RhD血型鑒定在臨床輸血中的應(yīng)用

張曉飛

為有效防止急慢性溶血性輸血反應(yīng)以及新生兒溶血病的發(fā)生，確保臨床輸血安全，降低輸血反應(yīng)率，減少醫(yī)療糾紛。自2003年起，本院以及來本院申請輸血和備血的患者除繼續(xù)進(jìn)行ABO血型鑒定外，還同時進(jìn)行了RhD血型鑒定。現(xiàn)將4146例RhD血型鑒定結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至6月期間在本院申請備血、輸血的各科患者及新生兒共4146例。其中內(nèi)科963例，外科1394例，婦產(chǎn)科2340例，新生兒17例。所有標(biāo)本均為新鮮采集的血液。所用試劑RhD(lgM)血型定型試劑(單克隆抗體)，RhD血型鑒定卡(微柱凝膠)。分別購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司和長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司。均在有效期內(nèi)使用。使用FYQ型免疫微柱孵育器(長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn))。

1.2 方法 對送檢血樣同時采用微柱凝膠法及試管法進(jìn)行RhD血型鑒定。(1)紅細(xì)胞標(biāo)本的制備:將采集的標(biāo)本配制成0.5%～8%和3%～5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液。(2)微柱凝膠法:①將微柱凝膠試劑卡編號;②將待檢的紅細(xì)胞標(biāo)本50μl加入編號的微管中;③即刻使用微柱凝膠專用離心機(jī)離心5 min，2 min 900rpm;3 min 1500rpm;④取出肉眼觀察結(jié)果。⑤結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)按試劑盒說明書。陽性:紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復(fù)合物浮在凝膠表面或膠中。反應(yīng)強(qiáng)度:特異性紅細(xì)胞抗原抗體復(fù)合物位于凝膠表面為強(qiáng)陽性反應(yīng)，復(fù)合物在膠中為弱陽性反應(yīng);愈靠近膠底部顆粒愈小，反應(yīng)愈弱。陰性:被檢紅細(xì)胞抗原無相應(yīng)的抗原與抗體結(jié)合，不出現(xiàn)特異性抗原抗體復(fù)合物，紅細(xì)胞沉于微柱凝膠的尖底部。(3)試管法:①加一滴抗D試劑于預(yù)先標(biāo)記號的試管中;②再加一滴約3%～5%的被檢紅細(xì)胞懸液于試管中，混勻。③以15 s 3400rpm離心;取出檢查是否溶血(溶血可能是陽性結(jié)果，或者是細(xì)菌污染)，然后輕輕搖晃，使細(xì)胞再懸浮起來。觀察凝集情況，并立即記錄結(jié)果。必要時可借助顯微鏡。凝集者為陽性，若是陰性結(jié)果，需在37℃孵育15～30 min，然后再離心觀察結(jié)果，結(jié)果若呈陰性需進(jìn)一步確認(rèn)是否是弱D。

2 結(jié)果

本組4146例中檢出Rh(D)抗原陰性者9例，男2例，女7例;均為漢族，Rh(D)陰性率為0.22%，9例Rh(D)陰性者，

3 討論

人類Rh血型系統(tǒng)自1939年被發(fā)現(xiàn)以來，因可導(dǎo)致新生兒溶血病(HDA)、溶血性輸血反應(yīng)而成為紅細(xì)胞血型中僅次于ABO的重要系統(tǒng)［1］。Rh系統(tǒng)內(nèi)有45種不同的抗原，D抗原最為重要，根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無，可分類紅細(xì)胞為Rh陽性或Rh陰性。大約85%白種人為Rh陽性(中國人約為99.6%)，其余 15% 為 Rh 陰性(中國人約為 0.4%)［2］。RH血型系中，D抗原的抗原性為最強(qiáng)，約50% ～75%的Rh陰性的個體，通過輸血和妊娠，可受D抗原陽性紅細(xì)胞免疫而產(chǎn)生抗D，因此在輸血治療和新生兒溶血病的診斷、治療中，D抗原的重要性僅次于A和B抗原［3］。

RH血型系在輸血治療和胎母免疫引起的新生兒溶血病的臨床醫(yī)學(xué)中有著很重要的意義。近年來，臨床上因Rh血型不合引起的輸血反應(yīng)和母嬰Rh血型不合的妊娠所引起的新生兒溶血病時有報(bào)道，因此，在血庫的實(shí)踐工作中對患者進(jìn)行ABO血型鑒定的同時也進(jìn)行RhD血型鑒定，并將其作為血庫的常規(guī)檢查項(xiàng)目是十分必要的，因?yàn)獒t(yī)院血庫一般沒有貯備和制備Rh陰性血液的條件而血站對Rh陰性血液的貯備也是少量的。又由于我國漢族人群中RhD陰性者僅占0.2%～0.5%左右，這就導(dǎo)致了RhD陰性血源緊張的現(xiàn)實(shí)，如果在術(shù)前2 h(急診除外)檢測受血者的Rh抗原和ABO血型，一旦發(fā)現(xiàn)Rh陰性，可由充足的時間尋找血源，對危、重、急患者以及需要輸血治療的RhD陰性患者，在初次輸血時，給予RhD相配合的血液，以避免多次輸血后產(chǎn)生同種抗體，給今后的輸血工作帶來困難和風(fēng)險(xiǎn)，對于保證患者的安全輸血具有深遠(yuǎn)的意義。

總之，RhD血型系統(tǒng)在臨床輸血中應(yīng)受到醫(yī)務(wù)人員的高度重視，將Rh血型鑒定作為血型篩查的常規(guī)檢驗(yàn)，對有效預(yù)防溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病的發(fā)生以及臨床輸血安全具有重要意義。

［1］陸松松，陳靜嫻.Rh(D)變異體的研究進(jìn)展.臨床輸血與檢驗(yàn)，2010，12(4):374-377.

［2］高峰.臨床輸血與檢驗(yàn).人民衛(wèi)生出版社，2007，7:71.

［3］王培華.輸血技術(shù)學(xué).人民衛(wèi)生出版社，2002:155.