人胎盤(pán)的體外研究模型及其應(yīng)用進(jìn)展

李婷婷，劉海燕，謝建忠，蔣學(xué)華，王 凌

(1.西雙版納傣族自治州人民醫(yī)院藥劑科，云南景洪 666100;2.四川大學(xué)華西藥學(xué)院臨床藥學(xué)與藥事管理學(xué)系，四川成都 610041)

胎盤(pán)由胎兒的絨毛膜與母體的底蛻膜共同構(gòu)成，是妊娠期間胎兒與母體聯(lián)系的重要器官，擔(dān)負(fù)著物質(zhì)交換、代謝、分泌和屏障等生理功能。位于母體血液循環(huán)和胚胎循環(huán)之間的滋養(yǎng)層細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞以及二者間的基膜能阻止一些外來(lái)化合物由母體進(jìn)入胚胎，起到一定的生理屏障的功能，稱(chēng)胎盤(pán)屏障。既往一般認(rèn)為胎盤(pán)屏障功能僅依賴(lài)于生物膜的半透性，近年的研究揭示，胎盤(pán)上同時(shí)存在細(xì)胞色素P450(cytochrome P450，CYP)超家族、P－糖蛋白(P－glycoprotein，P－gp)、乳腺癌(干細(xì)胞)耐藥蛋白(breast cancer resistance protein，BCRP)、有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)肽(organic anion transporting polypeptides，OATP)、有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(organic cation transporter，OCT)和單羧基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(monocarboxylate transporter，MCT)等多種代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白［1］，共同決定母體化合物是否能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒循環(huán)，因此，僅依賴(lài)藥物基本生化特征難以準(zhǔn)確預(yù)測(cè)其胎盤(pán)透過(guò)率。然而，了解藥物的胎盤(pán)屏障透過(guò)能力對(duì)妊娠期用藥至關(guān)重要，使用易透過(guò)胎盤(pán)屏障的藥物可能影響胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育，甚至造成畸形和死胎;另一方面，若母體嚴(yán)重疾病得不到及時(shí)有效的治療同樣影響胎兒的發(fā)育，因此，預(yù)測(cè)藥物的胎盤(pán)透過(guò)性能意義深遠(yuǎn)。

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，胎兒宮內(nèi)治療已成為降低圍產(chǎn)兒死亡率以及提高了新生兒生存質(zhì)量的一種重要手段。在宮內(nèi)治療的眾多方法中，通過(guò)母體給藥進(jìn)行藥物治療具有安全、無(wú)創(chuàng)和簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，廣泛適用于宮內(nèi)胎兒各種感染性疾病、內(nèi)分泌疾病和心律失常等疾病的治療［2－3］。然而，胎盤(pán)屏障是很多藥物進(jìn)入胎兒血液循環(huán)發(fā)揮治療作用的一大障礙，不同藥物透過(guò)胎盤(pán)的性能不同，在選用藥物時(shí)考慮其透過(guò)胎盤(pán)的能力是治療成功與否的關(guān)鍵?；谔ケP(pán)上分布的眾多轉(zhuǎn)運(yùn)體和代謝酶是藥物胎盤(pán)屏障的重要物質(zhì)基礎(chǔ)［4］，使用藥學(xué)或其他方法干預(yù)其功能或表達(dá)可能是經(jīng)母體給藥進(jìn)行胎兒宮內(nèi)治療的一個(gè)新策略。

受醫(yī)學(xué)倫理和研究方法的限制，目前我國(guó)藥物胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制及其干預(yù)策略方面的研究尚處于初始階段。然而，研究胎盤(pán)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)意義重大，不僅可以指導(dǎo)妊娠期合理用藥，還能為優(yōu)化胎兒宮內(nèi)藥物治療提供科學(xué)的依據(jù)，有必要對(duì)其進(jìn)行更深入的了解。本文綜述了胎盤(pán)的發(fā)育過(guò)程及胎盤(pán)小葉灌流、傳代細(xì)胞系、原代細(xì)胞、外植體及絨毛組織塊等目前體外研究人胎盤(pán)的主要模型及其特點(diǎn)做一概述，以便于有針對(duì)性地選擇合適的模型進(jìn)行胎盤(pán)研究。

1 胎盤(pán)的發(fā)育過(guò)程及其代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)

