P27在乳腺癌及正常乳腺組織中的表達及其意義

[摘要] 目的 探討P27在乳腺癌及正常乳腺組織中的表達變化與臨床病理意義。 方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法，分別檢測71例乳腺癌及32例正常乳腺組織P27的表達情況，并分析它與相關(guān)臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 結(jié)果 在乳腺癌中P27的陽性表達率28.2%（20/71），正常乳腺組織中P27的陽性表達率84.4%（27/32），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.05）；同時P27陽性表達率與乳腺癌的分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P < 0.05）。 結(jié)論 P27蛋白的低表達可增加腫瘤細胞增殖活性，促進腫瘤的發(fā)生；同時過度增殖活躍的腫瘤細胞也是乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的因素之一。

[關(guān)鍵詞] P27；乳腺癌；正常乳腺組織；免疫組織化學(xué)

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673—9701（2012）26—0092—02

Study of expression of P27 in breast cancer and normal breast tissue

LIU Jingwen1 WEI Maofu1 QIU Xiaoling2

1.Department of Pathology，Humen Hospital of Dongguan City in Guangdong Province，Dongguan 523900，China； 2.The Humen Town Community Health Service Center of Dongguan City in Guangdong Province，Dongguan 523900，China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between the expression of P27 in breast cancer tissue and normal breast tissue. Methods The expression of P27 was detected in 71 patients with breast cancer，32 patients with normal breast tissue by the immunohistochemical staining. Results The expression rate of P27 staining in breast cancer was 28.2%（20/71），being significantly lower than that of in normal breast tissue 84.4%（27/32）（P < 0.05）. Furthermore，the positive expression of P27 was associated with high grading and lymphytic metastasis（P < 0.05）. Conclusion The abnormal expression of P27 may associate with the occur of tumor，and associate with lymphytic metastasis.

[Key words] P27； Breast cancer； Normal breast tissue； Immunohistochemistry

乳腺癌是來自乳腺終末導(dǎo)管小葉單位上皮的惡性腫瘤。發(fā)病率在過去50年中呈緩慢上升趨勢，有些城市報道乳腺癌占女性惡性腫瘤之首位[1]。多基因參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展的過程，包括抑癌基因的失活和癌基因的激活。P27作為細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子（CDKI）參與細胞周期調(diào)控，主要作用于細胞周期G1/S期限制點，使細胞停滯在G1期，在細胞增殖周期中起負調(diào)節(jié)功能[2]。本實驗研究目的在于探討P27在乳腺癌、乳腺正常組織中的表達與臨床病理之間的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

收集本院1998年1月～2012年5月乳腺癌標本71例，選取乳腺正常組織標本32例作對照，選取的所有標本均經(jīng)常規(guī)病理證實。所選取71例乳腺癌標本，患者年齡26～80歲，平均51歲；71例乳腺癌中高級別52例，低級別19例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例。

1.2 試劑及免疫組化染色方法

濃縮型鼠抗人P27單克隆抗體（克隆號：DCS—72.F6）、抗體稀釋液及檢測試劑盒均購自邁新公司。其稀釋度為1∶100。所有選用的標本均用10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，S—P法進行免疫組化染色，染色前標本切片用檸檬酸緩沖液進行抗原修復(fù)處理，高壓鍋噴氣后開始計時，修復(fù)2 min，一抗在室溫孵育1 h，二抗在室溫下孵育0.5 h，DAB 常溫下顯色，用顯微鏡控制顯色時間，蘇木素復(fù)染，脫水，透明，封片。用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

P27在乳腺癌及正常乳腺組織中以細胞核著色，呈黃色、棕黃色及黃褐色。根據(jù)染色強度及陽性細胞數(shù)百分比進行計分[3]。Ⅰ：染色強度：不著色至黃褐色分別為0至3分。Ⅱ：陽性細胞百分比：<5%計0分，6%～25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計3分，>75%計4分。Ⅰ×Ⅱ≥3分為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS 10.0軟件進行χ2檢驗，P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

P27陽性表達主要表現(xiàn)為細胞核染色。71例乳腺癌中20例陽性，陽性表達率28.2%；32例正常乳腺組織中27例陽性，陽性表達率84.4%。P27在乳腺癌中的表達明顯低于在正常乳腺組織中的表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）（表1）。在高級別乳腺癌中P27表達率21.2%（11/52），低級別乳腺癌中表達率47.4%（9/19），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中陽性率16.7%（6/36）；在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達率40%（14/35），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）（表2）。

3 討論

近年來，發(fā)現(xiàn)細胞周期的失控與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系。P27蛋白為細胞周期素依賴性蛋白激酶抑制因子（CDKI）之一，是一個重要的細胞周期負調(diào)控蛋白，P27與細胞周期素依賴性蛋白激酶（CDK）或cyclin/CDK復(fù)合物結(jié)合，抑制其生物活性，使細胞周期停滯于G1期，抑制其增殖，可以防止細胞過度增殖及惡變[4，5]。它還是一個抑制細胞分裂的重要因子[6]，在細胞分化、細胞凋亡中都有重要作用。Pe■uti■—Pisac等研究指出，P27蛋白低表達，甲狀腺乳頭狀癌患者頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能性增加[7]。本研究顯示，71例乳腺癌中20例陽性，陽性表達率為28.2%；32例正常乳腺組織中27例陽性，陽性表達率為84.4%。P27在乳腺癌中的表達明顯低于正常乳腺組織的表達，差異顯著（P < 0.05）。在高級別乳腺癌中P27表達率為21.2%（11/52），低級別乳腺癌中表達率為47.4%（9/19），差異有顯著性（P < 0.05）。在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中陽性率16.7%（6/36）；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中表達率為40%（14/35），差異有顯著性（P < 0.05）。研究提示P27蛋白的異常表達對乳腺癌的發(fā)生起重要作用，P27蛋白的低表達，腫瘤細胞容易從G1期進入S期，導(dǎo)致腫瘤細胞增殖活性增加，促進腫瘤的發(fā)生及發(fā)展；同時過度增殖活躍的腫瘤細胞也是乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的因素之一。

[參考文獻]

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[7] Valdi Pesutic—Pisac，Ante Punda，Ivo Gluncic，et al. Cyclin D1 and p27 Expression as Prognostic Factor in Papillary Carcinoma of the Thyroid：Association with Clinicopathological Parameters[J]. Croat Med J，2008， 49（5）：643—649.

（收稿日期：2012—07—12）