裸花紫珠解酒作用的實(shí)驗(yàn)研究

袁 莉 ，黃 勝 ，2， 顏冬蘭 ，谷陟欣 *

（1.九芝堂股份有限公司，湖南 長沙 410021；2.海南九芝堂藥業(yè)有限公司，海南 ?？?570311）

裸花紫珠解酒作用的實(shí)驗(yàn)研究

袁 莉1，黃 勝1，2， 顏冬蘭1，谷陟欣1*

（1.九芝堂股份有限公司，湖南 長沙 410021；2.海南九芝堂藥業(yè)有限公司，海南 ?？?570311）

目的 研究裸花紫珠的解酒作用。方法 將健康昆明種小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（高、中、低劑量組）、模型組、空白對照組、陽性對照組，通過小鼠平衡失調(diào)實(shí)驗(yàn)，記錄3 min內(nèi)從轉(zhuǎn)棒上掉落小鼠數(shù)；通過乙醇致小鼠睡眠時間的影響實(shí)驗(yàn)，計(jì)算小鼠耐受時間和維持時間；通過乙醇致小鼠急性中毒作用試驗(yàn)，計(jì)算小鼠死亡率；通過制備小鼠急性酒精性肝損傷模型，測定血清ALT、AST指標(biāo)含量。結(jié)果 裸花紫珠可明顯對抗酒精造成的平衡失調(diào)現(xiàn)象，能縮短醉酒引起的睡眠時間；能明顯降低乙醇急性中毒小鼠死亡率；能顯著降低血清中ALT、AST的含量，表明其對酒精性肝損傷具有一定的保護(hù)作用。結(jié)論 裸花紫珠具有明顯的解酒作用。

裸花紫珠；解酒；肝損傷

裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.)為馬鞭草科(Verbenaceae)紫珠屬植物，主產(chǎn)于我國海南、廣東、廣西，是海南的道地藥材，具有收斂、止血、鎮(zhèn)痛、消炎等功效。民間有應(yīng)用其解酒醒酒的習(xí)俗，目前國內(nèi)外尚未見其醒酒領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)研究。本實(shí)驗(yàn)研究了裸花紫珠對實(shí)驗(yàn)動物的解酒保肝作用?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

裸花紫珠片（由海南九芝堂藥業(yè)有限公司提供，批號120101，規(guī)格0.5 g/片），刮去表層薄膜衣，研碎，用蒸餾水溶解成含生藥0.05 g/mL的藥液備用。昆明種小鼠，長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動物科技服務(wù)部提供，動物許可證編號：SCXK（湘）2009-0012。56度紅星二鍋頭，北京紅星股份有限公司生產(chǎn)，用蒸餾水配成含乙醇50%。ALT、AST試劑盒，南京建成生物工程研究所提供，批號111201。海王牌金樽片（深圳市海王健康科技發(fā)展有限公司，批號111202，1 g/片），用蒸餾水溶解為0.05 g/mL藥液備用。

1.2 儀器

YLS-4C轉(zhuǎn)棒式疲勞儀，淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)；DZKW-S-6恒溫水浴鍋，北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司生產(chǎn)；TU1901分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)；Gilson微量移液器，法國吉爾森公司生產(chǎn)；WH-3微型漩渦混合儀，上海滬西分析儀器廠。

1.3 方法[1]

1.3.1 動物分組 健康昆明種小鼠，體質(zhì)量（20±2）g 290只，雌雄各半，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（高、中、低劑量）、模型組、空白對照組、陽性對照組（海王金樽片）6個組，小鼠平衡失調(diào)實(shí)驗(yàn)中，每組20只，其他實(shí)驗(yàn)中每組10只。

1.3.2 給藥方法 實(shí)驗(yàn)組的低、中、高3個劑量組按含生藥2、3、4 g/kg體質(zhì)量灌胃給藥，相當(dāng)于人臨床用藥量的8.3、12.5、16.7倍，模型組和空白對照組給20 mL/kg生理鹽水，陽性對照組按1 g/kg灌胃給藥，相當(dāng)于人臨床用藥量的20倍。

1.3.3 造模方法 在對小鼠急性酒精性肝損傷的影響實(shí)驗(yàn)中，除空白對照組外，各組小鼠均灌胃50%乙醇，5 mL/kg，連續(xù)給予15 d造模。其他實(shí)驗(yàn)中除空白對照組外，各組用50%乙醇以10 mL/kg灌胃造模。

1.3.4 小鼠平衡失調(diào)實(shí)驗(yàn) 各組給藥30 min后實(shí)驗(yàn)組、模型組、陽性對照組用50%乙醇以10 mL/kg灌胃，空白對照組給等體積蒸餾水，分別在給乙醇后15、45、75、120 min 時將動物放入 15 r/min 轉(zhuǎn)棒式疲勞儀內(nèi)，記錄3 min內(nèi)沒有從轉(zhuǎn)棒上掉落小鼠數(shù)。