胎盤(pán)為胚胎和母體子宮之間的一個(gè)圓形或橢圓形盤(pán)狀器官，有兩個(gè)面，胎兒面光滑，由一條臍帶與胚胎相連，母體面粗糙，與子宮內(nèi)壁緊密接觸，其主體部分為樹(shù)枝狀的絨毛組織，絨毛的表層是滋養(yǎng)層上皮，中層為結(jié)締組織和血管。胎盤(pán)有兩套血液循環(huán)，絨毛中血管屬胎兒系統(tǒng)，絨毛間隙與蛻膜區(qū)的屬母體系統(tǒng)。該結(jié)構(gòu)使胎盤(pán)能完成其最基本的功能—物質(zhì)交換:將胚胎發(fā)育所需的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)源源不斷地從母體供給胎兒，同時(shí)將胚胎產(chǎn)生的代謝物運(yùn)送回母體排出。成熟的胎盤(pán)由17～21個(gè)胎盤(pán)小葉組成，含有滋養(yǎng)層細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、霍夫鮑爾細(xì)胞及血細(xì)胞等多種細(xì)胞成分，表達(dá)多種代謝酶及轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

胎盤(pán)和胎兒都是從同一個(gè)細(xì)胞——受精卵演變而來(lái)，胎盤(pán)是胚外結(jié)構(gòu)，胚泡外壁的滋養(yǎng)層細(xì)胞是胎盤(pán)的早期結(jié)構(gòu)，著床后分化成合體滋養(yǎng)層細(xì)胞。胚胎發(fā)育至18～20 d時(shí)，作為胎盤(pán)主要結(jié)構(gòu)的絨毛組織逐漸形成，約在受精后第3周，絨毛內(nèi)血管逐漸形成開(kāi)始建立胎兒循環(huán)。第6孕周開(kāi)始，使用三維陰道超聲及多普勒血管造影可見(jiàn)母體絨毛間逐漸增強(qiáng)的血流［5］。妊娠3個(gè)月左右，胎盤(pán)的基本輪廓逐漸形成，但僅有6～10個(gè)胎盤(pán)小葉，絨毛內(nèi)血管分支較稀疏，管徑也較細(xì)。之后數(shù)月，其形態(tài)和功能逐漸完善，最終發(fā)育成成熟胎盤(pán)。

研究發(fā)現(xiàn)，早在合體滋養(yǎng)細(xì)胞階段，面對(duì)母體的刷狀緣以及面對(duì)胎兒的基底膜上即開(kāi)始表達(dá)多種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白［6］。按其功能可分為攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，攝取轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白增加某些大分子物質(zhì)或營(yíng)養(yǎng)成分的胎盤(pán)透過(guò)率，而外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白能阻止許多外源性異物進(jìn)入胎兒循環(huán)。胎盤(pán)表達(dá)的主要攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體包括 OATP4A1，OATP2B1，OCTN2及OCTN1，這些攝取蛋白主要負(fù)責(zé)從母體血中攝取大分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，許多藥物也通過(guò)它們進(jìn)入胎盤(pán)，如口服降糖藥二甲雙胍即通過(guò)OCT3進(jìn)入胎盤(pán);而P－gp，BCRP和多藥耐藥相關(guān) 蛋 白 2(multidrug resistance－associated protein 2，MRP2)等外排蛋白可將進(jìn)入胎兒側(cè)的藥物重新排入母體側(cè)，是導(dǎo)致眾多藥物胎盤(pán)透過(guò)率低的主要原因。其中隸屬ATP結(jié)合盒(ATP－binding cassette，ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)體家族的P－gp是胎盤(pán)表達(dá)的一種典型的外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能阻止許多有害物質(zhì)及藥物透過(guò)胎盤(pán)，對(duì)胚胎的發(fā)育起到一定的保護(hù)作用［7］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，抑制胎盤(pán)上的P－gp顯著增加伊維菌素(ivermectin)的致畸性［8］。然而，隨著合體滋養(yǎng)層細(xì)胞逐漸發(fā)育成成熟胎盤(pán)，其P－gp的表達(dá)量逐漸降低，研究發(fā)現(xiàn)，妊娠早期(60～90 d)胎盤(pán)表達(dá)的P－gp比足月胎盤(pán)高約44.8倍［9］。胎盤(pán)上表達(dá)的各種代謝酶在一定程度上也阻止外源性異物透過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒循環(huán)。胎盤(pán)發(fā)育的不同階段表達(dá)的代謝酶不同，第一孕期可能僅少數(shù) CYP代謝酶在mRNA水平有表達(dá)［10］。根據(jù)目前的研究，胎盤(pán)上有功能表達(dá)的CYP酶亞型包括CYP1A1，CYP4B1，CYP19以及新近發(fā)現(xiàn)的CYP2S1［11－13］。然而，這些代謝酶的表達(dá)受眾多因素的調(diào)節(jié)，如近期的研究發(fā)現(xiàn)，母親肥胖可導(dǎo)致胎盤(pán)上CYP1A1 的表達(dá)明顯降低［14］。此外，Demendi等［15］發(fā)現(xiàn)，11β－羥基類(lèi)固醇脫氫酶 2(11β－h(huán)ydroxysteroid dehydrogenase type 2，11βHSD2)也是胎盤(pán)屏障的一個(gè)重要組成成分，其主要功能是在母體血糖升高時(shí)保護(hù)胎兒免受高糖損傷。

