何菊芳,佟愛華,董 梅,蔣 瀅,匡鐵吉,丁修冬,孟祥紅,雷 紅
(解放軍309醫(yī)院 檢驗(yàn)科,北京100091)
1.1 對(duì)象
健康對(duì)照組51例,男27例,女24例,平均年齡35歲,心、肺、肝、腎功能無異常的體檢健康者。肺結(jié)核組為初治肺結(jié)核住院63例患者,男31例,女32例,平均年齡為38歲,原發(fā)型肺結(jié)核46例,血行播散型肺結(jié)核17例。初治肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)符合中國(guó)結(jié)核病分類法的標(biāo)準(zhǔn)[1]。上呼吸道感染組為住院的上呼吸道感染患者,臨床癥狀有發(fā)熱、畏寒、咳嗽等,經(jīng)血液分析、胸透檢查證實(shí),符合上呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[2],共54例,男26例,女28例,平均年齡45歲。肝硬化組為初治肝炎后肝硬化住院患者,代償期63例,男34例,女29例,平均年齡49歲;失代償期14例,肝性腦病3例,腹水12例,消化道出血10例,男性8例,女性6例,平均年齡51歲。肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)為2000年西安全國(guó)病毒性肝炎學(xué)術(shù)會(huì)議制定的病毒性肝炎防治方案[3]。
1.2 材料與方法
1.2.1 試劑與儀器 血清TP、ALB的測(cè)定在日立7600全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行,血清蛋白電泳在法國(guó)SEBIA CAPILLRYS全自動(dòng)高效毛細(xì)管電泳儀上進(jìn)行,用200nm波長(zhǎng)檢測(cè)各種蛋白質(zhì)的百分比濃度;TP、ALB試劑為北京萊邦公司產(chǎn)品,室內(nèi)質(zhì)控品、定標(biāo)品均為九強(qiáng)公司產(chǎn)品。電泳試劑以及室內(nèi)質(zhì)控為法國(guó)SEBIA公司CAPILLRYS全自動(dòng)毛細(xì)管電泳配套產(chǎn)品。
1.3 方法 采空腹靜脈分離血清,TP、ALB檢測(cè)方法分別為雙縮脲法、溴甲酚綠法。血清蛋白電泳測(cè)定方法為高效毛細(xì)管法,嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用t檢驗(yàn),非正態(tài)分布的兩組均數(shù)比較采用秩和檢驗(yàn),結(jié)果用(±s)表示,P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
與對(duì)照組相比,三組患者中的血清蛋白組分均有改變,肝硬化組的TP、ALB水平為最低,GLOB為最高(均P<0.01),肺結(jié)核組次之(P<0.05);肝硬化組的ALB區(qū)帶百分比明顯低于對(duì)照組,γ區(qū)帶百分比明顯高于對(duì)照組(P<0.01),肺結(jié)核組次之(P<0.05),且相互間有顯著性差異(P<0.05)。上感組ALB水平、ALB區(qū)帶百分比略低(P<0.05),肺結(jié)核組、上感組的α1、α2區(qū)帶均高于對(duì)照組。
表1 各組血清蛋白組份以及血清蛋白電泳結(jié)果比較(±s)
表1 各組血清蛋白組份以及血清蛋白電泳結(jié)果比較(±s)
備注:參考范圍 TP:60-80g/L;ALB:35-55g/L;GLOB:17-33g/L;ALB:52%-62.8%,α1:3.1%-4.6%,α2:7.0%-11.1%,β1:5.3%-7.8%,β2:3.3%-6.4%,γ:13.1%-23.3%。結(jié)果與對(duì)照組相比*表示P<0.05,**表示P<0.01。
肺結(jié)核組(n=63) 上感組(n=54) 肝硬化組(n=77) 對(duì)照組(n=51)17.6±2.45 70.55±4.87 ALB(g/L) 39.26±5.77* 41.57±6.54* 27.54±6.04** 45.75±4.72 GLOB(g/L) 28.65±6.78* 26.21±5.98 34.32±6.76** 26.06±3.30 ALB(%) 51.03±6.74* 53.9±6.37* 41.51±7.45** 59.5±2.86 α1(%) 5.93±1.70* 5.99±1.49* 4.24±0.53 3.87±0.4 α2(%) 14.61±18.82** 11.79±2.41* 8.96±0.63 7.83±1.12 β1(%) 5.38±0.85 5.72±.63 5.27±0.66 5.85±0.58 β2(%) 5.72±1.13 5.95±1.55 7.59±0.89* 4.75±0.83 γ(%) 21.99±4.78* 16.65±3.8 37.54±6.06**TP(g/L) 68.9±8.41* 69.07±7.78 62.53±8.21**
圖1 各組血清蛋白電泳圖譜
