脂蛋白脂酶激活劑艾溴利平類似物的合成

劉 舉， 王 洋， 周云鵬， 姜明俊， 王 正， 徐利鋒

(遼寧大學 藥學院 藥物研究所，遼寧 沈陽 110036)

艾溴利平(Ⅰ)是由日本德島大塚制藥廠研制合成的一種新型化合物，作為脂蛋白脂酶激活劑，具有很強的生物活性，是一種合成的調(diào)節(jié)血脂代謝的新藥。研究表明，Ⅰ可提高分布于毛細血管表面的脂蛋白酯酶的活性,降低血漿甘油三酯，升高HDL-C水平，抑制動脈粥樣硬化[1,2]，降低血糖[3,4]，降低血漿甘油三酯濃度并升高高密度脂蛋白膽固醇濃度[5,6]，也可減輕給予高脂飲食后患中等程度糖尿病肥胖小鼠、大鼠的胰島素抵抗[7,8]。

對于Ⅰ的類似物的合成，目前國內(nèi)尚未見文獻報道。本文以對氯甲基苯甲酸，2-硝基-4-氯苯胺和2-氨基-5-氯苯腈為原料，合成了兩個新型的的類似物——N-2-硝基-4-氯苯基Ⅰ-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰肼(5，總收率28．1%)和N-2-四氮唑基-4-氯苯基-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰胺(7，總收率30.5%)。2-硝基-4-氯苯胺經(jīng)重氮化反應生成的重氮鹽經(jīng)亞硫酸鈉還原制備2-硝基-4-氯苯肼鹽酸鹽(1)；對氯甲基苯甲酸和亞磷酸三乙酯經(jīng)酯化、水解和酰氯化反應制備中間體4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰氯(4)； 4與1反應合成了5。 4先與2-氨基-5-氯苯腈反應生成N-2-氰基-4-氯苯基-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰胺(6)； 6再與疊氮化鈉反應合成7(Scheme 1)。其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和IR表征。

Scheme1

4和7的合成，開創(chuàng)了國內(nèi)Ⅰ的類似物的合成先例，可為今后類似化合物的合成提供參考。

1 實驗部分

1．1 儀器與試劑

ARX-300型核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標)；Spcetrum one型紅外光譜儀(KBr壓片)。

薄層色譜硅膠GF254,青島海洋化工廠;柱層層析硅膠，160目～200目，安徽良臣硅源材料有限公司；對氯甲基苯甲酸,泰興市沃特爾化工廠；2-氨基-5-氯苯腈，鹽城華業(yè)醫(yī)藥化工有限公司；其余所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1) 2-硝基-4-氯苯肼鹽酸鹽(1)的合成

在反應瓶中依次加入4-氯-2-硝基苯胺6.90 g(40 mmol),水50 mL及濃鹽酸8 mL,冰浴冷卻，攪拌下滴加亞硝酸鈉2.76 g(40 mmol)的水(10 mL)溶液，滴畢，反應1 h。加入亞硫酸鈉13.94 g(110 mmol)的水(80 mL)溶液，反應3 h。滴加稀鹽酸(濃鹽酸13 mL+水40 mL)，滴畢，于60 ℃反應30 min。冷卻至室溫，析出黃色沉淀,旋蒸除水50 mL后，過濾，濾餅依次用二氯甲烷(2×50 mL)和飽和食鹽水(2×20 mL)洗滌，干燥得黃色固體1 6.78 g，產(chǎn)率72.8%； IRν： 3 465， 3 324， 3 238， 3 105， 1 623， 1 568， 1 527， 1 496， 1 436， 1 413， 1 330， 1 263， 1 221， 1 148， 1 124， 1 099， 1 054， 888， 841， 770 cm-1。