2 藥物胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)的體外研究方法及應(yīng)用

2.1 胎盤(pán)小葉灌流

2.1.1 胎盤(pán)小葉灌流方法

體外人體胎盤(pán)灌流是20世紀(jì)60年代發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)，其原理為采用剛分娩出的人體胎盤(pán)，模擬體內(nèi)條件確保胎盤(pán)的生物活性，建立體外母體循環(huán)和胎兒循環(huán)，在母體側(cè)灌流液中加入一定濃度的待測(cè)藥物或化學(xué)物，平衡一段時(shí)間后，通過(guò)檢測(cè)胎兒側(cè)灌流液中待測(cè)物濃度確定其胎盤(pán)透過(guò)性。但由于整體胎盤(pán)灌流成功率極低，70年代被簡(jiǎn)化為胎盤(pán)小葉灌流，是目前唯一在器官水平研究胎盤(pán)屏障功能的模型，近期的一項(xiàng)分析顯示該模型與體內(nèi)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)具有很好的相關(guān)性，能用于預(yù)測(cè)體內(nèi)胎盤(pán)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)情況，使用蛋白結(jié)合和血液pH調(diào)節(jié)該模型檢測(cè)結(jié)果可使其對(duì)體內(nèi)情況的預(yù)測(cè)更精確［16］。

2.1.2 胎盤(pán)小葉灌流模型特點(diǎn)

雖然該模型能很好地模擬體內(nèi)藥物胎盤(pán)透過(guò)情況，但由于其操作難度較高，成功率低，且胎盤(pán)小葉體外存活時(shí)間有限，難以用于大規(guī)模的藥物篩選。試驗(yàn)期間需確保胎盤(pán)具有生物活性也增加了該模型的應(yīng)用難度，常用的活性監(jiān)測(cè)方法包括葡萄糖消耗量、氧消耗、pH值、乳酸生成量和胎盤(pán)激素的分泌以及組織形態(tài)變化等。該模型的具體細(xì)節(jié)如胎兒和母體循環(huán)的建立方法、灌流速度、灌流液總量、含氧混合氣體組成等各實(shí)驗(yàn)室均不完全一致。

模型建立是否成功的評(píng)價(jià)亦無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，一般認(rèn)為胎兒循環(huán)灌流液損失量越小越好，可以接受的滲漏丟失量范圍為2～3 ml［17］;評(píng)價(jià)離體小葉灌流模型的另一方法為選用一種或幾種對(duì)胎盤(pán)具有穩(wěn)定透過(guò)性的藥物從母體側(cè)灌流，通過(guò)計(jì)算該物質(zhì)的胎盤(pán)透過(guò)率評(píng)價(jià)該模型是否成功，最常用的標(biāo)記物為解熱鎮(zhèn)痛藥安替比林，也有試驗(yàn)選用葡萄糖、菊糖、肌酐等。

2.1.3 胎盤(pán)小葉灌流模型應(yīng)用

胎盤(pán)小葉灌流模型已被廣泛用于足月及不足月胎的藥物透過(guò)情況評(píng)估。有研究使用該模型比較了足月胎盤(pán)(38～41周)和不足月胎盤(pán)(27～34周)對(duì)P－gp底物美沙酮的通透性，結(jié)果顯示足月胎盤(pán)對(duì)美沙酮的通透性較不足月胎盤(pán)高30%［18］。這與先前的研究結(jié)果P－gp在胎盤(pán)的發(fā)育過(guò)程中表達(dá)量逐漸降低相一致。