1.3.5 乙醇致小鼠睡眠時間實(shí)驗(yàn)[2]各組給藥30 min后實(shí)驗(yàn)組、模型組、陽性對照組用50%乙醇以10 mL/kg灌胃，以小鼠翻正反射消失作為睡眠指標(biāo)，記錄各組小鼠翻正反射消失的時間及恢復(fù)時間，計(jì)算出耐受時間（從灌胃乙醇至翻正反射消失的時間）和維持時間（從翻正反射消失到恢復(fù)時間）。

1.3.6 乙醇致小鼠急性中毒作用實(shí)驗(yàn) 各組給藥30 min后，實(shí)驗(yàn)組和模型組、陽性對照組用50%乙醇灌胃20 mL/kg，空白對照組給等體積蒸餾水，觀察5 d內(nèi)各組動物存活率。

1.3.7 對小鼠急性酒精性肝損傷的實(shí)驗(yàn) 除空白對照組外，各組小鼠均灌胃50%乙醇，5 mL/kg，連續(xù)給予15 d，造模期間各組小鼠以標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由飲水，空白對照組給予等量生理鹽水。從造模第5天起，各組連續(xù)給藥10 d，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，眼眶取血，按試劑盒說明書所示方法，用速率法測定血清ALT、AST。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用“”表示，組間比較采用方差齊性檢驗(yàn)及單因素方差分析，以P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠平衡失調(diào)實(shí)驗(yàn)

由表1可知，乙醇灌胃后不同時間段，模型組小鼠明顯平衡失調(diào)，與對照組相比，轉(zhuǎn)棒上未掉落動物數(shù)明顯減少，高劑量組在飲酒后45、75、120 min轉(zhuǎn)棒上未掉落小鼠數(shù)與模型組相比均有極顯著差異（P<0.01），中劑量組在飲酒后120 min轉(zhuǎn)棒上未掉落小鼠數(shù)與模型組相比均有顯著性差異（P<0.05）。表1表明高、中劑量組可明顯對抗酒精造成的平衡失調(diào)現(xiàn)象。

表1 乙醇致小鼠平衡失調(diào)試驗(yàn)結(jié)果比較 （只，n＝20）

2.2 裸花紫珠對小鼠睡眠時間的影響

由表2可知，實(shí)驗(yàn)組和陽性對照組均能使小鼠睡眠耐受時間增長，與模型組相比，高劑量組具有極顯著差異（P<0.01），中劑量組與模型組具有顯著性差異（P<0.05）；實(shí)驗(yàn)組和陽性對照組均能使小鼠睡眠維持時間縮短，與模型組相比均有極顯著差異（P<0.01）。表2表明高、中、低劑量組均能縮短醉酒引起的睡眠時間，具有醒酒作用。

表2 裸花紫珠對小鼠睡眠時間影響的比較（，n＝10）

表2 裸花紫珠對小鼠睡眠時間影響的比較（，n＝10）

注：與模型組比較＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組 別模型組高劑量組中劑量組低劑量組陽性對照組醉酒數(shù)10 8999睡眠耐受時間（min）24.94±8.73 36.27±7.05＊＊32.16±7.06＊29.83±5.07 31.18±5.16＊睡眠維持時間（min）281.2±29.38 133.9±23.31＊＊171.5±20.96＊＊184.5±19.37＊＊175.3±18.72＊＊

2.3 裸花紫珠對小鼠急性中毒作用的影響

由表3可知，實(shí)驗(yàn)組的小鼠死亡率均低于模型組，各實(shí)驗(yàn)組和陽性對照組與模型組比較均有極顯著差異（P<0.01）。表3表明高、中、低劑量組能顯著降低乙醇急性中毒小鼠死亡率，對乙醇致急性中毒具有預(yù)防作用。

表3 裸花紫珠對小鼠急性中毒作用的比較（只，n＝20）

2.4 裸花紫珠對小鼠急性酒精性肝損傷的影響

由表4可知，各實(shí)驗(yàn)組和陽性對照組均能降低血清中ALT、AST的含量，與模型組比較具有極顯著差異（P<0.01）。表4表明高、中、低劑量組均能顯著降低血清中ALT、AST的含量，對肝臟具有一定的保護(hù)作用。

