黃芪的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展

房 宇，劉 堯

（漢中職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 漢中723000）

黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus memeranaceus（Fisch.）Bge.var.monghlicus（Bge.）Hsiao 或膜莢黃芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，味甘，微溫，歸脾、肺經(jīng)，主產(chǎn)于內(nèi)蒙古、山西、黑龍江等地，春秋二季采挖，除去須根及根頭，曬干，切片，生用或蜜炙用。黃芪具有補(bǔ)氣固表、利尿脫毒、排膿、斂瘡生肌的功效［1］?，F(xiàn)代研究表明黃芪主要成分為多糖（兩種葡聚糖和兩種雜多糖）、多種黃酮類化合物、苷類、生物堿、氨基酸、微量元素、葡糖糖醛酸等［2］。其中黃芪總苷（AST）與黃芪多糖（APS）等成分具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用，現(xiàn)將黃芪近年來免疫調(diào)節(jié)研究進(jìn)展概述如下。

1 增強(qiáng)機(jī)體免疫功能

黃芪可增加脾臟、胸腺重量，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。小鼠二硝基氟苯（DNFB）致敏后ip環(huán)磷酰胺（Cy）能明顯降低小鼠的耳片腫脹度及脾與胸腺指數(shù)。復(fù)方黃芪提取物（compound astragalus extract，CAE）（60mg·kg－1，120mg·kg－1和240mg·kg－1）和 黃 芪 總 提 物（total extract astragalus，TAE）（15mg·kg－1，50mg·kg－1和150mg·kg－1）3個(gè)劑量對Cy降低的小鼠耳片腫脹度均有明顯的拮抗作用；CAE中、高劑量和TAE 低、中、高3個(gè)劑量均能明顯升高Cy降低的小鼠脾與胸腺指數(shù)。顯示黃芪提取物具有免疫增強(qiáng)作用［3］。

1.1 增強(qiáng)黏膜免疫功能

黃芪多糖是黃芪免疫藥理作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，具有增強(qiáng)黏膜免疫的作用，上調(diào)腸道及呼吸道分泌型免疫球蛋白A（secreted immunoglobulin A，sIgA）分泌作用明顯且具有一定的時(shí)序性［4－6］。吳瑕等［7］采用分步醇沉聯(lián)合凝膠層析獲得了具有較均一相對分子質(zhì)量的不同分子質(zhì)量黃芪多糖（astragalus polysaccharide，APS），通過建立環(huán)磷酰胺致昆明種小鼠腸道及呼吸道黏膜免疫功能低下模型，發(fā)現(xiàn)總黃酮多糖（TAPS）及157.7×103APS連續(xù)ig給予14d，可提高小鼠小腸sIgA 水平，增加小腸P氏結(jié)（Peyer，s patch，PP）總面積，后者尚可見提高呼吸道sIgA 水平。

1.2 增強(qiáng)非特異性免疫功能

1.2.1 提高巨噬細(xì)胞吞噬能力

黃芪能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力和對靶細(xì)胞的作用［8］。呂圭源等［9］發(fā)現(xiàn)黃芪生脈多糖采用腹腔注射的給藥途徑能提高正常及免疫功能低下小鼠單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能，而灌胃給藥方式對其無明顯影響。

林琳等［10］發(fā)現(xiàn)經(jīng)不同濃度黃芪甲苷作用6h后，巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力逐漸升高，12h后明顯高于正常對照組（P＜0.05），其中以100μg／mL 的作用濃度最佳。作用24h后，隨著藥物濃度的增加，A540值有下降的趨勢。

蔣春明、張苗等［11］研究發(fā)現(xiàn)，患者運(yùn)用黃芪后巨噬細(xì)胞吞噬能力較對照組顯著提高，NO 和腫瘤壞死因子α含量較用藥前顯著提高（P＜0.01）。張峰等［12］發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷及APS能提高白細(xì)胞介素IL－1β、γ干擾素的濃度，進(jìn)一步增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的活化吞噬能力。黃勇等［13］通過不同劑量黃芪組方對小鼠免疫的作用研究發(fā)現(xiàn)，APS可能作用于NO 介導(dǎo)信號(hào)通路，激活巨噬細(xì)胞表達(dá)一氧化氮合成酶，誘導(dǎo)NO產(chǎn)生，進(jìn)而調(diào)節(jié)脾淋巴細(xì)胞內(nèi)游離Ca2＋濃度，升高蛋白激酶活性，影響免疫細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，提高小鼠巨噬細(xì)胞Gb受體和FcR 活性，發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用。

1.2.2 增強(qiáng)NK 細(xì)胞活性及殺傷能力

黃芪能使NK 細(xì)胞活性及殺傷作用增強(qiáng)。趙華云等［14］研究表明，急性病毒性心肌炎患者運(yùn)用黃芪制劑后NK 細(xì)胞的活性明顯提升。黃芪多糖粉針劑可使S180荷瘤小鼠NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞能力顯著提高。劉輝等［15］建立移植瘤模型，于裸鼠皮下接種人鱗癌細(xì)胞株GNM。研究證實(shí)，黃芪組及平陽霉素、黃芪聯(lián)合用藥組對GNM 細(xì)胞移植瘤抑瘤效果良好，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性促進(jìn)機(jī)體免疫的同時(shí)，使脾細(xì)胞密度和NK 細(xì)胞活性較平陽霉素組及對照組明顯提高（P＜0.01）。

