王德軍,陶 濤,朱科燕,屠 玨,潘穎穎,艾秀峰,肖 慧,潘永明,陳民利
(浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心/比較醫(yī)學(xué)研究中心,杭州 310053)
亞健康是處于健康與疾病之間可相互轉(zhuǎn)化的中間狀態(tài),一般存在一些輕微的早期生化改變,并無(wú)器質(zhì)性損害,臨床上通常會(huì)表現(xiàn)出不適、活力降低等生理狀態(tài)[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)已有超過(guò)7億的人群處于亞健康狀態(tài),占全國(guó)總?cè)藬?shù)的60% ~70%,且該比例有繼續(xù)上升的趨勢(shì)[2]。目前臨床上用于亞健康狀態(tài)的診斷和評(píng)估方法有許多種,但主要分為以下三類:癥狀標(biāo)準(zhǔn)診斷法、量化診斷法、MDI健康評(píng)估法[3]。而量化診斷法中的一種常規(guī)的檢查方式,即體液微觀篩查技術(shù),就是對(duì)血液代謝性指標(biāo),心肌酶譜等生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。由于亞健康狀態(tài)的誘因有眾多,如疲勞、不良生活方式、工作壓力等,不同因素誘導(dǎo)產(chǎn)生的亞健康狀態(tài)的臨床癥狀與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)均有所不同[4]。因此,本文采用熱水游泳、睡眠剝奪和束縛等單因素或多因素方式建立亞健康狀態(tài)大鼠,觀察亞健康狀態(tài)大鼠的血液生化、血?dú)怆娊赓|(zhì)指標(biāo)的變化,為進(jìn)一步了解不同成因?qū)εR床亞健康狀態(tài)形成的影響機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
雄性SPF級(jí)Wistar大鼠,體重為(150~170)g,60只,購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[SCXK(滬)2007-0005],飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心屏障系統(tǒng)內(nèi)[SYXK(浙)2008-0115],環(huán)境溫度為(23±1)℃,相對(duì)濕度為50% ~65%,飼喂全價(jià)營(yíng)養(yǎng)顆粒飼料,自由飲水。
7020日立全自動(dòng)生化分析儀,日本日立株式會(huì)社;NOVA血?dú)怆娊赓|(zhì)分析儀,美國(guó) NOVA公司;丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白 蛋 白 (ALB)、尿 素 氮 (BUN)、肌 酐(CREA)、血糖(GLU)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)等試劑盒由上海申能德賽技術(shù)診斷有限公司生產(chǎn),血?dú)庠噭┌擅绹?guó)NOVA公司生產(chǎn)。
大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,按體重隨機(jī)分成5組,即多因素組(multifactor group,MF)、熱水游泳組(warm swimming group,WS)、睡眠不足組(sleep deficiency group,SD)、單純束縛組(purely constraint group,PC)和正常對(duì)照組(control group,C),每組12只。各組處理方法如下:MF組大鼠每天在水溫(43±0.5)℃的水槽中游泳3 min,之后擦干被毛,將大鼠放置睡眠剝奪裝置中剝奪睡眠10 h,隨后放回飼養(yǎng)籠中,并在晚上19∶00加入足量的普通飼料,暴食1 h后取出剩余飼料;SW組大鼠每天在水溫(43±0.5)℃的水槽中游泳3 min,之后擦干被毛放回飼養(yǎng)籠中,正常飼養(yǎng);SD組大鼠每天上午開(kāi)始睡眠剝奪10 h,之后放回飼養(yǎng)籠中正常飼養(yǎng);PC組大鼠每天下午放入束縛桶內(nèi)限制活動(dòng)3 h;C組大鼠不做任何處理,正常飼養(yǎng);造模5 d后,各組處死6只,剩余動(dòng)物進(jìn)行恢復(fù)飼養(yǎng)3 d后處死。
分別在造模結(jié)束后和恢復(fù)3 d時(shí),將大鼠用3%的戊巴比妥鈉溶液0.1 mL/100 g腹腔注射麻醉,麻醉后打開(kāi)腹腔,取腹主動(dòng)脈肝素抗凝血0.5 mL測(cè)定大鼠動(dòng)脈血?dú)怆娊赓|(zhì)指標(biāo);取腹主靜脈血離心血清,測(cè)定血清中 ALT、AST、TP、ALB、BUN、CREA、GLU、TC、TG、CK和 LDH等指標(biāo),所有操作均按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
