人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型在腎移植患者西羅莫司個體化給藥中的應(yīng)用Δ

唐 蕾，傅曉華，羅美娟，牟 靜，廖麗文，何彩婷，任 斌#

（1.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣州510080；2.廣州新海醫(yī)院，廣州 510300）

人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型在腎移植患者西羅莫司個體化給藥中的應(yīng)用Δ

唐 蕾1＊，傅曉華2，羅美娟1，牟 靜1，廖麗文1，何彩婷1，任 斌1#

（1.中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣州510080；2.廣州新海醫(yī)院，廣州 510300）

目的：建立人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)用于估算西羅莫司血藥濃度的方法。方法：收集56例腎移植患者口服西羅莫司的182份全血濃度數(shù)據(jù)，采用遺傳算法配合動量法優(yōu)化網(wǎng)絡(luò)參數(shù)，建立人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，并對測試數(shù)據(jù)進行處理，驗證測試結(jié)果。結(jié)果：人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)平均預(yù)測誤差（MPE）與平均絕對誤差（MAE）分別為（0.31±1.14）、（0.89±0.77）ng·mL－1，32例/次（88.9%）血藥濃度數(shù)據(jù)絕對預(yù)測誤差≤2.0 ng·mL－1。人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型準(zhǔn)確性及精密度優(yōu)于多元線性回歸及非線性混合效應(yīng)模型。結(jié)論：人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型可用于預(yù)測西羅莫司血藥濃度，指導(dǎo)個體化給藥。

西羅莫司；腎移植；人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)

西羅莫司（Sirolimus）是免疫抑制作用很強的大環(huán)內(nèi)酯抗生素類免疫抑制劑，臨床主要用于器官移植抗排斥反應(yīng)及自身免疫性疾病的治療。西羅莫司通過與他克莫司（FK506）蛋白（FKBP-12）結(jié)合，形成西羅莫司-FKBP-12復(fù)合物，再與哺乳類動物細胞的作用靶位蛋白（mTOR）結(jié)合，從而阻滯T淋巴細胞及其他細胞由G1期進入S期[1，2]。西羅莫司的藥動學(xué)存在明顯的個體差異，治療指數(shù)窄，用藥不當(dāng)即引起腎移植術(shù)后排斥反應(yīng)或高脂血癥、血小板減少、貧血、白細胞減少等不良反應(yīng)[3]。國內(nèi)有文獻報道，西羅莫司血藥濃度維持在4～8 ng·mL－1時最佳[4]。臨床需通過血藥濃度監(jiān)測來調(diào)整給藥劑量，確保用藥安全有效。如何預(yù)測最佳用藥劑量、盡快達到藥物治療窗成為目前臨床研究的難點及熱點。本研究收集56例腎移植患者口服西羅莫司后的常規(guī)檢查數(shù)據(jù)，采用人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)（Artificial neural network，ANN）技術(shù)[5，6]預(yù)測西羅莫司血藥濃度，為臨床快速、有效制訂西羅莫司個體化給藥方案提供依據(jù)。

1 研究對象

研究對象來源于接受西羅莫司治療的腎移植患者?；颊咴谀I移植術(shù)后接受西羅莫司+潑尼松+環(huán)孢素或他克莫司或霉酚酸酯三聯(lián)免疫抑制治療[7]。移植后48 h內(nèi)開始服用西羅莫司口服液（60 mL，1 mg·mL－1，美國惠氏制藥有限公司），首次負荷劑量為6 mg，維持劑量為2 mg，每日1次，需根據(jù)患者的臨床情況調(diào)整西羅莫司的維持劑量。術(shù)中及術(shù)后2 d，ivgtt給予甲潑尼龍500 mg·d－1，以后po給予潑尼松30 mg·d－1，第3個月減量至10～20 mg·d－1，第6個月減至5～10 mg·d－1。霉酚酸酯用量500～1 500 mg·d－1，每日2次。他克莫司用量1～5 mg·d－1，每隔12 h分2次po給藥，術(shù)后1月內(nèi)血藥濃度控制在8～12 ng·mL－1范圍內(nèi)，1年內(nèi)控制在6～10 ng·mL－1范圍內(nèi)。環(huán)孢素用量100～325 mg·d－1，每日2次，術(shù)后1月內(nèi)谷濃度控制在200～350 ng·mL－1范圍內(nèi)，術(shù)后第3個月濃度控制在150 ng·mL－1左右，至術(shù)后第6～9個月濃度控制在50～100 ng·mL－1范圍內(nèi)。

