• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    雪蓮果粉對雙歧桿菌的體外促生長作用研究

    2012-11-15 02:03:16吳三林李書華
    食品工業(yè)科技 2012年14期
    關(guān)鍵詞:果粉低聚糖雪蓮

    吳三林,劉 芳,賀 琴,劉 超,李書華

    (樂山師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)院,四川樂山614000)

    雪蓮果粉對雙歧桿菌的體外促生長作用研究

    吳三林,劉 芳,賀 琴,劉 超,李書華

    (樂山師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)院,四川樂山614000)

    研究了雪蓮果粉對3種雙岐桿菌(長雙歧桿菌、短雙歧桿菌和兩歧雙歧桿菌)體外生長的影響。結(jié)果表明,雪蓮果粉對3種雙歧桿菌的體外生長均有顯著的促進(jìn)作用,優(yōu)于葡萄糖作碳源時(shí)的生長效果,同時(shí)對不同的雙歧桿菌的促進(jìn)作用不完全一致。雪蓮果粉濃度為1.6%~2.4%(m/v)時(shí)長雙歧桿菌增殖效果最明顯,0.8%~1.6%(m/v)時(shí)短雙歧桿菌促生長效果明顯,1.2%~2.4%(m/v)兩歧雙歧桿菌促生長效果明顯。

    雪蓮果,雙歧桿菌,低聚果糖,促生長

    人體腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量的增多對維持人體身體健康十分重要。促使人體腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量增多的方法主要有兩種:一種是直接口服雙歧桿菌的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑;另一種是服用能促進(jìn)雙歧桿菌在腸道內(nèi)增殖的物質(zhì)[1]。口服雙歧桿菌活菌劑受到許多條件的限制,尋求間接促進(jìn)雙歧桿菌生長的方法和途徑成為研究者關(guān)注的方向。由于雙歧桿菌營養(yǎng)要求高,需要外源性生長因子,即雙歧桿菌促生長因子(Bifidus factor,BF)[2]。BF是能夠促進(jìn)雙歧桿菌生長繁殖的一大類天然及合成物質(zhì),通過促進(jìn)雙歧桿菌生長繁殖表現(xiàn)其主要的生理功能,如:提高人體免疫力,抑制腸道有害菌生長等[3]。目前報(bào)道的BF中低聚糖及糖基化類物質(zhì)占主要部分。低聚糖(Oligosaccharide)又叫寡糖,它包括功能性低聚糖和普通低聚糖,其中功能性低聚糖不能被機(jī)體消化吸收,是公認(rèn)的雙歧桿菌增殖因子[4]。作為BF——低聚果糖高含量的健康食品,雪蓮果越來越受人們的關(guān)注。雪蓮果(Smallanthus sonchifolius),又叫亞貢(Yacon)[5],屬菊科(Compositae)向日葵屬(Helianthus L.)[6]。雪蓮果中含有豐富的低聚果糖,其低聚果糖含量為所有已知植物塊莖中最高,被稱為“低聚果糖之王”[6-8]。低聚糖占到雪蓮果干物質(zhì)的8.0%~61.9%[9]。低聚果糖不被人體利用,但能直接進(jìn)入腸道被雙歧桿菌吸收,幫助雙歧桿菌在短時(shí)間內(nèi)迅速地增長[9]。目前,對雪蓮果的研究主要集中在其營養(yǎng)成分和食品加工方面,關(guān)于雪蓮果粉對雙歧桿菌的促生長作用,國內(nèi)研究極少。本實(shí)驗(yàn)研究了不同濃度的雪蓮果粉對三種雙岐桿菌體外生長的影響情況,為雪蓮果的開發(fā)和綜合利用,促進(jìn)腸道雙歧桿菌數(shù)量增多的途徑提供更多的科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與設(shè)備

    雪蓮果 樂山市水果市場,低聚糖含量占干物質(zhì)的46%(用紫外分光光度法測出);長雙歧桿菌(B. longum)、短雙歧桿菌(B.breve)、兩歧雙歧桿菌(B. bifidum) 廣東省微生物菌種保藏中心;雙歧桿菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基 參考郝林華[10]、Ryuichiro tanaka[11]的配方,加H2O定容至1L,pH7,116℃高壓滅菌30min;雙歧桿菌雪蓮果培養(yǎng)基 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制上略有變動,以不同劑量的雪蓮果粉代替葡萄糖作為培養(yǎng)基中的碳源,添加量分別為0.1%、0.2%、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%、2.4%、4%(m/v);雙歧桿菌BS培養(yǎng)基[12-13]購買于青島高科園海博生物技術(shù)有限公司,用于雙歧桿菌的分離和計(jì)數(shù)。

    DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海恒科學(xué)儀器有限公司;電熱手提壓力蒸汽消毒器 中國上海;KD723型可見分光光度計(jì) 上??频蔷軆x器有限公司;YQX-Ⅱ厭氧培養(yǎng)箱 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 制備雪蓮果干粉 將雪蓮果削皮,切成薄片,置于65℃干燥箱中烘干至恒重。將烘干的雪蓮果研磨成粉末,放在干燥器中備用。

    1.2.2 配制稀釋液和培養(yǎng)基[14]。

    1.2.3 雪蓮果粉對雙歧桿菌體外生長的影響 以雪蓮果粉培養(yǎng)基作為實(shí)驗(yàn)組,基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為對照組。用移液槍取0.1mL雙歧桿菌菌懸液置于分別含有雪蓮果粉0.1%,0.2%,0.4%,0.8%,1.2%,1.6%,2.0%,2.4%,4.0%的5mL液體雪蓮果粉培養(yǎng)基試管中,并以液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為對照。每一濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù),測定各培養(yǎng)液的吸光值OD550nm[10]和pH。用平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。觀察3種菌菌落生長情況[10]。

    1.2.4 雙歧桿菌生長曲線的測定 通過上述實(shí)驗(yàn),確定雪蓮果粉作碳源在雙歧桿菌培養(yǎng)基中的最適添加量(根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,選擇1.6%的雪蓮果粉濃度)。配制該雪蓮果粉含量的液體培養(yǎng)基,滅菌備用。以長雙歧桿菌為例,取7支裝有5mL液體培養(yǎng)基的試管,分別接種1mL長雙歧桿菌的菌懸液,37℃恒溫厭氧培養(yǎng)。在相應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間取出長雙歧桿菌的培養(yǎng)液,立即測定,同時(shí)測定各管菌懸液的吸光值OD550nm。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),雙歧桿菌菌懸液在550nm的吸光值為縱坐標(biāo),繪制生長曲線。同時(shí)測定液體培養(yǎng)基pH的變化。短雙歧桿菌和兩歧雙歧桿菌作相同的培養(yǎng),測定生長曲線。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù),同時(shí)以雙歧桿菌液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為對照組。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 雪蓮果粉對雙歧桿菌體外生長的促進(jìn)作用

    雪蓮果粉對3種雙歧桿菌體外生長的影響見表1,雪蓮果粉培養(yǎng)基的3種雙歧桿菌與基礎(chǔ)培養(yǎng)基組相比,菌落數(shù)有不同程度的增加,說明雪蓮果粉對雙歧桿菌的體外生長有促進(jìn)作用。同時(shí),從表1的結(jié)果表明,培養(yǎng)基中雪蓮果粉的含量并不是越高越好,不同雙歧桿菌生長的雪蓮果粉濃度不同。長雙歧桿菌在雪蓮果粉濃度為2.0%時(shí)生長效果最明顯,菌落數(shù)達(dá)到10.5×108CFU/mL,是基礎(chǔ)培養(yǎng)基的2.2倍。短雙歧桿菌在雪蓮果粉濃度為1.6%時(shí)增殖效果最明顯,菌落數(shù)達(dá)到11.6×108CFU/mL,是基礎(chǔ)培養(yǎng)基的1.9倍,濃度為4.0%時(shí),短雙歧桿菌的生長受到抑制,菌落數(shù)反而比基礎(chǔ)培養(yǎng)基降低了5%,可能是高濃度的雪蓮果粉使得細(xì)菌細(xì)胞脫水,抑制了它的生長。兩歧雙歧桿菌在1.6%的雪蓮果粉濃度的培養(yǎng)基中增值效果最明顯,菌落數(shù)達(dá)到12.8×108CFU/mL,是基礎(chǔ)培養(yǎng)基的1.7倍,在濃度為4.0%時(shí),菌落數(shù)比基礎(chǔ)培養(yǎng)基組下降了10%,兩歧雙歧桿菌的生長受到了抑制。綜合不同濃度的雪蓮果粉培養(yǎng)基對3種雙歧桿菌增殖效果,在1.6%的濃度時(shí),增殖效果最明顯,長雙歧桿菌、短雙歧桿菌和兩歧雙歧桿菌菌落數(shù)分為9.4×108CFU/mL,11.6×108CFU/mL和12.8×108CFU/mL,分別比基礎(chǔ)培養(yǎng)基增加95.8%、93.3%和70.7%。

    表1 雪蓮果粉對雙歧桿菌體外生長的影響Table 1 Effects of yacon powder on the growth of Bifidobacteria in vitro

