郭 麗, 張善輝, 王平平
(姜堰市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江蘇 姜堰 225500)
肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,MP)是引起原發(fā)性非典型肺炎及其他呼吸道感染性疾病的常見病原體,支原體肺炎的發(fā)病率可占到所有肺炎病例的20%~30%。除呼吸道外,MP尚可引起其他系統(tǒng)嚴(yán)重的并發(fā)癥[1],諸如累及神經(jīng)、心臟、關(guān)節(jié)等。由于肺炎支原體無(wú)細(xì)胞膜,作用于細(xì)胞膜的抗菌藥物對(duì)其無(wú)殺傷作用,故MP感染的治療與其他細(xì)菌和病毒感染的治療方案不同。然而人體感染MP后,臨床癥狀不具有特異性,因此不進(jìn)行病原學(xué)檢查,很難將其與一般病毒和細(xì)菌引起的呼吸道感染相區(qū)別。因此,及時(shí)、有效地進(jìn)行MP感染的實(shí)驗(yàn)室診斷十分重要,可及時(shí)指導(dǎo)臨床治療,進(jìn)而預(yù)防可能發(fā)生的流行和并發(fā)癥。我們檢測(cè)了兒童血清中MP特異性抗體效價(jià),了解MP感染與流行情況,并為臨床診斷和治療提供參考[2]。
一、對(duì)象
2011年1月~2012年9月來(lái)姜堰市人民醫(yī)院就診的門診、住院患兒301例,男168例、女133例,年齡6個(gè)月~12歲;其中<3歲50例,3~6歲179例,>6歲72例。采集患者靜脈血2 mL分離血清用于抗體檢測(cè)。
二、試劑
日本富士MP抗體診斷試劑SERODIAMYCOII[明膠顆粒凝集法,與和富士瑞必歐株式會(huì)社的間接血凝試驗(yàn)(PHA)檢測(cè)比對(duì),滴度1∶40~1∶10 240范圍內(nèi)一致率為96.5%]。
三、方法
按試劑盒說(shuō)明先加入血清稀釋液,再取25μL患者血清做系列倍比稀釋,分別加入未致敏粒子及致敏粒子,振蕩混勻后室溫放置3 h觀察結(jié)果。具體操作按說(shuō)明書進(jìn)行。
四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS9.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。率的比較用χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
一、301例被檢者中陽(yáng)性者為139例(效價(jià)≥1∶40為陽(yáng)性),陽(yáng)性率為46.2%,其中抗體效價(jià)≥1∶160者為45例,占15.0%,1∶40≤抗體效價(jià)<1∶160者為94例,占31.2%,見表1。
表1 264例被檢者血清MP抗體效價(jià)測(cè)定結(jié)果
二、各年齡組血清MP抗體效價(jià)結(jié)果見表2。3~6歲組陽(yáng)性率最高,<3歲組陽(yáng)性率最低。>6歲組MP抗體效價(jià)較高,1∶160及以上者較為多見;而<3歲組MP抗體效價(jià)較低,以1∶40和1∶80多見。
三、不同年齡患兒MP檢測(cè)陽(yáng)性率比較見表2。3~6歲組MP檢測(cè)陽(yáng)性率為53.1%,明顯高于其他2個(gè)年齡組。
表2 不同年齡患兒MP檢測(cè)陽(yáng)性率比較
四、不同季節(jié)MP抗體陽(yáng)性率結(jié)果見表3。冬、春兩季MP抗體陽(yáng)性率明顯高于夏、秋季(P<0.05、P<0.01)。
表3 不同季節(jié)MP抗體陽(yáng)性率比較
MP感染是一種多發(fā)的地方性流行病,尤其多見于兒童,全年均可發(fā)生MP感染。本研究發(fā)現(xiàn)冬、春兩季MP流行明顯高于夏、秋兩季,與文獻(xiàn)[3]報(bào)道一致,說(shuō)明支原體肺炎流行具有明顯的季節(jié)性。發(fā)達(dá)國(guó)家已將肺炎支原體實(shí)驗(yàn)室診斷列為呼吸道感染性疾病常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。因MP感染臨床表現(xiàn)缺少特異性,故易與病毒性肺炎、支氣管肺炎及肺結(jié)核等相混淆而延誤治療[4]。疾病早期病原特異性的IgM增高,急性期和恢復(fù)期雙份血清抗體的4倍增高都可作為病原學(xué)診斷的很好指標(biāo),因此選擇公認(rèn)的檢測(cè)方法,嚴(yán)格進(jìn)行質(zhì)量控制,單份血清特異性的抗體增高對(duì)臨床病原感染的診斷是可行的。兒童MP感染容易造成多系統(tǒng)、多器官的損害,所以快速準(zhǔn)確的診斷患兒是否為MP感染而致的肺炎尤為重要[5-6]。MP抗體的檢測(cè)簡(jiǎn)單、快速、選擇性好,便于臨床對(duì)MP感染的早期診斷和治療。因此臨床上對(duì)于持續(xù)發(fā)熱、頑固性劇烈咳嗽、喘息、普通抗菌藥物治療癥狀無(wú)改善者,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行MP抗體的檢測(cè),以便及早明確病原體,指導(dǎo)臨床用藥,縮短病程、預(yù)防病情加重和引起肺外多器官的損害。目前,用于MP感染診斷的方法主要有MP分離培養(yǎng)法、血清學(xué)試驗(yàn)和分子生物學(xué)試驗(yàn)。其中,MP分離培養(yǎng)法特異性高,可確診MP感染,但對(duì)培養(yǎng)基和標(biāo)本要求高,且靈敏度較低,耗時(shí)較長(zhǎng),難以普及。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等分子生物學(xué)方法有較好的靈敏度和特異性,目前常被認(rèn)為是MP感染診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”;但成本較高,且對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件和操作人員要求高,檢測(cè)容易出現(xiàn)假陽(yáng)性,不適于常規(guī)開展。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便,成本較低,易于普及,亦有較好的敏感性和較高的特異性,因此更具有實(shí)用價(jià)值。一般認(rèn)為,MP抗體效價(jià)在1∶40~1∶160之間時(shí)多為既往感染,而MP抗體效價(jià)≥1∶160時(shí)多為新近感染。近年來(lái),MP已成為小兒肺炎的重要病原體。本調(diào)查結(jié)果表明支原體肺炎易感染人群中以學(xué)齡前兒童患病較多,與國(guó)內(nèi)其他報(bào)道[3,5]相一致。3~6 歲組陽(yáng)性率最高,原因可能是相對(duì)于3歲以下小兒,3~6歲兒童其戶外公共場(chǎng)所活動(dòng)時(shí)間較長(zhǎng),抵抗力又比6歲以上兒童差,因此感染機(jī)會(huì)更高,且抗體效價(jià)亦較高。3歲以下兒童機(jī)體免疫功能尚未完善,MP感染后相應(yīng)抗體產(chǎn)生較慢;而6歲以上兒童由于機(jī)體免疫功能進(jìn)一步完善,不易被MP感染,故陽(yáng)性率較低。
由于MP病程表現(xiàn)與其他類型肺炎沒(méi)有特異性區(qū)別,病程長(zhǎng)、病情較重。對(duì)有MP感染可疑征象的患者,可選用MycoⅡ試劑盒測(cè)定輔助診斷,但應(yīng)注意樣本采集時(shí)間,最好延遲至起病1周后,如病情需要可提前至起病4~6 d;在未到最佳檢測(cè)時(shí)間前,可經(jīng)驗(yàn)性給予大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物,以免延誤治療[7]。
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