與正常對(duì)照(C)組比,造模5 d后多因素(MF)組的大鼠 BUN水平顯著降低(P<0.05),同時(shí)CREA水平顯著升高(P<0.01),恢復(fù)3 d后,MF組的大鼠ALT、ALB和BUN水平均明顯高于C組(P<0.05);而其它各模型大鼠的肝腎功能均未見(jiàn)明顯變化(P>0.05),見(jiàn)表1。
與正常對(duì)照(C)組比,造模5 d后各模型組的大鼠GLU濃度均顯著升高(P<0.01);多因素(MF)組的大鼠血清中 AST、CK、CK/AST比值和LDH水平均顯著升高,并且TG水平顯著降低(P<0.01);熱水游泳(WS)組的大鼠血清中 TC、CK、CK/AST比值和LDH水平亦升高顯著(P<0.01);恢復(fù)3 d后,MF組TC含量明顯升高(P<0.01),且MF組和WS組的大鼠血清 AST、CK、CK/AST比值和LDH水平仍顯著高于C組(P<0.01),睡眠不足(SD)組的大鼠CK亦顯著高于 C組(P<0.05),其余各模型大鼠 AST、CK、CK/AST和 LDH均略高于C組,但差異不顯著(P>0.05);見(jiàn)表2。
與正常對(duì)照(C)組比,造模5 d后多因素(MF)組、睡眠不足(SD)組和單純束縛(PC)組的大鼠PCO2、Hct和 Hb明顯升高(P <0.05,P <0.01),同時(shí),熱水游泳(WS)組 Hct和 Hb亦升高顯著(P<0.01),但MF組的大鼠PO2和SO2%均顯著降低(P<0.05);恢復(fù)3 d后,除各造模大鼠的血液pH值和PO2均明顯下降(P<0.05,P<0.01)外,MF組、SD組和PC組的大鼠PCO2升高并伴有SO2%的降低(P<0.05,P<0.01),見(jiàn)表 3。
表1不同因素致亞健康模型大鼠肝腎功能的影響ˉ±s,n=6)Tab.1 Effects of different factors on liver and kidney function in the sub-health model rats
表1不同因素致亞健康模型大鼠肝腎功能的影響ˉ±s,n=6)Tab.1 Effects of different factors on liver and kidney function in the sub-health model rats
注:與正常對(duì)照(C)組比,*P <0.05,**P <0.01.Note:Compared with the control group,*P <0.05,**P <0.01.
時(shí)期Period組別Groups丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT(IU/L)總蛋白TP(g/L)白蛋白ALB(g/L)尿素氮BUN(mmol/L)肌酐CREA(μmol/L)造模5 d Modeling for 5 days多因素組(MF) 40.60±1.82 49.80±1.30 29.40±1.14 4.86±0.69* 49.40±0.89**熱水游泳組(WS) 42.17±5.27 48.67±1.03 27.50±0.55 5.43±0.46 41.67±2.34睡眠不足組(SD) 39.67±3.50 47.67±1.21 27.17±0.98 5.28±0.50 39.17±1.72單純束縛組(PC) 40.50±3.78 49.33±1.97 27.83±1.17 5.38±0.54 40.17±1.83正常對(duì)照組(C) 42.67±2.42 51.83±1.72 28.50±0.84 5.98±0.6737.83±1.33恢復(fù)3 d Recovery for 3 days 42.33±3.27多因素組(MF) 60.67±16.06* 51.67±4.32 28.50±2.81* 5.70±0.70* 46.17±10.28熱水游泳組(WS) 49.33±10.84 48.17±1.60 26.33±1.03 4.92±0.24 42.50±3.02睡眠不足組(SD) 48.17±9.33 47.67±1.37 26.00±0.63 4.92±0.56 41.67±5.05單純束縛組(PC) 53.67±10.89 49.00±1.41 26.33±0.52 4.48±0.45 41.67±1.63正常對(duì)照組(C) 42.33±3.88 49.00±1.26 26.00±0.63 4.65±0.59
表2不同因素致亞健康模型大鼠糖脂代謝和心肌酶的影響(ˉ±s,n=6)Tab.2 Effects of different factors on blood sugar and lipid metabolism and myocardial enzymes in the sub-health model rats
表2不同因素致亞健康模型大鼠糖脂代謝和心肌酶的影響(ˉ±s,n=6)Tab.2 Effects of different factors on blood sugar and lipid metabolism and myocardial enzymes in the sub-health model rats
注:與正常對(duì)照(C)組比,*P <0.05,**P <0.01.Note:Compared with the control group,*P <0.05,**P <0.01.
