EphA2/ephrinA1與人腦膠質(zhì)瘤發(fā)生的關(guān)系及靶向治療潛能探討

鄭俊青 安聰娟 綜述 方艷偉 審校

酪氨酸蛋白激酶（RTK）受體Eph家族成員EphA2及其配體ephrinA1在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用是目前研究熱點(diǎn)之一。多項(xiàng)研究證實(shí)EphA2在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、腦膠質(zhì)瘤、胃腸、胰腺癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞中過表達(dá)，與患者的預(yù)后和復(fù)發(fā)密切相關(guān)。EphA2與其配體ephrinA1的復(fù)雜交互作用下引發(fā)了致癌作用，與信號(hào)蛋白的交互作用促進(jìn)了細(xì)胞黏附、增殖、分化和轉(zhuǎn)移。

EphA2和ephrinA1在人類惡性腦膠質(zhì)瘤發(fā)生和血管發(fā)生中的作用以及靶向治療潛能，EphA2、ephri?nA1系統(tǒng)有望成為惡性腦膠質(zhì)瘤診斷和特異靶向治療的新靶點(diǎn)。

1 EphA2和ephrinA1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)

EphA2受體是一個(gè)分子量為130 kDa、由976個(gè)氨基酸組成的跨膜糖蛋白，在大多數(shù)惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤中過表達(dá)［1-5］，免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示EphA2在61%的多形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）中呈強(qiáng)陽性表達(dá)［2］，EphA2是一種膜定位受體，易于與配體結(jié)合，而且EphA2的表達(dá)與患者的不良預(yù)后、轉(zhuǎn)移和低生存率密切相關(guān)［1-2，5］?；贓phA2的表達(dá)模式、定位特性及功能重要性等特點(diǎn)，EphA2很可能是一種非常有價(jià)值的抗惡性膠質(zhì)瘤治療的新靶點(diǎn)。

ephrinA1由205個(gè)氨基酸組成，腫瘤壞死因子-α早期介導(dǎo)的基因產(chǎn)物，位于染色體1q21-q22，分子量約為22 kDa。ephrinA1的表達(dá)方式與EphA2不同，ephrinA1在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中低表達(dá)時(shí)，而EphA2則過表達(dá)，且EphA2表達(dá)越高，膠質(zhì)瘤級(jí)別越高，預(yù)后越差；相反，膠質(zhì)瘤細(xì)胞高表達(dá)ephrinA1時(shí)，EphA2則呈低表達(dá)，且ephrinA1表達(dá)越高，膠質(zhì)瘤級(jí)別越低，預(yù)后相應(yīng)較好。這種差異性表達(dá)可通過siRNA干擾敲低ephrinA1來實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)。而且，GBM中EphA2表達(dá)細(xì)胞產(chǎn)生的異位ephrinA1導(dǎo)致EphA2的表達(dá)下調(diào)［1，6-7］。

2 EphA2和ephrinA1在人腦膠質(zhì)瘤發(fā)生中可能的致癌作用

多項(xiàng)研究證實(shí)，EphA2的致癌作用的確存在。在人腦膠質(zhì)瘤中，EphA2的過表達(dá)可激活A(yù)kt［8］、FAK［6］、eHsp90-LRP1信號(hào)軸等通路或因子［9］，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的有絲分裂、增殖和轉(zhuǎn)移。而其配體ephrinA1的激活，可抑制體內(nèi)外惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞EphA2過表達(dá)的特性，引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)深刻變化導(dǎo)致細(xì)胞極性缺失，抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲［1，6-8，10］。ephrinA1的腫瘤顯著抑制性主要在于其下調(diào)EphA2的能力。但Wykosky等［7］研究也發(fā)現(xiàn)ephrinA1可作為一種可溶性單體從GBM細(xì)胞中釋放出來，以一種旁分泌的方式作用于EphA2受體發(fā)揮抗瘤作用，而不需要交互作用。

3 EphA2和ephrinA1與人腦膠質(zhì)瘤血管發(fā)生

豐富的異常血管是惡性膠質(zhì)瘤如GBM的典型特征之一，而且內(nèi)皮細(xì)胞的增生和血管形成與膠質(zhì)瘤的關(guān)系已被證實(shí)，高級(jí)別的間變星形細(xì)胞瘤及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤同低級(jí)別星形細(xì)胞瘤相比，具有血管增殖活性高及生長(zhǎng)迅速的特點(diǎn)。生長(zhǎng)迅速的高度惡性膠質(zhì)瘤，間質(zhì)血管數(shù)目多，血管新生與膠質(zhì)瘤細(xì)胞外向生長(zhǎng)同步進(jìn)行，新生血管化程度與膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展密切相關(guān)［11］。研究表明EphA2和ephrinA1的交互作用在抑制腦內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接形成、促進(jìn)惡性腦膠質(zhì)瘤血管發(fā)生起著重要調(diào)節(jié)作用［12］。

