儀檢測(cè)。血清HBVDNA檢測(cè)采用熒光定量PCR法,HBV-PCR熒光定量檢試劑由上海復(fù)星醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)(病毒數(shù)量超過1 000 copies/mL為陽(yáng)性),檢測(cè)儀器使用羅氏LightCycler 480。

診斷效能指標(biāo)的計(jì)算公式分別為:敏感度=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性),特異度=真陰性/(假陽(yáng)性+真陰性),準(zhǔn)確性=(真陽(yáng)性+真陰性)/病例總數(shù),陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV)=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陽(yáng)性)。

2 結(jié) 果

293例乙型肝炎患者中,HbeAg和Pre-S1抗原的陽(yáng)性檢出率分別為35.5%和63.1%。以HBV-DNA為標(biāo)準(zhǔn),Pre-S1抗原診斷敏感度為88.5%,特異性為92.3%,準(zhǔn)確性為89.8%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為96.2%;HBeAg抗原診斷敏感度為49.8%,特異性為95.7%,準(zhǔn)確性為64.1%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為96.1%。

以HbeAg檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分組,HBeAg(+)104例中,Pre-S1抗原陽(yáng)性98例,HBV-DNA陽(yáng)性100例,陽(yáng)性檢出率分別為94.2%和96.2%,二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HBeAg(-)189例,Pre-S1抗原陽(yáng)性87例,HBV-DNA陽(yáng)性101例,陽(yáng)性檢出率分別為 46.0%和53.4%。Pre-S1抗原和HBeAg,HBV-DNA相關(guān)性分析。經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析顯示,Pre-S1抗原和HBeAg存在相關(guān)性(χ2=66.96,P<0.01);Pre-S1抗原與HBV-DNA亦有相關(guān)性(χ2=177.69,P<0.01)。

3 討 論

HBV是具有獨(dú)特結(jié)構(gòu)的嗜肝細(xì)胞DNA病毒,它能侵入肝細(xì)胞并在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制繁殖。以往研究認(rèn)為,HBeAg是反映乙肝病毒復(fù)制的標(biāo)志。近年來,前S1抗原作為HBV血清學(xué)的新標(biāo)志物顯示出很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。Pre-S1抗原是HBV的外膜蛋白成分之一,與HBV的入侵肝細(xì)胞、分泌和組裝密切相關(guān),臨床可作為乙肝病毒活動(dòng)性復(fù)制的指標(biāo)[3]。有研究[4]表明,前S1抗原的持續(xù)存在表明有病毒復(fù)制和病毒顆粒存在。目前,血清HBV-DNA仍然是反映病毒復(fù)制的最直接的標(biāo)志[5]。

本研究通過對(duì)293例乙型肝炎患者血清Pre-S1抗原、HBeAg及HBV-DNA進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn):①在HBV患者中,Pre-S1陽(yáng)性檢出率明顯高于HBeAg陽(yáng)性率,其敏感度和準(zhǔn)確度也明顯高于HBeAg,表明Pre-S1抗原檢測(cè)能更敏感地反映HBV的復(fù)制狀況。二者的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值相近表明診斷效能均較高;②在HBeAg陰性的患者中,Pre-S1抗原仍有28.7%的陽(yáng)性率,說明HBeAg轉(zhuǎn)陰病毒復(fù)制仍在。國(guó)外有研究[6]表明,部分乙肝患者和病毒攜帶者體內(nèi)病毒存在前S區(qū)缺失,比例約23%,但前S區(qū)突變并不影響病毒的復(fù)制與裝配,故HBeAg陰性并不代表乙肝病毒停止復(fù)制。而Pre-S1抗原測(cè)定能彌補(bǔ)HbeAg陰性導(dǎo)致的誤診,一般認(rèn)為Pre-S1抗原呈陽(yáng)性,表示病毒復(fù)制極為活躍,傳染性非常強(qiáng);③Pre-S1抗原和HBV-DNA存在顯著關(guān)聯(lián)性(P<0.01),因此在不能進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè)時(shí),可作為判斷病毒在宿主體內(nèi)活動(dòng)的首選指標(biāo)。

綜上所述,Pre-S1抗原可敏感地反映乙肝病毒復(fù)制情況,特別是對(duì)于HBeAg陰性的乙肝患者要進(jìn)一步檢查Pre-S1抗原和HBV-DNA來確認(rèn)是否處于復(fù)制感染期。HBV-DNA是抗病毒治療療效檢測(cè)最好的指標(biāo),但是它對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求較高,一般基層醫(yī)療單位很難開展。Pre-S1抗原和HBV-DNA有良好的相關(guān)性,檢測(cè)費(fèi)用低,具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值,已作為常規(guī)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開展。此外,機(jī)體感染HBV后,最早的免疫應(yīng)答針對(duì)的是Pre-S1抗原,檢測(cè)Pre-S1抗原可反映機(jī)體的免疫狀況,判斷疾病的轉(zhuǎn)歸。

[1]夏邦世,沈忠海,馬紅松,等.慢性乙型肝炎患者HBV前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA與肝功能的關(guān)系[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,27:575.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病分會(huì),肝病學(xué)分會(huì).病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[S].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2001,11(1):56.

[3]Hu WG,Wei J,Yang XX,et al.Expression of overlapping Pre-S1 fragment recombinant proteins for the deteHI1ination of immunogenic domajns in HBsAg Pre-S1 region[J].Acta Biochim Biophys Sin,2004,36(6):397.

[4]Gaeta G B,Stornaiuole G,Precone D F,et al.Epideniological and clinicalburden of chronic hepatitis B Virus/hepatitis C virusinfection.Anulticenter Italian study[J].J Hepatol,2003,39(7):1036.

[5]程鋼,何蘊(yùn)韶.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)乙型肝炎毒[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22(3):135.

[6]Sugau chi F,Ohno T,Orit o E,et al.Influence of hepatitis B virus gene 2 types on the development of preS deletions and advanced liver disease[J].J Med Virol,2003,70(4):5371.