患者接受定期常規(guī)體檢，行血常規(guī)、血生化、肝功能、腎功能、血糖、血藥濃度監(jiān)測等實驗室檢查?；颊咴诓煌男g(shù)后時間段，于服藥前0 h，抽取外周靜脈血1～2 mL，采用美國Abbott Axsym全自動免疫分析儀測定西羅莫司全血谷濃度。

2 方法

2.1 資料收集

收集腎移植患者臨床資料，包括：（1）患者基本資料：性別、年齡、體重、身高、術(shù)后時間；（2）免疫抑制方案；（3）西羅莫司血藥濃度監(jiān)測結(jié)果；（4）實驗室檢查結(jié)果：堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、直接膽紅素、間接膽紅素、總膽紅素、白蛋白、球蛋白、總蛋白、血糖、血尿素氮、血清肌酐、紅細胞、白細胞、血紅蛋白、血小板等；（5）合并用藥。

2.2 數(shù)據(jù)處理

2.2.1 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)輸入變量篩選：以西羅莫司血藥濃度為輸出變量，患者性別、年齡、體重、身高、術(shù)后時間、西羅莫司劑量、各項實驗室檢查結(jié)果以及合并用藥等為輸入變量，采用Minitab 16.0統(tǒng)計軟件，以最優(yōu)子集法[8]篩選西羅莫司血藥濃度的影響因素作為神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)輸入變量。

2.2.2 數(shù)據(jù)分組：將腎移植患者西羅莫司血藥濃度數(shù)據(jù)隨機分為2組：訓(xùn)練組、測試組。

2.2.3 BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)[6]：采用BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)建模，隱含層采用正切S型激活函數(shù)，輸出層采用線性激活函數(shù)，訓(xùn)練方法采用動量法。以訓(xùn)練組西羅莫司血藥濃度實測值為輸出變量，以“2.2.1”項西羅莫司血藥濃度影響因素為輸入變量。隨機選擇34例/次訓(xùn)練組數(shù)據(jù)用于神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)交叉驗證，剩余112例/次訓(xùn)練組數(shù)據(jù)用于網(wǎng)絡(luò)訓(xùn)練，采用Neurosolutions 5.0全功能試用軟件（NeuroDimension，Inc.，F(xiàn)L，USA），利用遺傳算法配合動量法對ANN進行訓(xùn)練，對如隱含層節(jié)點數(shù)、步長、動量因子等進行優(yōu)化。網(wǎng)絡(luò)訓(xùn)練終止條件為網(wǎng)絡(luò)平均平方誤差（Mean square error，MSE）小于給定值0.01；或交叉驗證數(shù)據(jù)MSE開始增加；或達到預(yù)定的進化代數(shù)100。網(wǎng)絡(luò)最大訓(xùn)練次數(shù)為10 000次，其他參數(shù)為默認值，最后得到原始數(shù)據(jù)與西羅莫司血藥濃度之間的非線性映射模型。

2.2.4 模型驗證[9]：以測試組數(shù)據(jù)為驗證數(shù)據(jù)，以遴選出的ANN估算測試組西羅莫司血藥濃度，考察西羅莫司血藥濃度估算值與實測值之間的相關(guān)性，并作相關(guān)性散點圖。同時計算預(yù)測誤差（Prediction error，PE），以平均預(yù)測誤差（Mean prediction error，MPE）評價模型的準(zhǔn)確性、平均絕對誤差（Mean absolute prediction error，MAE）評價模型的精密度，并計算絕對預(yù)測誤差（│PE│）≤2.0 ng·mL－1的數(shù)據(jù)比率，公式如下。

3 結(jié)果

3.1 臨床資料

回顧性收集2006－2011年期間在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院接受腎移植手術(shù)的56名患者共182份西羅莫司穩(wěn)態(tài)谷濃度及相應(yīng)實驗室檢查數(shù)據(jù)，其中男性42例，女性14例，年齡（44.8±11.7）歲，體重（60.1±10.9）kg，術(shù)后時間（20.5±55.7）d，西羅莫司給藥劑量0.5～4 mg·d－1。腎移植患者資料詳見表1。腎移植患者在西羅莫司治療的基礎(chǔ)上都合用其他藥物，其中霉酚酸酯24例/次、環(huán)孢素27例/次、他克莫司131例/次、鈣通道拮抗藥（氨氯地平或硝苯地平）33例/次、奧美拉唑21例/次、更昔洛韋30例/次、阿德福韋59例/次、甘草酸二銨22例/次。