3 討論

通過上述實(shí)驗(yàn)，裸花紫珠各劑量組和陽性對照組可降低從轉(zhuǎn)棒上掉落的小鼠數(shù)，可增長鼠睡眠耐受時間，可縮短小鼠睡眠維持時間，可提高小鼠乙醇急性中毒存活率，可降低血清中ALT、AST的含量，且高、中劑量組效果優(yōu)于低劑量組，高劑量組效果優(yōu)于陽性對照組。實(shí)驗(yàn)證實(shí)了中、高劑量組可以明顯對抗酒精造成的平衡失調(diào)現(xiàn)象，能縮短醉酒引起的睡眠時間，具有醒酒作用，能明顯降低乙醇急性中毒小鼠死亡率，對乙醇致急性中毒具有預(yù)防作用，能顯著降低血清中ALT、AST的含量，對肝臟具有一定的保護(hù)作用。

表4 裸花紫珠對小鼠急性酒精性肝損傷血清中ALT、AST 含量影響的比較 （，n＝10）

表4 裸花紫珠對小鼠急性酒精性肝損傷血清中ALT、AST 含量影響的比較 （，n＝10）

注：與空白對照組比較＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與模型組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

組 別空白對照組模型組高劑量組中劑量組低劑量組陽性對照組ALT（U／L）60.62±8.21 87.68±7.16＊＊72.43±7.94▲▲＊＊76.18±8.07▲▲＊＊79.88±6.43▲▲＊＊76.87±6.61▲▲＊＊AST（U／L）92.62±7.72 142.71±11.48＊＊115.36±8.13▲▲＊＊127.75±10.45▲▲＊＊131.36±11.12▲＊＊124.41±9.03▲▲＊＊

肝臟是酒精代謝的主要臟器，酒精在肝臟中代謝過量時，肝細(xì)胞就會產(chǎn)生過量的自由基，導(dǎo)致肝損傷，使AST與ALT釋放入血[3]。乙醇及其在肝細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)生的毒性代謝產(chǎn)物所引起的代謝紊亂是導(dǎo)致酒精性肝損傷的主要原因。本實(shí)驗(yàn)中各劑量組的血清AST和ALT活性較模型組明顯降低，表明其對肝損傷有一定的保護(hù)作用。

現(xiàn)有研究表明裸花紫珠成分復(fù)雜，主要含有黃酮類、萜類、鞣質(zhì)類等成分，其藥理作用廣泛，主要表現(xiàn)在收斂止血、消腫鎮(zhèn)痛、抗菌消炎等方面。其中主要活性物質(zhì)黃酮類活性成分如芹菜素、木犀草素、大波斯菊苷、岳樺素、木犀草苷等，可能通過增強(qiáng)肝臟的解毒功能和酶活力，從而具有解酒、醒酒、保肝護(hù)肝的作用，具有較好的應(yīng)用前景，裸花紫珠的解酒機(jī)制及酒精急慢性中毒引起的臟器損傷的修復(fù)作用還有待進(jìn)一步研究。

［1］陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)（第2版）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：660.

［2］徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)（第2版）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1994：201，642.

［3］儲金秀.蕎麥花葉蘆丁對小鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用［J］.江蘇醫(yī)藥，2011，37（5）：503－505.

（本文編輯 楊 瑛）

Experimental study on effects of Callicarpa nudiflora on alleviating the alcohol intoxication

YUAN Li1， HUANG Sheng1,2， YAN Dong-lan1， GU Zhi-xin1*
(1.Jiuzhitang Co.,Ltd,Changsha,Hunan 410021,China；2.Hainan Jiuzhitang Pharmaceutical Co.,Ltd,Haikou,Hainan 570311,China)

Objective To study the effects of Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.on alleviating the alcohol intoxication.Methods The mice were randomly divided into Callicarpa nudiflora groups(including high dose group, medium dose group and low dose group), model group,blank control group and positive group.The number of mice dropped from rolling stick was observed within 3 minutes by imbalance test of intoxicated mice;the tolerance time and maintenance time of intoxicated mice were observed by testing the sleepy time;the death rate was observed by testing the acute intoxication induced by alcohol;the indexes of the liver injury,such as serum AST and ALT were evaluated in the mouse model of acute alcoholic liver injury.Results Callicarpa nudiflora could act against imbalance phenomena,reduce sleepy time,decrease the death rate and serum AST and ALT content and showed protective effects on alcohol-induced liver injury in mice.Conclusion Callicarpa nudiflora has effects on anti-inebriation.

Callicarpa nudiflora； anti-inebriation； hepatic injury

R965.2

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2013.03.005.017.03

2012－12－10

國家科技支撐計(jì)劃（SQ2010BAJY1411-07-05）；國家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)學(xué)科中醫(yī)藥工程學(xué)（國中醫(yī)藥人教發(fā)【2012】32號）。

袁 莉(1982-)，女，湖南長沙人，工程師，主要研究方向：中藥新藥研究與開發(fā)。

* 谷陟欣，男，碩士，高級工程師。 E－mail：gzx@hnjzt.com。