10批市售人參藥材的質量分析

牛曉靜，張文鑫，劉曉龍，聶淑慧

(河南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院藥學部，河南鄭州 450000)

人參為五加科植物人參 Panax ginseng C．A．Mey．的干燥根及根莖，是名貴的滋補強壯藥，主產地在吉林、遼寧、黑龍江等省。人參在中藥配伍中常作為君藥使用，具有大補元氣、固脫生津、安神之功效，能夠治療勞傷虛損、食少、倦怠、反胃吐食、大便滑泄、虛咳喘促、自汗暴脫、驚悸、健忘、眩暈頭痛等一切氣血津液不足之證。人參可調節(jié)中樞神經系統(tǒng)功能，促進大腦對能量物質的利用，增強機體的免疫功能，還有改善心臟功能、降低血糖、抗腫瘤等作用?，F代藥學研究［1］表明，人參中所含的皂苷為其主要活性成分，是評價質量標準的重要指標之一。近幾年來，隨著人參需求量的增大，人參的種植實現了工業(yè)化，雖然此舉使人參在數量上滿足了人們的需求，但由于產地、栽培技術及炮制方法等的不同，人參有效成分的含量出現了比較大的差異，治療效果也差強人意。中藥材質量優(yōu)劣對臨床藥效是否能正常發(fā)揮至關重要，因此，本文采用高效液相色譜法測定市售10批人參藥材中人參皂苷的含量，分析其質量的優(yōu)劣。

1 藥品、試劑與儀器

人參藥材均購自安徽亳州藥材市場;人參皂苷對照品Rg1(批號110703-201027)、人參皂苷Re對照品(批號110754-200822)、人參皂苷Rb1對照品(批號110704-200921)，均由中國生物制品藥品鑒定所提供。乙腈，為色譜純，由北京迪馬科技有限公司，批號70115;氯仿、正丁醇、氨水、甲醇等試劑均為分析純;水為娃哈哈純凈水。Waters 2695 HPLC，美國Waters公司產品;2998 PDA檢測器Waters，美國Waters公司產品;Empower色譜工作站，產地美國;Agilent ZORBAX Eclispe XDB-C18色譜柱(4．6 mm ×150 mm，5 μm)及AEL-200型分析天平，日本島津公司產品;CF225D型賽多利斯天平，德國賽多利斯集團產品;Hk250型科導臺式超聲波清洗器，功率250 W，頻率50 Hz，上海科導超聲儀器有限公司產品。

2 方法與結果

2．1 性狀鑒別

《中國藥典》［2］中規(guī)定人參的性狀為：枝大、皮細、色澤嫩黃或棕色;枝紋細密，枝體飽滿，無破損，新鮮人參以枝大、漿足、無疤痕、無破損者為上品。人參的等級劃分以顏色、色澤、長短、肉質、破傷與否而定。一般說，參體大、側根多、根條細、須根完整的質量好;在等級、枝數相同情況下，體重者為上。10批人參的性狀見表1。

表1 人參性狀統(tǒng)計表

2．2 色譜條件

以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按照表2進行梯度洗脫，柱溫30℃，體積流量1．0 mL/min，檢測波長203 nm，色譜柱為Agilent-ZORBAX Eclispe XDB-C18(4．6 mm ×150 mm，5μm)。

表2 液相色譜的條件

2．3 溶液的制備

2．3．1 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品及人參皂苷Rb1對照品，加甲醇制成含人參皂苷 Rg1 0．191 04 g/L，人參皂苷 Re 0．198 5 g/L，人參皂苷Rb1 0．195 6 g/L的混合溶液。

2．3．2 供試品溶液的制備

將藥材粉碎，取粉末(過4號篩)約1 g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加熱回流3 h，棄去三氯甲烷液，將藥渣揮干，連同濾紙筒移入100 mL錐形瓶中精密加入水飽和的正丁醇50 mL，密塞，放置過夜，超聲處理(功率250 W，頻率50 Hz)30 min，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25 mL，置蒸發(fā)皿中蒸干。殘渣加甲醇溶解并轉移至5 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2．4 含量測定

按照上述色譜條件，進樣前用微孔濾膜(0．45 μm)濾過，供試品、對照品溶液進樣量均為10 μL，并記錄不同批次人參色譜圖及其峰面積(見圖1)。2010版《中國藥典》規(guī)定：人參按干燥品計算，含人參皂苷 Rg1(C42H72O14)和人參皂苷 Re(C48H82O18)的總量不得少于0．30%，人參皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0．20%。10批人參藥材含量測定結果見表3。由表3計算可得，10批人參藥材的人參皂苷Rg1的平均含量為0．23%、Re的平均含量為0．15%和Rb1的平均含量為0．18%，均低于藥典標準規(guī)定的含量，其中藥材不合格率為40%。

表3 10批人參藥材含量測定結果

圖1 人參皂苷混合對照品及供試品溶液色譜圖

3 討論

3．1 色譜條件的摸索

2010版《中國藥典》規(guī)定［2］，梯度洗脫時間為0～35 min時，流動相 A%為19，流動相 B%為81，但筆者在試驗中發(fā)現人參皂苷Rg1的色譜峰與人參皂苷Re的重疊，不能完全分開，而且該方法梯度洗脫時間較長，需100 min，耗時、耗力。查閱文獻［3-4］，有以乙腈—5 g/L磷酸作為流動相的。筆者經過多次試驗，采用本實驗中的洗脫方法(梯度洗脫時間為0～35 min時，流動相A%為18．5，流動相B%為81．5)后，色譜峰人參皂苷Rg1的色譜峰與人參皂苷Re的色譜峰能較好分離，人參皂苷Rb1在43 min左右即可達到良好分離，峰形尖銳，洗脫時間大大縮短，重復性良好。

3．2 人參的質量與性狀

在實驗過程中發(fā)現，有些外觀品質較好的人參(如批號為101106和110210)，人參皂苷含量也較高，但僅憑性狀特征無法確定質量的優(yōu)劣，只能通過含量測定來確定其有效成分的含量。

3．3 人參藥材的質量分析

本實驗結果顯示，目前市售人參的質量不容樂觀。筆者認為造成產品不合格的原因主要有2方面：一是人參生長年限不夠。一般來說，園參需要生長5 a以上才能進行收獲，生長期只有3～4 a、通過化肥催生的人參所含總皂苷含量一般難以達到標準要求。本實驗中批次為100927的人參在粉碎時被發(fā)現質地非常疏松，有許多空洞，這可能與參的生長年限不夠有關。二是人參的加工過程中，若存在質量管理落后或加工工藝不科學(如硫磺熏、溫度過高、霉變等)，便會導致人參總皂苷的破壞與流失，而人參總皂苷含量過低的產品已基本上不具備人參特有的臨床應用價值。因此，要提高人參藥材的質量，需要從選育種植、科學施肥、蟲害防治到采收加工等方面進一步加強對市場中藥材的質量監(jiān)督管理，以此推動中藥材的品種標準化、產地基地化、采收加工規(guī)范化、產品無公害化等目標實現，以進一步提高中藥材質量。

［1］吳立軍．天然藥物化學［M］．5版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：266-270．

［2］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典：一部［M］．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010．

［3］胡曉斌，李穎，吳蘇澄，等．生脈膠囊中人參皂苷Rg1、Re的HPLC測定［J］．中藥新藥與臨床藥理，2003，14(1)：49-51．

［4］林世和，余南才，易艷東，等．HPLC法測定人參蘆中人參皂苷 Rb1、Rg1、Re的含量［J］．中國藥師，2010，13(4)：531-533．