臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療帕金森癥臨床療效觀察

葸瑞 白海 王存邦 路奎

帕金森病 (parkinson's disease,PD) 是由于腦內(nèi)某些含色素神經(jīng)元發(fā)生退行性病變和壞死所致的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，臨床上以進(jìn)行性加重的靜止性震顫、運動遲緩和肌強(qiáng)直為主要特征。隨著人類壽命的延長，其發(fā)病率已明顯上升,嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。目前雖然有抗PD藥物，但僅能改善癥狀，不能延緩疾病的進(jìn)展，長期應(yīng)用會出現(xiàn)相關(guān)副作用和療效減退，因此目前探索PD的病因治療顯得尤為重要。

由于致PD運動癥狀的神經(jīng)元變性缺失范圍主要位于中腦黑質(zhì)，因此用干細(xì)胞移植行替代治療極有可能改變上述狀況。目前供選擇的移植種子細(xì)胞包括：胚胎黑質(zhì)細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞及間充質(zhì)干細(xì)胞 (mesenchymal stem cells，MSC)等。MSC因具有較強(qiáng)的自我更新能力、多向分化潛能、取材方便、移植不存在倫理學(xué)障礙、有望在臨床實現(xiàn)自體移植等優(yōu)點而備受關(guān)注[1]。近年來國內(nèi)有多家醫(yī)院開展了應(yīng)用MSC治療PD的臨床探索，從治療結(jié)果看部分患者可使臨床癥狀得到改善，我科近1年應(yīng)用臍帶MSC治療PD19例，現(xiàn)總結(jié)如下。

資料與方法

一、臨床資料

2010年10月至2011年4月來自蘭州總醫(yī)院干細(xì)胞治療中心19例患者 ，其中男8例，女11例，中位年齡64歲，所有患者均經(jīng)過神經(jīng)內(nèi)科?？拼_診為PD，患病時間平均為4.5 年，多數(shù)患者經(jīng)過左旋多巴、美多巴等藥物治療或繼續(xù)藥物治療，癥狀持續(xù)加重。

二、方法

1.MSC制備：采用MSC為天津國家干細(xì)胞 中 心 提 供 人 臍 帶 MSC (human umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSC)或我院實驗中心（省重點實驗室）提供，經(jīng)鑒定符合臨床使用標(biāo)準(zhǔn)。

2.治療方法：患者簽署治療同意書后，購買細(xì)胞，細(xì)胞送至科室后嚴(yán)格按操作程序立即行腰穿鞘內(nèi)注射MSC 0.5×107個，為預(yù)防無菌性炎癥反應(yīng)同時給予地塞米松2 mg，注射后去枕平臥6 h，間隔1周再次注射上述劑量，共4次為1療程，間隔3個月可進(jìn)行再次治療。

3.統(tǒng)計學(xué)分析方法：采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。治療前后3個月效果評判，采用改良Webster 評分方法評估、判斷，治療前后神經(jīng)系統(tǒng)功能評分，以x ±s表達(dá)，治療前后效果比較采用配對t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

治療后多數(shù)患者的部分癥狀得到改善，尤其以肌張力增高引起的異常癥狀改善明顯，敏感的患者治療后即有肌肉僵硬減輕，從Webster 評分也可以看出，其中強(qiáng)直、姿勢、步態(tài)、震顫、面容改善較明顯（P均< 0.01），而其他癥狀無改善或改善不明顯（表 1）。

不良反應(yīng)：5例出現(xiàn)輕微頭痛，占26﹪，休息或少量服用止痛藥物好轉(zhuǎn)，7例短暫發(fā)熱，不超過38.5℃，持續(xù)時間不超過1天，未予處理自行緩解，無其他不良反應(yīng)。

表1 19例帕金森氏癥患者M(jìn)SC治療前后神經(jīng)系統(tǒng)評分比較（）

表1 19例帕金森氏癥患者M(jìn)SC治療前后神經(jīng)系統(tǒng)評分比較（）

評估項目 治療前 治療后 t值 P值雙手動作減少 2 2強(qiáng)直 1.89±0.60 1.11±0.33 5.29 0.001姿勢 2.20±0.97 1.40±0.72 5.21 0.001行走時上肢擺動 2.67±0.50 2.10±0.60 3.16 0.013步態(tài) 2.33±0.87 1.56±0.52 5.29 0.001震顫 2.00±0.71 1.56±0.53 2.53 0.003面容 2.00±0.50 1.33±0.50 4.00 0.004坐、起立動作 2.10±0.92 1.67±0.71 2.53 0.035言語 1.22±0.83 1.11±0.78 1.00 0.347自我照顧 2.44±0.53 2.00±0.50 2.52 0.035合計 20.70±4.30 15.90±3.33 9.16 0.000