(2) 4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酸乙酯(2)的合成

在反應瓶中加入對氯甲基苯甲酸18.6 g(110 mmol)和亞磷酸三乙酯90 mL，攪拌下回流反應48 h。減壓蒸出過量的亞磷酸三乙酯，用濃氨水調(diào)至pH 9～10，用乙酸乙酯(3×150 mL)萃取，合并有機層，用稀氨水(pH 9～10， 2×200 mL)洗滌，無水硫酸鎂干燥，減壓除溶后經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑：V(石油醚) ∶V(丙酮)=100 ∶7]純化得無色油狀液體226.0 g，產(chǎn)率80.0%；1H NMRδ： 7.98(d,J=8.01 Hz, 2H， ArH), 7.36(q,J=2.31 Hz, 2H, ArH), 4.36( q,J=7.11 Hz, 2H, OCH2), 4.02(m,J=7.26 Hz, 4H, POCH2), 3.25(s, 1H, ArCH2), 3.17( s, 1H, ArCH2), 1.39(t,J=7.11 Hz, 3H, OCH2CH3), 1.24(t,J=7.02 Hz, 6H, POCH2CH3)； IRν： 2 982， 1 717(C=O)， 1 610， 1 576， 1 509， 1 444， 1 418， 1 391， 1 367， 1 277(P=O)， 1 180， 1 108， 1 053， 1 023， 965， 868 cm-1。

(3) 4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酸(3)的合成

在反應瓶中加入2 2.56 g(8.59 mmol)和甲醇86 mL，攪拌下緩慢加入氫氧化鋰溶液(氫氧化鋰206．2 mg+水86 mL)，加畢,于室溫反應4 h。減壓蒸除甲醇，分液，水層用氯化鈉飽和后，用乙醚(2×100 mL)萃取。棄去乙醚萃取液，水層用濃鹽酸調(diào)至pH 3～4，用乙酸乙酯(3×100 mL)萃取，合并乙酸乙酯層，用無水硫酸鎂干燥。減壓除溶后用混合溶劑[V(乙酸乙酯) ∶V(正己烷)=1 ∶1]重結(jié)晶得白色固體3 1.61 g，產(chǎn)率69.5%；1H NMRδ： 8.02(d,J=7.8 Hz, 2H, ArH), 7.39(d,J=7.8 Hz, 2H, ArH), 4.07(q,J=5.4 Hz, 4H, OCH2), 3.31(s, 1H, ArCH2), 3.23(s, 1H, ArCH2), 1.27(t,J=6.9 Hz, 6H, CH3)； IRν： 3 423， 2 984， 2 920， 2 633， 2 503， 1 702， 1 609， 1 575， 1 475， 1 419， 1 398， 1 250， 1 211， 1 173， 1 108， 1 093， 1 028， 980， 954， 889， 868 cm-1。

(4) 4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰氯(4)的合成

氮氣保護，在反應瓶中加入3 0.54 g(2.0 mmol)和二氯甲烷20 mL，攪拌使其溶解;冰水浴冷卻下緩慢滴加草酰氯1 mL(8 mmol)的二氯甲烷(8 mL)溶液,滴畢,慢慢升至室溫；于35 ℃反應2 h。減壓除溶和過量草酰氯，注入干燥THF 10 mL得4的THF溶液。

(5) 5的合成

氮氣保護，在反應瓶中加入1 430 mg(1.9 mmol)和干燥THF 20 mL，攪拌使其溶解;冰水浴冷卻下緩慢滴加4 670 mg(2.3 mmol)的THF溶液，滴畢，于室溫反應1 h；于50 ℃反應3 h。減壓蒸除THF，殘余液用乙酸乙酯(2×30 mL)萃取，合并有機相，用無水硫酸鎂干燥，經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑：A=V(二氯甲烷) ∶V(甲醇)=50 ∶1]純化得黃紅色固體50.6 g，產(chǎn)率72.0%；1H NMRδ： 9.78(d, 1H, NH), 9.08(s, 1H, NH), 8.18(s, 1H, ArH), 7.97(d，J=7.5 Hz, 2H, ArH), 7.41(d,J=4.2 Hz, 2H， ArH), 7.14(d,J=9.3 Hz, 1H， ArH), 3.94(q,J=6.6 Hz, 4H, OCH2), 3.25(s, 1H, ArCH2), 3.18(s, 1H, ArCH2), 1.69(s, 1H, NH), 1.19(t,J=6.6 Hz, 6H, CH3)； IRν： 3 374， 2 983， 2 928， 2 869， 1 667， 1 618， 1 568， 1 523， 1 486， 1 416， 1 345， 1 313， 1 266， 1 228， 1 185， 1 148， 1 098， 1 053， 1 022， 967， 889， 863， 819 cm-1。