表1 腎移植患者資料Tab 1 Characteristics of renal transplantation patients

3.2 神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)輸入變量

182份西羅莫司穩(wěn)態(tài)谷濃度數(shù)據(jù)經(jīng)最優(yōu)子集法分析，患者年齡（Age）、體重（Weight）、西羅莫司劑量（Dose）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、白蛋白（ALB）、白/球比（A/G）、血糖（GLU）、尿素氮/肌酐比值（BUN/Cr）、紅細胞計數(shù)（RBC）、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）檢查值以及合用環(huán)孢素A（CsA）、霉酚酸酯（MMF）、甘草酸二銨（Glyz）（合用為1，未合用為0）等組成最優(yōu)子集，對西羅莫司血藥濃度有顯著影響，納入神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)輸入變量。

3.3 數(shù)據(jù)分組

腎移植患者西羅莫司血藥濃度數(shù)據(jù)共182例/次，隨機分為2組，訓(xùn)練組146例次，測試組36例次。訓(xùn)練組及測試組參數(shù)見表2。

表2 訓(xùn)練組與測試組參數(shù)Tab 2 Parametersof training group and testing group

3.4 BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)

建立3層結(jié)構(gòu)的BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，網(wǎng)絡(luò)輸入層、隱含層和輸出層節(jié)點數(shù)分別為14、22、1，隱含層采用正切S型激活函數(shù)，輸出層采用線性激活函數(shù)。輸入變量為Dose、Age、Weight、ALT、AST、ALB、A/G、GLU、BUN/Cr、RBC、MCH及合用CsA、MMF、Glyz，輸出變量為西羅莫司血藥濃度。神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖見圖1。

3.5 方案評估

將測試組數(shù)據(jù)以人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)處理，對預(yù)測結(jié)果進行驗證，結(jié)果見表3。人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)血藥濃度預(yù)測值與實測值相關(guān)性散點圖見圖2。測試組西羅莫司神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預(yù)測濃度cpred＝1.085 2cactua－0.033 1，r＝0.939（P＜0.05）；網(wǎng)絡(luò)預(yù)測 MPE 與MAE分別為（0.31±1.14）ng·mL－1和（0.89±0.77）ng·mL－1，32例次（32/36，88.9%）絕對預(yù)測誤差≤2.0 ng·mL－1。

4 討論

圖1 腎移植患者西羅莫司血藥濃度預(yù)測神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖Fig 1 Artificial neural network structures for prediction of blood concentration of sirolimus in renal transplantation recipients

西羅莫司是目前腎移植術(shù)后常規(guī)使用的免疫抑制劑，其治療指數(shù)較窄，血藥濃度個體差異大，因此腎移植患者需要通過經(jīng)常監(jiān)測血藥濃度，反復(fù)調(diào)整西羅莫司劑量，以達到有效濃度范圍，確保用藥的安全有效。臨床醫(yī)師或藥師如能利用患者生理、病理資料及實驗室檢查結(jié)果等，迅速預(yù)測某劑量下的穩(wěn)態(tài)血藥濃度，對于控制最佳用藥劑量、提高療效、降低藥品不良反應(yīng)、完善個體化用藥方案具有重要意義。

ANN法預(yù)測腎移植患者西羅莫司血藥濃度，預(yù)測值與實測值之間相關(guān)系數(shù)達0.939（P＜0.05），斜率1.085 2，接近1；MPE（0.31±1.14）ng·mL－1，MAE（0.89±0.77）ng·mL－1，88.9%的血藥濃度數(shù)據(jù)絕對預(yù)測誤差│PE│≤2.0 ng·mL－1。表明ANN法預(yù)測結(jié)果相關(guān)性、準(zhǔn)確性、精密度均優(yōu)于多元線性回歸預(yù)測結(jié)果。筆者曾采用非線性混合效應(yīng)模型（NONMEM）分析47名腎移植患者西羅莫司血藥濃度數(shù)據(jù)，模型觀測值和預(yù)測值間的殘差和相關(guān)系數(shù)分別是1.0 ng·mL－1和0.94[7]，ANN法預(yù)測準(zhǔn)確度優(yōu)于NONMEM法結(jié)果。