近期的一項(xiàng)研究使用該模型評(píng)估了抗病毒藥物磷酸奧司他韋的體內(nèi)活性代謝物——奧司他韋羧酸鹽的胎盤(pán)透過(guò)性能，用 H－3 同位素標(biāo)記的奧司他韋羧酸鹽350 μg·L－1和14C同位素標(biāo)記的安替比林20 mg·L－1的灌流液從母體側(cè)灌入，高效液相色譜法檢測(cè)母體側(cè)、胎盤(pán)組織及胎兒側(cè)灌流液中原型藥物及其所有代謝產(chǎn)物，灌流4 h后，約21%的藥物進(jìn)入胎兒循環(huán);13%的藥物滯留于胎盤(pán)小葉;66%留在母體側(cè)灌流液中，其胎盤(pán)透過(guò)率為安替比林的47%，證實(shí)奧司他韋羧酸鹽存在胚胎暴露［19］。同樣，Nanovskaya 等［20］用類(lèi)似的方法證實(shí)萬(wàn)古霉素及特拉萬(wàn)星(telavancin)存在低胎盤(pán)透過(guò)率。

此外，胎盤(pán)小葉體外灌流還可用于研究個(gè)體間藥物透過(guò)差異的原因，Tertti等［21］近期的研究顯示，可溶性物質(zhì)載體(solut carrier，SLC)家族的SLCO1B3的基因多態(tài)性可能影響口服降糖藥瑞格列奈的胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)，遺憾的是，由于該實(shí)驗(yàn)樣本量較小，未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.2 人胎盤(pán)傳代細(xì)胞系

2.2.1 人胎盤(pán)常用傳代細(xì)胞系及其特點(diǎn)

毒理學(xué)研究常用的人胎盤(pán)細(xì)胞株有3種:BeWo，JAR和JEG－3，均來(lái)源于絨毛膜癌細(xì)胞，均表達(dá)于人體胎盤(pán)相似的異物代謝酶，如CYP1A1，CYP19等［22］，均可用于研究胎盤(pán)激素分泌、胎盤(pán)細(xì)胞對(duì)外源性異物的攝取、外排以及代謝。BeWo，JAR和JEG－3也可用于研究胎盤(pán)的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)，但值得注意的是，鑒于傳代細(xì)胞系的來(lái)源及永生化處理，其轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)與原代滋養(yǎng)細(xì)胞不完全一致:BeWo，JAR和JEG－3細(xì)胞株的P－gp表達(dá)均比從足月胎盤(pán)分離的原代滋養(yǎng)細(xì)胞低得多，有的甚至低于檢測(cè)限［23］;而對(duì)于 BCRP，BeWo 和JAR的表達(dá)與人體胎盤(pán)相似，JEG－3較低;BeWo和JAR細(xì)胞的ABCC2較原代滋養(yǎng)細(xì)胞高而ABCC1較原代滋養(yǎng)細(xì)胞低。BeWo細(xì)胞保留了許多人滋養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征［24］，其形態(tài)類(lèi)似含有少量合胞體細(xì)胞的未分化滋養(yǎng)細(xì)胞。與BeWo細(xì)胞株不同，JEG－3細(xì)胞更多地保存了合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的生理和生化特征［25］。

2.2.2 傳代細(xì)胞的研究應(yīng)用

細(xì)胞水平研究胎盤(pán)屏障功能的常用細(xì)胞株為BeWo b30，它能在Transwell培養(yǎng)板上長(zhǎng)成緊密極化的單層細(xì)胞。一般認(rèn)為此模型與體內(nèi)胎盤(pán)屏障真實(shí)情況有一定的差距，有趣的是，對(duì)多種底物藥物的研究發(fā)現(xiàn)該模型與胎盤(pán)小葉灌注模型結(jié)論高度一致，后又有研究者使用該模型研究了安替比林、草甘膦、苯甲酸、咖啡因等4種藥物的胎盤(pán)透過(guò)性，經(jīng)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)其與體內(nèi)情況也能很好地吻合［26］。