時(shí)期Period組別Groups血糖GLU(mmol/L)總膽固醇TC(mmol/L)甘油三酯TG(mmol/L)天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶AST(IU/L)肌酸磷酸激酶CK(U/L)肌酸磷酸激酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶CK/AST乳酸脫氫酶LDH(IU/L)多因素組(MF) 9.12 ±1.12** 1.26 ±0.15 0.38 ±0.10** 146.8 ±7.2* 934.8 ±73.1** 6.37 ±0.38** 2 314.8 ±160.8**4.2±121.8 5.09±0.57 962.2±235.9造模 熱水游泳組(WS) 9.40±0.55** 1.62±0.06* 0.82±0.15 121.7±16.2 633.3±125.0** 5.18±0.39** 1 382.3±347.3**Modeling for 睡眠不足組(SD) 9.93±1.31** 1.42±0.09 0.90±0.19 104.2±7.4 408.0±58.4 3.92±0.52 855.2±111.4 5 days 單純束縛組(PC)11.58±2.49** 1.34±0.09 0.56±0.19 95.8±15.42 336.5±97.3 3.47±0.54 642.2±225.1正常對(duì)照組(C) 6.18±0.48 1.40±0.23 0.80±0.09 121.3±17.0 362.8±128.2 2.93±0.71 833.8±300.7多因素組(MF) 8.89±0.37 1.76±0.21** 0.64±0.23 155.3 ±20.0** 886.8 ±131.4** 5.92±0.37* 1801.8±410.0**恢復(fù) 熱水游泳組(WS) 9.20±0.85 1.34±0.08 0.77±0.11 152.8 ±27.9** 931.2 ±170.7** 6.10±0.39* 1861.5±499.6**Recovery for 睡眠不足組(SD) 9.76±0.69 1.29±0.04 0.65±0.26 139.0±27.6 794.3±139.4* 5.75±0.57 1418.8±210.0 3 days 單純束縛組(PC) 9.15±0.84 1.33±0.06 0.77±0.25 141.3±16.3 752.5±94.3 5.34±0.51 1329.2±251.8正常對(duì)照組(C) 9.37±0.61 1.37±0.09 0.78±0.38 111.3±11.6 56
表3不同因素致亞健康模型大鼠血?dú)庵笜?biāo)的影響(ˉ±s,n=6)Tab.3 Effects of different factors on blood gas parameters in the sub-health model rats
表3不同因素致亞健康模型大鼠血?dú)庵笜?biāo)的影響(ˉ±s,n=6)Tab.3 Effects of different factors on blood gas parameters in the sub-health model rats
注:與正常對(duì)照(C)組比,*P <0.05,**P <0.01.Note:Compared with the control group,*P <0.05,**P <0.01.
時(shí)期Period組別Groups氫離子濃度指數(shù)pH二氧化碳分壓PCO2(mmHg)氧分壓PO2(mmHg)二氧化硫SO2(%)紅細(xì)胞比容Hct(%)血紅蛋白Hb(mg/mL)多因素組(MF) 7.43 ±0.03 40.90±4.59* 73.42 ±10.72* 94.02±2.48* 42.83±2.64** 14.25±0.93**38.50 ±2.59 12.60 ±0.66造模 5 d 熱水游泳組(WS) 7.47 ±0.01 37.02 ±2.32 76.45 ±5.39 95.63 ±1.20 40.83 ±0.75** 13.60 ±0.25**Modelimg for 睡眠不足組(SD) 7.44 ±0.02 41.35 ±7.04* 77.27 ±9.64 94.85 ±2.62 41.17 ±2.14** 13.78 ±0.73**5 days 單純束縛組(PC) 7.45 ±0.03 44.00 ±4.20** 76.68 ±1.14 95.36 ±0.30 41.83 ±1.72** 13.88 ±0.57**正常對(duì)照組(C) 7.45 ±0.04 33.22±5.36 85.85 ±8.03 96.58±0.95 36.83±1.72 12.20±0.58多因素組(MF) 7.39 ±0.01** 44.00 ±3.30* 61.55 ±8.35** 86.35 ±5.54** 33.00 ±2.97* 11.02 ±0.97恢復(fù) 3 d 熱水游泳組(WS) 7.40 ±0.01** 40.60±3.53 69.38 ±2.30* 91.73±0.86 35.67±2.25 11.92±0.71 Recovery for 睡眠不足組(SD) 7.37 ±0.03** 47.88 ±4.55** 63.73 ±4.37** 87.00 ±3.25** 34.00 ±3.16 11.40 ±1.05 3 days 單純束縛組(PC) 7.38 ±0.01** 43.44 ±3.18* 68.24 ±6.55** 89.82 ±2.38* 35.17 ±4.17 11.78 ±1.40正常對(duì)照組(C) 7.47 ±0.02 35.73±7.30 79.83 ±5.42 96.10±1.06
表4不同因素致亞健康模型大鼠電解質(zhì)指標(biāo)的影響(ˉ±s,n=6)Tab.4 Effects of different factors on electrolytes parameters in the sub-health model rats
表4不同因素致亞健康模型大鼠電解質(zhì)指標(biāo)的影響(ˉ±s,n=6)Tab.4 Effects of different factors on electrolytes parameters in the sub-health model rats
注:與正常對(duì)照(C)組比,*P <0.05,**P <0.01.Note:Compared with the control group,*P <0.05,**P <0.01.
時(shí)期Period組別Groups鈉離子Na+(mmmol/L)鉀離子K+(mmmol/L)鈣離子Ca2+(mmmol/L)鎂離子Mg2+(mmmol/L)碳酸氫根離子HCO-3(mmmol/L)多因素組(MF) 133.57±1.47 3.23±0.51* 0.22±0.02 0.09 ±0.02 27.40±2.19*6.27 ±4.84造模 5 d 熱水游泳組(WS) 130.03±2.37** 2.54±0.21 0.20±0.04 0.09 ±0.02 27.07±1.28*Modeling for 睡眠不足組(SD) 132.32 ±1.71 2.95 ±0.28 0.24 ±0.04 0.11 ±0.02 27.92 ±4.17**5 days 單純束縛組(PC) 132.75 ±2.14 2.88 ±0.19 0.26 ±0.08 0.12 ±0.03 29.97 ±2.23**正常對(duì)照組(C) 135.57±0.76 2.72±0.19 0.23±0.06 0.12 ±0.03 23.03±2.12多因素組(MF) 133.13±1.57* 3.12±0.19 0.23±0.04 0.10 ±0.01 26.60±1.68恢復(fù) 3 d 熱水游泳組(WS) 131.23±2.23** 3.09±0.20 0.18±0.04 0.09 ±0.02 25.17±2.05 Recovery for 睡眠不足組(SD) 134.68±2.83 3.35±0.22* 0.28±0.07 0.19±0.04** 27.80±2.43 3 days 單純束縛組(PC) 133.55±1.26 3.15±0.24 0.23±0.02 / 25.88±1.18正常對(duì)照組(C) 136.67±3.07 3.27±0.29 0.24±0.05 0.13 ±0.03 2
隨著人類社會(huì)的高速發(fā)展和生活方式的改變,亞健康將是危險(xiǎn)人類健康的最大敵人之一[5],由于其隱匿性和潛伏期長(zhǎng)的特點(diǎn),容易忽視其危害性。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變和健康觀念的更新,亞健康問(wèn)題逐漸成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。當(dāng)前對(duì)亞健康狀態(tài)的形成原因還不明確,可能會(huì)由多種因素引起,而引起的主要癥狀往往有多個(gè),臨床表現(xiàn)多樣復(fù)雜且不固定,因此,如何切實(shí)有效、準(zhǔn)確客觀評(píng)價(jià)和診斷亞健康狀態(tài)一直是該研究領(lǐng)域的難點(diǎn)。本文前期采用熱水游泳、睡眠不足和束縛等方法進(jìn)行建模,能夠很好的模擬人類臨床上軀體疲勞、生活方式不良、心理應(yīng)激、社會(huì)壓力大等亞健康的形成原因,而中醫(yī)理論認(rèn)為亞健康形成以氣虛、氣郁及濕證為主,情志失調(diào)是亞健康發(fā)生的重要因素[6],故我們認(rèn)為通過(guò)血液微環(huán)境的改變很有可能是了解機(jī)體亞健康狀態(tài)的重要的定量指標(biāo),并能有效評(píng)估亞健康狀態(tài)的氣血狀態(tài)。