討 論

因MSC的低免疫原性及可以向神經(jīng)細(xì)胞、骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞等的多向分化能力，近年來逐步開展利用MSC治療神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病及神經(jīng)損傷性疾病，并觀察到一定的治療效果，如吳立克等[2]應(yīng)用UC-MSC進(jìn)行鞘內(nèi)注射移植治療帕金森病患者30例，采用帕金森病統(tǒng)一評分量表對患者移植前后神經(jīng)功能進(jìn)行評定，30例患者移植后3 個月帕金森病統(tǒng)一評分量表分值均明顯降低 (P < 0.01)，患者震顫、強(qiáng)直、運動遲緩、姿勢不穩(wěn)等臨床癥狀均得到明顯改善，均未出現(xiàn)移植物抗宿主病。楊華強(qiáng)等[3]報道將細(xì)胞數(shù)（2～6）×107個UC-MSC通過靜脈和鞘內(nèi)注射途徑移植到2例遺傳性痙攣性截癱患者體內(nèi)，臨床癥狀癥狀均明顯好轉(zhuǎn)，雙下肢肌張力明顯降低，恢復(fù)獨立行走，步態(tài)平穩(wěn)，隨訪1年癥狀持續(xù)緩解無復(fù)發(fā)。我科近1年收治10例明確診斷PD患者，采用鞘內(nèi)注射MSC，共注射4次，每次間隔1周，觀察患者治療中及治療后除個別患者出現(xiàn)輕度頭痛、發(fā)熱外，其余無明顯異常不適，從Webster 評分看治療有效，其中強(qiáng)直、姿勢、步態(tài)、震顫、面容改善較明顯，而其他各項無改善或改善不明顯，觀察到MSC治療后可降低肌張力，對肌張力高引起的癥狀改善較明顯。

MSC治療神經(jīng)系統(tǒng)疾患的機(jī)理目前仍在不斷探索中，Hellmann 等[4]實驗證明,骨髓MSC移植入PD 動物模型腦內(nèi)后能夠存活,并發(fā)生遷移和向神經(jīng)細(xì)胞分化。Weiss等[5]和Fu等[6]2個實驗室分別將人臍帶血來源的MSC移植入PD大鼠模型腦內(nèi),結(jié)果發(fā)現(xiàn)MSC至少4 個在宿主腦內(nèi)能夠存活,PD大鼠的癥狀得到改善。存活的MSC本身能夠表達(dá)一些神經(jīng)調(diào)節(jié)因子也可以促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的存活和再生。人骨髓MSC移植到裸鼠腦內(nèi)能夠促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的分泌,這就為MSC移植后能夠促進(jìn)神經(jīng)退行性癥狀的緩解提供了實驗證據(jù)。付文玉等[7]將標(biāo)記的MSC移植到PD大鼠模型損毀側(cè)紋狀體內(nèi)，結(jié)果骨髓MSC定向移植術(shù)后，PD大鼠的旋轉(zhuǎn)行為較術(shù)前明顯改善，損毀側(cè)黑質(zhì)TH陽性細(xì)胞數(shù)較術(shù)前增加，標(biāo)記細(xì)胞散在分布于移植側(cè)腦組織內(nèi)，可表達(dá)神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白和微管相關(guān)蛋白說明植入紋狀體內(nèi)骨髓MSC能夠存活并對PD大鼠有治療作用。而Liao等[8]使用UCMSC移植治療腦梗死模型大鼠并觀察療效，結(jié)果發(fā)現(xiàn)移植的MSC能顯著減少梗死面積并促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)，還發(fā)現(xiàn)MSC能整合到大鼠大腦的脈管系統(tǒng)，部分能分化為內(nèi)皮細(xì)胞，治療組大鼠梗死側(cè)大腦血管密度、血管內(nèi)皮生長因子和堿性成纖維細(xì)胞生長因子表達(dá)水平顯著增加。UC-MSC對PD患者的治療原理有待進(jìn)一步探索，考慮與分泌神經(jīng)調(diào)節(jié)因子促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的功能和再生有關(guān)。

1 范存剛，周學(xué)儒，張慶俊.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)性質(zhì)研究進(jìn)展[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，30(2):215-218.

2 吳立克，王曉娟，褚賽純,等，臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療帕金森病30例[J].中國組織工程究與臨床康復(fù)，2009，13(40): 7951-7954.

3 楊華強(qiáng)、王云甫，李東升,等.臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療遺傳性痙攣性截癱2例，中國組織工程研究與臨床康復(fù) [J]，15(1): 167-170.

4 Hellmann MA,Panet H,Barhum Y,et al.Increased survival and migration of engrafted mesenchymal bone marrow stem cells in6-hydroxydopamine-lesioned rodents[J].Neurosci Lett,2006,395(2): 124-128.

5 Weiss ML,Medicetty S,Bledsoe AR,et al.Human umbilical cord matrix stem cells: preliminary characterization and effect of transplantation in a rodent model of Parkinson’s disease[J].Stem Cells,2006,24(3): 781-792.

6 Fu Y S,Cheng YC,Lin MY,et al.Conversion of human umbilical cord mesenchymal stem cells in Wharton’s Jelly to dopaminergicneurons in vitro : potential therapeutic application for Parkinsonism[J].Stem Cells,2006,24(1): 115-124.

7 付文玉,鄭志娟,呂娥,等.移植間充質(zhì)干細(xì)胞治療帕金森病大鼠[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，30(1): 44-47

8 Liao W,Xie J,Zhong J,et al.Therapeutic effect of human umbilical cord multipootent mesenchymal stell cells in a rat model of stroke[J].Transplantation,2009,87(3):350-359.