值得注意的是，以上涉及的藥物均不是外排性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P－gp底物，鑒于細(xì)胞系胎盤(pán)屏障模型上P－gp表達(dá)顯著低于生理情況，用其預(yù)測(cè)P－gp底物的體內(nèi)胎盤(pán)透過(guò)率可能欠妥。盡管在所有BeWo細(xì)胞克隆中，b30克隆株的P－gp表達(dá)最高，其與生理情況下胎盤(pán)的P－gp表達(dá)量仍存在較大差距。因此，有研究者嘗試用載有ABCB1基因的病毒載體轉(zhuǎn)染BeWo細(xì)胞，定量PCR檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染細(xì)胞P－gp的表達(dá)量可達(dá)常用BeWo細(xì)胞的10倍左右，有研究者進(jìn)一步使用該轉(zhuǎn)染模型驗(yàn)證了P－gp介入了糖皮質(zhì)激素的胎盤(pán)屏障［27］。理論上使用過(guò)表達(dá)P－gp且能形成單層緊密連接的傳代細(xì)胞系能較好地模擬胎盤(pán)屏障用于研究P－gp底物藥物的胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)，但目前相關(guān)報(bào)道仍較少，有待更多的研究對(duì)該模型加以驗(yàn)證。

另外，一些研究考察了該模型對(duì)非藥物的有害物質(zhì)的屏障作用:Nielsen等［28］使用該模型檢驗(yàn)了一種致癌性物質(zhì)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的胎盤(pán)透過(guò)能力，發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)的胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)存在延遲現(xiàn)象，而這一結(jié)論也被體外胎盤(pán)灌流模型證實(shí);最近的一項(xiàng)通過(guò)該模型和胎盤(pán)小葉灌流模型考察赭曲霉毒素A胎盤(pán)透過(guò)能力的研究也證實(shí)，兩模型得出的結(jié)論一致——僅少量(約3%)的赭曲霉毒素A能透過(guò)胎盤(pán)［29］。

近期的研究還發(fā)現(xiàn)，JEG－3和BeWo b24也有長(zhǎng)成單層極化緊密連接的潛力，經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)臈l件優(yōu)化有望成為體外研究胎盤(pán)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)的模型［30－31］。

2.3 原代細(xì)胞

原代的人胎盤(pán)絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞也可被分離、消化、純化，但過(guò)程較復(fù)雜［32］，一般一次分離較多的細(xì)胞，凍藏后分次取用。顯然，相對(duì)于癌細(xì)胞株，原代細(xì)胞能更真實(shí)地展現(xiàn)正常胎盤(pán)組織的生理生化特點(diǎn)。遺憾的是，原代胎盤(pán)細(xì)胞不能增殖，無(wú)法形成緊密連接的單層細(xì)胞，也就不能用于體外模擬胎盤(pán)屏障。另外，原代細(xì)胞在體外培養(yǎng)一段時(shí)間后，其轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)可能會(huì)發(fā)生變化。Evseenko等［23］報(bào)道，體外培養(yǎng)120 h后，從足月胎盤(pán)分離的滋養(yǎng)細(xì)胞中P－gp明顯降低，而B(niǎo)CRP卻升高。這些特點(diǎn)限制了原代細(xì)胞在藥物胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)研究中的應(yīng)用。

2.4 胎盤(pán)外植體及絨毛組織

人體胎盤(pán)外植體及絨毛組織培養(yǎng)廣泛用于研究胎盤(pán)的轉(zhuǎn)運(yùn)體、代謝酶表達(dá)以及內(nèi)分泌功能。因絨毛組織塊內(nèi)尚含有大量的間充質(zhì)干細(xì)胞(成纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等)，近期也用于研究胎盤(pán)的增殖、分化［32］，還用于研究增殖和分化相關(guān)信號(hào)通路及其影響因素［33］。同樣，外植體及絨毛組織因不是完整的半透膜不能用于評(píng)價(jià)藥物的胎盤(pán)透過(guò)性。且與原代細(xì)胞不同的是，用于培養(yǎng)的胎盤(pán)組織必須是新鮮的，不能凍融，這更加增加了其實(shí)際應(yīng)用的難度。

分離疾病狀況下胎盤(pán)組織檢測(cè)某些成分如轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)或功能變化既可用于其病理生理學(xué)研究，在一定程度上也可以為該疾病的診斷提供新思路。例如，最近的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)羊水過(guò)少的足月胎盤(pán)上水通道蛋白8和水通道蛋白9的表達(dá)明顯低于羊水正常的胎盤(pán)，這兩種蛋白在羊水的形成和轉(zhuǎn)運(yùn)中均起到非常重要的作用，可能能通過(guò)上調(diào)其表達(dá)來(lái)治療羊水過(guò)少［34］。