本研究結(jié)果顯示,多因素大鼠的肌酐濃度有顯著增高,這可能與腎臟的排泄功能降低有關(guān)。有報(bào)道顯示,腎小球?yàn)V過(guò)率的降低,腎小管重吸收作用的選擇性降低可能會(huì)導(dǎo)致臨床上CREA濃度的升高[7]。因此,相對(duì)于單因素誘導(dǎo)亞健康模型大鼠,多因素誘導(dǎo)的亞健康狀態(tài)更易使機(jī)體代謝負(fù)荷增加或加重。另外,研究發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的大小、肌肉酸痛與血清中 CK水平高度相關(guān)[8]。正常情況下,肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,功能正常,使CK極少滲出細(xì)胞膜而進(jìn)入血液,但在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí),無(wú)論是大強(qiáng)度還是低強(qiáng)度的訓(xùn)練都會(huì)促使細(xì)胞內(nèi)CK釋放,進(jìn)入血液使血清中CK濃度升高。本實(shí)驗(yàn)中熱水游泳和多因素復(fù)合誘導(dǎo)的亞健康狀態(tài)大鼠的血液CK濃度升高的機(jī)制可能與此相關(guān)。此外,在測(cè)量代謝水平時(shí),還發(fā)現(xiàn)各亞健康狀態(tài)大鼠的血糖濃度和 CK/AST的比值明顯升高,提示亞健康狀態(tài)使易導(dǎo)致機(jī)體處于明顯的應(yīng)激狀態(tài)。有研究顯示,當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激時(shí),胰高血糖素、生長(zhǎng)激素、腎上腺糖皮質(zhì)激素促進(jìn)糖原分解和糖異生過(guò)程,從而導(dǎo)致血糖濃度升高[9]。但在實(shí)際的生活中,亞健康狀態(tài)的形成往往可能是由多種因素和多種環(huán)節(jié)共同誘導(dǎo)作用的結(jié)果,本研究也發(fā)現(xiàn)多因素誘導(dǎo)的亞健康狀態(tài)除上述指標(biāo)明顯的變化外,血液生化指標(biāo)也伴有諸如TG、AST、LDH等水平的改變,這與臨床上亞健康狀態(tài)人群常伴有輕度或臨界的代謝異常[10]較為符合,也表明亞健康狀態(tài)出現(xiàn)的糖、脂代謝紊亂是氣虛血瘀證候的重要生物學(xué)基礎(chǔ)[11]。
血?dú)夥治鲲@示,不同因素致亞健康狀態(tài)大鼠的Hct和Hb均有顯著的升高,提示大鼠出現(xiàn)較明顯的應(yīng)激變化。據(jù)資料顯示[12],應(yīng)激引起 Hct升高的原因可能是動(dòng)物由于受到不同因素的刺激,脾臟內(nèi)受體激動(dòng),促使高濃縮血液排出,從而使血液濃縮。另外,可能由于長(zhǎng)時(shí)間大強(qiáng)度持續(xù)反復(fù)的應(yīng)激反應(yīng),引起模型動(dòng)物的大量出汗,水分丟失,從而造成血漿容量及血容量減少血液濃縮HCT升高。Hb的升高伴隨著Hct的升高,從而提高血液攜氧量,適應(yīng)應(yīng)激后的代謝需要,具有重要的生理意義。臨床研究顯示,亞健康狀態(tài)臨床上常見(jiàn)的證候?yàn)槠馓撊醯?,且脾虛患者的紅細(xì)胞膜上CoA受體有異常變構(gòu),從而引起紅細(xì)胞膜帶Ⅲ蛋白發(fā)生變構(gòu),不能正常進(jìn)行陰離子交換而缺氧。本研究結(jié)果顯示,各亞健康狀態(tài)大鼠的濃度升高可能與此有關(guān)[13]。且熱水游泳、睡眠不足、以及多因素組大鼠伴有Na+、K+、Mg2+等離子的改變,這可能應(yīng)激引起的鈉鉀泵工作異常有關(guān)。
此外,我們也發(fā)現(xiàn)處于恢復(fù)期的亞健康大鼠的pH、PO2、SO2等出現(xiàn)持續(xù)的降低,并伴有 PCO2和LDH的升高,說(shuō)明亞健康狀態(tài)體液酸堿平衡出現(xiàn)紊亂和氣虛證候,且即使采取有效的適應(yīng)性休息亦不能有效緩解亞健康狀態(tài)的疲勞和乳酸積聚等各種癥狀和指標(biāo)的迅速恢復(fù)。因此,采取有效的中藥干預(yù)可能有效緩解這些癥狀的發(fā)生[14]。