血清蛋白電泳是臨床實(shí)驗(yàn)室分析血清蛋白常用技術(shù)之一。通過電泳可對(duì)其蛋白全貌得以更加直接、詳盡的分析。
由表1中數(shù)據(jù)可見,與對(duì)照組相比,患者組血清蛋白水平、區(qū)帶百分率均有改變,肝硬化組的TP、ALB水平為最低,GLOB顯著升高(均P<0.01),肺結(jié)核組次之(P<0.05);肝硬化組患者血清蛋白電泳ALB區(qū)帶百分率顯著降低而γ區(qū)帶的顯著升高(均P<0.01),肺結(jié)核組次之(P<0.05)。上感組ALB水平、ALB區(qū)帶百分比略低,肺結(jié)核組、上感組的α1、α2區(qū)帶均高于對(duì)照組。
ALB主要由肝臟合成,肝損傷時(shí)其合成降低。肝硬化是指各種原因所引起的肝臟慢性、進(jìn)行性的彌漫性改變,肝細(xì)胞長(zhǎng)期受損變性和壞死后肝內(nèi)結(jié)締組織再生,出現(xiàn)為彌漫性纖維化[4]。肝硬化組ALB水平、ALB區(qū)帶百分率的低下與其肝功能的受損密切相關(guān)。γ區(qū)帶的主要成分是免疫球蛋白,免疫球蛋白是由單核-吞噬系統(tǒng)合成[5]。肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)受損的同時(shí),肝臟對(duì)內(nèi)毒素的解毒能力降低,內(nèi)毒素刺激B淋巴細(xì)胞有絲分裂,此時(shí)T淋巴細(xì)胞功能缺陷,B淋巴細(xì)胞功能反而增強(qiáng),使其產(chǎn)生的抗體增多[6]。肝細(xì)胞發(fā)生片狀壞死可造成枯否氏細(xì)胞(Kupffercell)功能失調(diào),無法有效地發(fā)揮吞噬濾過作用,失去對(duì)抗原的處理能力,使門靜脈血中的抗原不能被清除,抗體增多而出現(xiàn)高抗原血癥。另外,受損的肝細(xì)胞也可作為自身抗原刺激淋巴細(xì)胞制造大量的球蛋白[7.8]。電泳圖譜中的改變更為直觀:該組患者β2和γ區(qū)帶無明顯界線,形成 “β-γ”橋,此橋的出現(xiàn)預(yù)示患者肝功能嚴(yán)重受損和體液免疫的應(yīng)急性亢進(jìn)。
肺結(jié)核是結(jié)核分枝桿菌感染導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能下降的呼吸道傳染病,是一種與營(yíng)養(yǎng)不良有關(guān)的疾?。?]。發(fā)熱使機(jī)體能量、蛋白質(zhì)代謝消耗增加,分解代謝加速;另一方面因結(jié)核菌毒素的影響,人體蛋白合成代謝障礙[10],如營(yíng)養(yǎng)攝入及吸收正常,仍可維持蛋白質(zhì)代謝平衡,但如果蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)補(bǔ)充不足或因消化系統(tǒng)功能吸收差時(shí)會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)代謝負(fù)平衡[11]引起不同程度的血清白蛋白低下,不排除患者肝細(xì)胞受損的可能性。表中結(jié)核組γ區(qū)帶的百分率升高(P<0.05),可能與炎性反應(yīng)刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)使得免疫球蛋白和C-反應(yīng)蛋白含量增高有關(guān)[12]。從圖1中可以看到結(jié)核患者血清中γ區(qū)帶有所增加,雖不及肝硬化組“β-γ”橋明顯,但與正常對(duì)照組有明顯差異。該組患者血清中ALB的降低與患者蛋白質(zhì)的消耗有關(guān),也不排除有肝功受損的可能性。α1區(qū)帶主要由α1抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白組成,兩者為主要的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,在急性炎癥時(shí)增高。α2區(qū)帶主要包括結(jié)合珠蛋白、α2-巨球蛋白、α2-脂蛋白、銅藍(lán)蛋白等成份,急性時(shí)相反應(yīng)中血漿結(jié)合珠蛋白增加,在低白蛋白血癥時(shí)α2-巨球蛋白含量可增高,可能系一種代償機(jī)制以保持血漿膠體滲透壓。肺結(jié)核是結(jié)核分枝桿菌感染引起的呼吸道傳染病,感染后即可發(fā)生炎癥反應(yīng),α1、α2區(qū)帶可有增高。急性炎性反應(yīng)為上呼吸道感染組患者的主要癥狀,電泳改變也以α1、α2區(qū)帶的增加為主,患者的持續(xù)高熱、飲食不良可導(dǎo)致ALB的降低。與此相反,肝硬化組患者為慢性感染或感染后期,α1、α2區(qū)帶可有輕度改變,但并不明顯。
綜上所述,此三種疾病患者血清蛋白電泳可有不同改變,通過對(duì)電泳圖譜的觀察比較可對(duì)患者的肝損傷、炎性反應(yīng)、體液免疫狀況得到更直接的分析判斷,聯(lián)合檢測(cè)可能價(jià)值更大。
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