2.5 細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)研究

使用不同的離心方法可分離滋養(yǎng)細(xì)胞的亞成分，如微粒體和細(xì)胞質(zhì)等用于研究代謝酶對(duì)外源性異物的代謝能力［35］。刷狀緣和基膜上的另一亞結(jié)構(gòu)—膜囊泡因天然表達(dá)某些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白也被分離用于研究基本轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，也可在分離的膜囊泡上過(guò)表達(dá)某些轉(zhuǎn)運(yùn)體來(lái)研究其對(duì)底物的轉(zhuǎn)運(yùn)特點(diǎn)［36］。近期的一項(xiàng)研究即利用足月胎盤(pán)微絨毛漿膜中分離出來(lái)的囊泡研究甲狀腺素激素的母體－胎兒轉(zhuǎn)運(yùn)，發(fā)現(xiàn)母體的T(3)和T(4)主要通過(guò)MCT8和MCT10轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入胎兒循環(huán)［1］。

3 展望

人體胎盤(pán)因分娩后易獲得而廣泛用于體外研究，目前已建立多種體外研究胎盤(pán)功能的方法及試驗(yàn)?zāi)Ｐ?。在眾多的方法中，只有胎盤(pán)小葉灌流模型及能長(zhǎng)成單層緊密連接的細(xì)胞模型可用于研究藥物或其他化合物胎盤(pán)屏障透過(guò)能力，而原代滋養(yǎng)體細(xì)胞分離培養(yǎng)、胎盤(pán)組織塊分離、細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)分離以及其他的癌源性細(xì)胞株只可用于轉(zhuǎn)運(yùn)體及代謝酶的功能或表達(dá)、胎盤(pán)的增殖分化及內(nèi)分泌功能等研究。最近的研究表明，體外胎盤(pán)小葉灌流模型能很好地預(yù)測(cè)體內(nèi)藥物胎盤(pán)藥物透過(guò)率，但其建模困難和存活時(shí)間短(2～6 h)不適于大規(guī)模檢測(cè)藥物的胎盤(pán)屏障透過(guò)率。用永生細(xì)胞株建立的胎盤(pán)屏障細(xì)胞模型可用于大量藥物的透過(guò)性檢測(cè)，且近期的研究也證實(shí)，對(duì)于多種藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)，該模型與小葉灌流模型或體內(nèi)藥物透過(guò)情況存在較好的一致性，然而，檢測(cè)所用的藥物種類(lèi)有限，且尚未涉及 P－gp等轉(zhuǎn)運(yùn)體的底物藥物，而B(niǎo)eWo 30b和JEG－3等細(xì)胞株上轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)與原代滋養(yǎng)體細(xì)胞存在較大差異，該模型能在多大范圍內(nèi)預(yù)測(cè)體內(nèi)藥物胎盤(pán)透過(guò)情況有待進(jìn)一步探討。

總的來(lái)說(shuō)，目前已有多種體外研究胎盤(pán)功能的試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，但尚無(wú)一種方法能有效地對(duì)藥物的胎盤(pán)透過(guò)能力進(jìn)行常規(guī)篩查，有待建立更完善的體外方法來(lái)預(yù)測(cè)藥物體內(nèi)胎盤(pán)屏障透過(guò)情況。對(duì)現(xiàn)有模型進(jìn)行優(yōu)化，使其在符合研究要求的同時(shí)更接近生理狀況可能為一個(gè)可行的策略，如轉(zhuǎn)染傳代細(xì)胞系使其過(guò)表達(dá)外排轉(zhuǎn)運(yùn)體用于評(píng)價(jià)其底物藥物的胎盤(pán)透過(guò)情況。研究藥物的胎盤(pán)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制對(duì)解析藥物有效性、安全性和毒性具有重要意義，盡管目前該領(lǐng)域的研究尚欠缺系統(tǒng)性，研究模型也存在各自的局限性，隨著分子生物學(xué)、基因工程等現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生學(xué)的不斷發(fā)展，研究模型的創(chuàng)新和優(yōu)化將為該領(lǐng)域的發(fā)展帶來(lái)廣闊的前景。

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