(6)6的合成

氮氣保護，在反應瓶中依次加入2-氨基-5-氯苯腈3.05 g(20 mmol)和干燥THF 80 mL，攪拌使其溶解;冰水浴冷卻下緩慢滴加45.77 g(20 mmol )的THF溶液，滴畢,于50 ℃反應12 h。減壓蒸除THF,殘余液用乙酸乙酯(3×150 mL)萃取，合并有機相，用無水硫酸鎂干燥，經(jīng)柱層析(洗脫劑:A=500 ∶1)純化得白色固體66.90 g，產(chǎn)率82%；1H NMR(DMSO-d6)δ： 10.68(s, 1H, NH), 8.08(s, 1H, ArH), 7.93(d,J=7.2 Hz, 2H, ArH), 7.81(d,J=8.1 Hz, 1H, ArH), 7.59(d,J=8.4 Hz, 1H, ArH), 7.46(d,J=6.0 Hz, 2H, ArH), 3.98(t,J=6.9 Hz, 4H, OCH2), 3.41(s, 1H, ArCH2), 3.34(s, 1H, ArCH2), 1.19(t, 6H, CH3)； IRν： 3 444， 3 270， 3 061， 2 982， 2 919， 2 850， 2 232(CN)， 1 677， 1 612， 1 576， 1 525， 1 505， 1 396， 1 297， 1 250， 1 220， 1 127， 1 085， 1 050， 1 027， 969， 880， 824 cm-1。

(7)7的合成

在反應瓶中依次加入62.10 g(5 mmol)，疊氮化鈉0.42 g(6 mmol)，三乙胺鹽酸鹽0.89 g(6 mmol)及甲苯100 mL，攪拌使其溶解;氮氣保護下于100 ℃反應16 h。減壓蒸凈甲苯，殘余物用蒸餾水溶解后，用濃鹽酸調(diào)至pH 2～3。用乙酸乙酯(3×80 mL)萃取，合并有機層，用無水硫酸鎂干燥，經(jīng)柱層析(洗脫劑：A=20 ∶1)純化得白色固體71.68 g，產(chǎn)率67%；1H NMR(DMSO-d6)δ： 12.32(s, 1H, NH), 8.68(d,J=9.0 Hz, 1H), 8.07(s, 1H, ArH), 8.04(d,J=7.8 Hz, 2H, ArH), 7.56(d,J=9.3 Hz, 1H, ArH), 7.50(d,J=6.6 Hz, 2H, ArH), 3.99(m,J=7.2 Hz, 4H, OCH2), 3.42(s, 1H, ArCH2), 3.35(s, 1H, ArCH2), 1.19(t,J=7.2 Hz, 6H, CH3)； IRν： 3 435， 2 984， 2 918， 2 849， 1 682， 1 618， 1 591， 1 538， 1 509， 1 456， 1 384， 1 307， 1 255， 1 212， 1 021， 975， 896， 866， 826 cm-1。

[1] Kusunoki M, Tsutsumi K, Hara T,etal. Correlation between lipid and glycogen contents in liver and insulin resistance in high-fat-fed rats treated with the lipoprotein lipase activator NO-1886[J].Metabolism,2002,51(6):792-795.

[2] Nakayama K, Hara T, Kusunoki M,etal. Effect of the lipoprotein lipase activator IBROLIPIM on adriamycin induced nephritic syndrome in rats[J].Metabolism，2000,49( 5):588-593.

[3] 尹衛(wèi)東,堤一彥,付國香,等. 脂蛋白脂酶活化劑NO-1886抑制糖尿病兔動脈粥樣硬化的形成[J].中國藥理學通報,2001,17(4):417-420.

[4] 尹衛(wèi)東,楊保堂,張善春，等. 誘發(fā)糖尿病飼料致新西蘭兔動脈粥樣硬化作用[J]．中國動脈硬化雜志,2001，9(2):100-103.

[5] Hotamisligil G S, Shargill N S, Spiegelman B M. Adipose expression of tumor necrosis factor-α:Direct role in obesity-linked insulin resistance[J].Science,1993,259(5091):87-91.

[6] Defronzo R A, Ferrannini E. A multifaceted syndrome responsible for NIDDN,obesity,hypertension,dyslipidemia and atherosclerotic cardiovascular disease[J]．Diabetes Care,1991,14(3):173-194.

[7] Hara T, Cameron-Smith D, Cooney G J,etal. The actions of a novel lipoprotein lipase activator,No-1886,in hypertriglyceridemic fructose-fed rats[J].Metabolism,1998,47(2):149-153.

[8] Hara T, Kusunoki M, Tsutsumi K,etal. A lipoprotein lipase activator,No-1886,improves endothelium-dependent relaxation of rat aorta associated with aging[J].Eur J Pharmacol,1998,350(1):75-79.