綜上所述,采用不同因素誘導(dǎo)的亞健康狀態(tài)大鼠的血液生化、血?dú)怆娊赓|(zhì)指標(biāo)均出現(xiàn)了不同程度上的改變,并與臨床上亞健康狀態(tài)出現(xiàn)的癥狀較為一致;并在這些誘導(dǎo)因素中以睡眠不足相關(guān)的引起亞健康狀態(tài)相對(duì)較為嚴(yán)重,故通過(guò)血液生化和血?dú)怆娊赓|(zhì)指標(biāo)可有效評(píng)估亞健康狀態(tài)機(jī)體血液微環(huán)境的改變,為亞健康狀態(tài)的有效干預(yù)提供可靠地診斷技術(shù)和方法。
亞健康狀態(tài)是人的身心情感處于疾病與健康之間的一種健康低質(zhì)狀態(tài),這種狀態(tài)不是界于健康與疾病之間的一個(gè)“邊緣”,而是一個(gè)很寬的“過(guò)渡帶”。本文用熱水游泳、睡眠不足和束縛等模擬人類臨床上軀體疲勞、生活方式不良、心理和社會(huì)壓力加重造成的腦力和體力的透支而導(dǎo)致亞健康狀態(tài),但僅進(jìn)行了造模5 d和停止造模后恢復(fù)3 d的檢測(cè),而未進(jìn)行造模過(guò)程的動(dòng)態(tài)檢測(cè)和延長(zhǎng)恢復(fù)時(shí)間后的檢測(cè),對(duì)亞健康狀態(tài)形成過(guò)程和發(fā)展過(guò)程的動(dòng)態(tài)變化仍未能了解,有待進(jìn)一步探討。
[1] 袁云娥,吳小蘇,譚燕.亞健康概念及其研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)院,2004,8(4):55-59.
[2] 夏忠誠(chéng),李敬會(huì),趙霞.中醫(yī)藥防治亞健康狀態(tài)芻議[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,13(1):93-95.
[3] 陳文鋒.亞健康狀態(tài)的研究近況[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2010,8(17):268-270.
[4] Spiegel K,Leproult R,van Cauter E.Impact of sleep debt on metabolic and endocrine function[J]. Lancet.1999,354(9188):1435-1439.
[5] 王光輝,王琦,薛俊宏,等.亞健康干預(yù)的現(xiàn)狀與進(jìn)展[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,5(10):908-903.
[6] 王利敏,趙歆,陳家旭,等.亞健康狀態(tài)綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)體系研究思路探析[J].華中醫(yī)藥雜志,2010,25(2):180-183.
[7] 湖南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科.臨床生化檢驗(yàn)[M].長(zhǎng)沙:湖南人民出版社.1981:197.
[8] Mazzone G,Vignola G,Giammarco M,et al.Effects of loading methods on rabbit welfare and meat quality[J].Meat Science.2010,85:33-39.
[9] 毛曉明,劉志民.氧化應(yīng)激在糖尿病糖代謝中的作用[J].江蘇醫(yī)藥,2005,31(3):212-213.
[10] 夏本立,曹東萍,于正軍.亞健康防治指南[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2006.
[11] 扈新剛,張?jiān)蕩X,鄭宏,等.氣虛血瘀大鼠模型糖、脂代謝及氧化應(yīng)激反應(yīng)研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,4:249-251.
[12] 林廣玲,黃林鋒,邱樹(shù)彬.2型糖尿病與凝血功能障礙[J].中國(guó)血液流變學(xué)雜志,2005,1(51):86-88.
[13] 楊志強(qiáng),張?zhí)m.運(yùn)動(dòng)性脾胃失調(diào)動(dòng)物模型的建立和機(jī)理探討[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2002,20(1):92-93.
[14] 冷曉霞,朱科燕,周衛(wèi)民,等.心理應(yīng)激致亞健康狀態(tài)大鼠的血?dú)?、電解質(zhì)代謝及中藥的干預(yù)效應(yīng)[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2009,33(6):754-755.