1.2.3 增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞的作用

APS體外可誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞前體細(xì)胞定向分化為成熟樹突狀細(xì)胞（DCs）；APS誘生的DCs具有明顯刺激同種異體T 淋巴細(xì)胞增殖的能力，隨DCs細(xì)胞數(shù)量的增加而作用增強(qiáng)［16］。

1.3 增強(qiáng)特異性免疫功能

1.3.1 對細(xì)胞因子的影響

細(xì)胞因子IL－2能促進(jìn)T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、NK 細(xì)胞增殖，參與免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)。IL－2增強(qiáng)機(jī)體免疫主要通過增強(qiáng)CTL、NK 細(xì)胞和LAK 細(xì)胞的殺傷活性，促進(jìn)抗體生成，誘導(dǎo)IFN－γ分泌等，其可作為衡量細(xì)胞免疫水平的標(biāo)志［17］。

黃芪皂苷促進(jìn)植物血凝素（phytohemagglutinin）產(chǎn)生外周血IL－2的誘導(dǎo)活性在35.9%～139.6%之間，提示黃芪皂苷抗腫瘤和免疫促進(jìn)作用機(jī)制可能是誘導(dǎo)IL－2的顯著提高［18］。此外張艷等研究表明不同劑量黃芪提取物對各項(xiàng)免疫指標(biāo)均有不同程度的改善，可使小鼠外周血降低的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)及IFN－γ含量明顯升高，差異有顯著性。萬春平［19］對黃芪皂苷Ⅲ的研究發(fā)現(xiàn)黃芪皂苷Ⅲ劑量在10nM 時(shí)對ConA誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞IFN－γ的產(chǎn)生顯著提高（P＜0.05）。

1.3.2 對細(xì)胞免疫的作用

林愛華等［20］通過實(shí)驗(yàn)證明，黃芪能顯著增加正常小鼠胸腺重量，并使ConA 激發(fā)的T 淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)增強(qiáng)。王玉田等［21］通過用人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）和外周血粘附單核細(xì)胞（PBAM）等免疫細(xì)胞檢測黃芪提取物（EA）的免疫調(diào)節(jié)活性并分析其蛋白組成。發(fā)現(xiàn)EA 顯著地刺激人PBMC增殖。PBMC主要是淋巴細(xì)胞，在淋巴細(xì)胞中又主要是T 和B細(xì)胞。從結(jié)果可以看出，所制備的PBMC 淋巴細(xì)胞對T 細(xì)胞特異性有絲分裂原ConA 和對B細(xì)胞特異性有絲分裂原SAC的刺激都有很強(qiáng)的反應(yīng)性，證明所用PBMC淋巴細(xì)胞功能正常。

1.3.3 體液免疫

呂圭源等［9］利用黃芪生脈多糖不同途徑對小鼠抗體形成進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)腹腔注射黃芪生脈多糖0.41g／kg可提高正常小鼠及免疫抑制小鼠抗體形成數(shù)（P＜0.05），但灌胃給予黃芪生脈多糖0.82g／kg無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。然而林愛華等實(shí)驗(yàn)表明正常組小鼠與黃芪組血清溶血素抗體生成A 值之間無顯著差異。提示實(shí)驗(yàn)方法與黃芪對體液免疫的機(jī)制需要進(jìn)一步闡明。

2 雙向調(diào)節(jié)作用

宋寶輝等［22］研究證實(shí)，復(fù)方黃芪提取物在一定濃度范圍內(nèi)可以抑制大鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF－a、IL－l與NO。高濃度黃芪提取液可以抑制細(xì)胞因子IL－2的誘生，表明黃芪具有免疫調(diào)節(jié)的“雙向性”。

3 結(jié)語

綜上所述，黃芪對非特異性和特異性免疫都有明確的增強(qiáng)作用。APS可以增強(qiáng)黏膜免疫功能，APS及黃芪皂苷是提高樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的吞噬作用、提高NK 細(xì)胞活性及殺傷作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。不同濃度的黃芪復(fù)方制劑在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子含量、增加T 細(xì)胞、B細(xì)胞數(shù)量及活性等方面，發(fā)揮出顯著的免疫調(diào)節(jié)作用。然而，不同劑量的黃芪提取物在不同的病理狀態(tài)下，也顯示出增強(qiáng)或抑制的雙向調(diào)節(jié)作用，提示黃芪免疫調(diào)節(jié)的復(fù)雜性。深入開展黃芪各有效成分的免疫調(diào)節(jié)作用研究及免疫機(jī)制探索，闡明內(nèi)在作用途徑，將為進(jìn)一步開發(fā)利用黃芪資源具有積極意義。

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