西羅莫司與血漿蛋白結(jié)合率接近92%，主要結(jié)合白蛋白和α1-酸性糖蛋白。西羅莫司也可進入紅細胞，平均紅細胞-血漿比約為35%。ANN輸入變量篩選也發(fā)現(xiàn)白蛋白、血/球比、紅細胞計數(shù)、平均紅細胞血紅蛋白含量對西羅莫司血藥濃度有明顯影響。西羅莫司的代謝主要通過肝細胞色素P450（CYP）3A4代謝，同時也是多藥外排泵P糖蛋白（P-gp）的底物，因此其血藥濃度易受患者肝功能及影響CYP3A4或P-gp活性的藥物如環(huán)孢素等影響。ANN建模過程中，發(fā)現(xiàn)合用環(huán)胞素A、霉酚酸酯及甘草酸二銨對西羅莫司血藥濃度有明顯影響。文獻報道，與環(huán)孢素A合用時，西羅莫司的藥-時曲線下面積、最低濃度顯著提高，環(huán)孢素A在血中以及腎組織中的濃度也明顯上升[10]。西羅莫司與保肝藥甘草素（甘草的水溶液中提取的成分）合用時，西羅莫司的清除率（CL/F）降低[11]。西羅莫司合用霉酚酸酯可降低患者的西羅莫司CL/F[7]，霉酚酸酯平均CL/F為（5.66±2.48）L·h－1，未合用霉酚酸酯的患者平均CL/F為（7.73±5.35）L·h－1[7]。

表3 測試組西羅莫司血藥濃度預(yù)測效果（x±s ）Tab 3 Prediction performanceof blood concentration of sirolimusin testing grou（px±s ）

圖2 西羅莫司血藥濃度ANN預(yù)測值與實測值相關(guān)性散點圖A.訓(xùn)練組；B.測試組Fig 2 Scatter plots of the relationship between the actual concentration and the predicted concentration of sirolimusA.training group；B.test group

本研究建立了適合中國腎移植患者西羅莫司血藥濃度預(yù)測的ANN法，方法簡便迅捷，臨床醫(yī)師將西羅莫司劑量及相關(guān)輸入變量代入ANN，即可迅速預(yù)測西羅莫司穩(wěn)態(tài)血藥濃度，利于在中國腎移植受者中開展西羅莫司個體化給藥。

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Application of Artificial Neural Network in Individual Medication of Sirolimus for Renal Transplantation Recipients

TANG Lei，LUO Mei-juan，MU Jing，LIAO Li-wen，HE Cai-ting，REN Bin
（The First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University，Guangzhou 510080，China）
FU Xiao-hua
（Guangzhou Xinhai Hospital，Guangzhou 510300，China）

OBJECTIVE：To establish a prediction method for blood concentration of sirolimus by artificial neural network.METHODS：182 blood concentration samples were collected from 56 renal transplantation recipients.Artificial neural network（ANN）was established after network parameters were optimized by using momentum method combined with genetic algorithm.The trial data was processed and validated.RESULTS：Mean prediction error（MPE）and mean absolute error（MAE）of ANN were（0.31±1.14）ng·mL－1and（0.89±0.77）ng·mL－1，respectively.The absolute prediction error of testing data of 32 cases/times（88.9%）was less than 2.0 ng·mL－1.Accuracy and precision of ANN were superior to multiple regression and nonlinear mixed effect model.CONCLUSION：ANN is suitable to predict blood concentration of sirolimus and guide individual medication.

Sirolimus；Renal transplantation；Artificial neural network

R969.1；R979.5

A

1001-0408（2012）30-2821-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.30.15

Δ廣東省科技計劃項目（2007B031500003）

＊副主任藥師，法學(xué)碩士。研究方向：臨床藥學(xué)。電話：020-62732266。E-mail：pharma_tl@163.com

#通訊作者：副主任藥師。研究方向：臨床藥學(xué)。電話：020-87755766-8442。E-mail：renbinsys@sina.com

2012-04-09

2012-05-28）

Δ重慶市科委自然科學(xué)基金計劃資助項目（CSTC，2010BB5103）

＊講師。研究方向：衛(wèi)生檢驗。電話：023-68485026。E-mail：lchjy@126.com

＃通訊作者：博士。研究方向：細菌耐藥性及致病機制。電話：023-68485026。E-mail：liylyl@yahoo.com.cn