4 針對(duì)EphA2和ephrinA1在人腦膠質(zhì)瘤中的靶向治療研究

4.1 ephrinA1

基于配體ephrinA1的治療方法，主要是通過激活含有融合蛋白ephrinA1-Fc的腫瘤細(xì)胞，抑制EphA2的磷酸化，誘導(dǎo)EphA2的內(nèi)陷和退化，消除癌蛋白的影響［13］。ephrinA1的激活可抑制體內(nèi)外惡性腫瘤細(xì)胞中EphA2過表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲［1，6-8，10］。因此Li等［1］認(rèn)為EphA2抑制劑可能是通過上調(diào)ephri?nA1的表達(dá)抑制膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展。因此針對(duì)腫瘤血管的靶向治療，方法很可能是使用阻斷劑，如EphA2-Fc阻斷EphA2-ephrinA1的交互作用，或者靶向敲低EphA2在內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)使之不能與血管發(fā)生信號(hào)產(chǎn)生應(yīng)答。

4.2 免疫偶聯(lián)物

c-Cbl與膠質(zhì)瘤常見癌蛋白表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）結(jié)合，可促進(jìn)EGFR的降解，抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)［14］。

4.3 細(xì)胞毒素

研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒素IL-13.E13K.PE38QQR和ephrinA1-PE38QQR可分別特異性殺滅IL-13R alpha 2和EphA2高表達(dá)的GBM轉(zhuǎn)移細(xì)胞，為膠質(zhì)瘤的基因靶向治療奠定了基礎(chǔ)［4］。

4.4 免疫療法

免疫細(xì)胞識(shí)別和對(duì)抗癌細(xì)胞的潛能為抗癌治療提供了新的途徑。Ueda等［15］首次報(bào)道患有惡性膠質(zhì)瘤長(zhǎng)期幸存者（＞12年未復(fù)發(fā)）體內(nèi)存在膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原特異性CD8+T細(xì)胞和固有免疫細(xì)胞，可產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)對(duì)抗膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原如EphA2和IL-13Ralpha2。Okada等［3］研究發(fā)現(xiàn)三種膠質(zhì)瘤相關(guān)抗原EphA2、IL-13Ralpha2和Survivin在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)水平與病理級(jí)別無明顯相關(guān)性，認(rèn)為膠質(zhì)瘤的免疫治療需針對(duì)多重相關(guān)抗原。抑制膠質(zhì)瘤小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）的表達(dá)，可抑制腫瘤細(xì)胞躲避免疫監(jiān)視，促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤聯(lián)合抗原肽疫苗的治療效果［16］。臨床Ⅰ/Ⅱ期試驗(yàn)證明攜帶膠質(zhì)瘤聯(lián)合抗原合成肽的甲種極化樹突細(xì)胞1（α-type 1 polarized dendritic cells，αDC1）疫苗和經(jīng)賴氨酸纖維酸穩(wěn)定后的聚肌苷酸（聚）胞苷酸（polyinosinic-polycytidylic acid stabilized by lysine and carboxymethylcellulose，poly-ICLC），疫苗對(duì)復(fù)發(fā)惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤表現(xiàn)出了安全性、免疫原性和初步臨床有效性［17］。

4.5 RNA干擾

miRNA-26b（miR-26b）作為腫瘤抑制因子與EphA2的3'UTR特異反應(yīng)區(qū)結(jié)合可直接抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞中EphA2的表達(dá)，抑制血管形成進(jìn)程，從而抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲［18］。RNA干擾EphA2基因沉默（EphA2-siRNA）不僅可以降低GBM細(xì)胞活性，促進(jìn)瘤細(xì)胞凋亡［1］，同時(shí)可提高膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，抑制瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移，二者聯(lián)合療效更加顯著［19］。

5 結(jié)語

無疑EphA2和ephrinA1在惡性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵性作用，其參與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、惡性進(jìn)展過程中確切的機(jī)制是非常復(fù)雜的，并且受許多因素影響。目前針對(duì)EphA2和ephrinA1的靶向治療仍處于實(shí)驗(yàn)階段，將來選擇特異性EphA2-ephrinA1阻斷劑，可有效干預(yù)受EphA2和ephrinA1調(diào)控與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，且不直接殺傷細(xì)胞，達(dá)到抑制膠質(zhì)瘤過度增殖、新生血管生成、浸潤、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的效果。與傳統(tǒng)化療藥物相比，分子靶向治療“有的放矢”，具有特異性和選擇性強(qiáng)、高效、低毒的特點(diǎn)。但膠質(zhì)瘤是多靶點(diǎn)多環(huán)節(jié)的調(diào)控過程，涉及多種免疫分子、多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)通路，單一的分子靶向藥物治療效果可能不佳，所以多因素靶向聯(lián)合抗癌治療模式將成為未來的發(fā)展方向，選用具有協(xié)同作用的不同靶向藥物或者聯(lián)合幾種治療方式，并實(shí)施個(gè)體化治療將大幅提高療效。EphA2-ephrinA1的靶向治療可能也同樣面臨著現(xiàn)有靶向藥物的一些特殊不良反應(yīng)，如變態(tài)反應(yīng)、胃腸道反應(yīng)、出凝血異常、間質(zhì)性肺病和心血管不良反應(yīng)等。

雖然腦膠質(zhì)瘤的靶向治療起步晚，但其卻以諸多優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)出了良好的應(yīng)用前景，且發(fā)展迅速，目前有大量的相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)正在進(jìn)行中，本文相信將來可為膠質(zhì)瘤患者開辟一條新的有效的治療途徑。希望EphA2-ephrinA1系統(tǒng)在惡性膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的病理機(jī)制能夠形成理論，并且不斷改進(jìn)，為合理設(shè)計(jì)針對(duì)EphA2-ephrinA1系統(tǒng)的靶向治療策略提供理論依據(jù)。

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