    2.2 雙歧桿菌生長曲線的測定

    圖1 長雙歧桿菌生長曲線Fig.1 Growth curve of B.longum

    圖2 短雙歧桿菌生長曲線Fig.2 Growth curve of B.breve

    3種雙歧桿菌液體培養(yǎng)后的生長變化(見圖1~圖3),3種雙歧桿菌在雪蓮果粉培養(yǎng)基中的生長繁殖的速度均快于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的增殖速度,表現(xiàn)為雪蓮果粉液體培養(yǎng)基OD550nm值均大于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的,并且生長曲線表現(xiàn)為先升高,達(dá)到峰值后降低的變化趨勢。雪蓮果粉培養(yǎng)基組和基礎(chǔ)培養(yǎng)基組均在經(jīng)過很短的適應(yīng)期后進(jìn)入對數(shù)生長期,培養(yǎng)12h后,雪蓮果粉培養(yǎng)基中的雙歧桿菌增殖速度明顯快于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,培養(yǎng)48h后,3種雙歧桿菌的液體培養(yǎng)基的OD550nm值均達(dá)到最大,長雙歧桿菌在雪蓮果粉培養(yǎng)基的OD550nm值達(dá)1.67,而基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的OD550nm值只有1.125,比基礎(chǔ)培養(yǎng)基增加48.4%。短雙歧桿菌在雪蓮果培養(yǎng)的OD550nm值達(dá)1.631,而基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的OD550nm值只有1.085,比基礎(chǔ)培養(yǎng)基增加50.3%。兩歧雙歧桿菌,雪蓮果粉培養(yǎng)基OD550nm值達(dá)1.424,而基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的OD550nm值只有1.118,比基礎(chǔ)培養(yǎng)基增加27.4%。之后,雙歧桿菌的生長開始變慢,逐步進(jìn)入衰亡期,但從圖中可見,雪蓮果粉培養(yǎng)基中雙歧桿菌進(jìn)入衰亡期的速度比基礎(chǔ)培養(yǎng)基慢。從3種雙歧桿菌的生長曲線來看,在雪蓮果粉培養(yǎng)基中,長雙歧桿菌和短雙歧桿菌在對數(shù)期的增殖速度較兩歧雙歧桿菌的增殖速度快,說明雪蓮果粉對長雙歧桿菌和短雙歧桿菌的體外生長的促進(jìn)作用較兩歧雙歧桿菌更明顯。

    從表2中可以看出,雪蓮果培養(yǎng)基和基礎(chǔ)培養(yǎng)基的pH變化基本一致,表現(xiàn)為pH由7一直下降的趨勢。在培養(yǎng)12h時(shí),雪蓮果培養(yǎng)基的pH下降程度低于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,說明此時(shí)的雪蓮果粉培養(yǎng)基,緩沖能力較強(qiáng),可以延遲pH下降的程度。進(jìn)入穩(wěn)定期和衰亡期后,2種培養(yǎng)基的pH均下降到5.0左右。

    圖3 兩歧雙歧桿菌生長曲線Fig.3 Growth curve of B.bifidum

    表2 3種雙歧桿菌液體培養(yǎng)后的pH變化Table 2 pH changes of 3 kinds of Bifidobacteria in the liquid culture medium

    3 結(jié)論

    本實(shí)驗(yàn)通過用雪蓮果粉來作為雙歧桿菌體外生長的碳源,培養(yǎng)了長雙歧桿菌,短雙歧桿菌和兩歧雙歧桿菌,研究結(jié)果表明雪蓮果粉對雙歧桿菌體外生長有顯著的促進(jìn)作用,優(yōu)于葡糖糖作為培養(yǎng)基碳源時(shí)的生長效果。培養(yǎng)基中雪蓮果粉的添加量要適宜,同時(shí)不同雙歧桿菌生長所需的雪蓮果粉濃度不同。對長雙歧桿菌,1.6%~2.4%為最適劑量;對短雙歧桿菌,0.8%~1.6%為最適劑量;對兩歧雙歧桿菌,1.2%~2.4%為最適劑量;1.6%的濃度時(shí),對3種菌的增殖效果都很明顯。過高濃度的雪蓮果粉對雙歧桿菌的生長有抑制作用。過低的雪蓮果粉濃度的促進(jìn)效果不明顯,無法滿足雙歧桿菌生長過程所需的營養(yǎng)。3種雙歧桿菌的生長曲線表明,雪蓮果粉在對數(shù)期能使細(xì)菌顯著增殖,穩(wěn)定期時(shí)菌體數(shù)量大大高于葡萄糖作為碳源的雙歧桿菌數(shù)量。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)一步說明,雪蓮果粉能促進(jìn)雙歧桿菌的生長與快速增殖。

    [1]張秋紅,張香香,王文香.大豆低聚糖的生理功能及在食品中的應(yīng)用[J].食品研究與開發(fā),2005,26(4):166-168.

    [2]鄭海濤,崔廷婷,王洋.雪蓮果對雙歧桿菌促生長作用的研究[J].中國乳業(yè),2010(1):50.

    [3]涂國云,蔣寒青,康白.雙歧桿菌促生長因子的研究[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,1996,8(6):50-51.

    [4]李平蘭,江漢湖.雙歧桿菌增殖因子---低聚糖的功能及在食品上的應(yīng)用[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,1998,10(4):239-241.

    [5]武瑩.雪蓮果中糖類成分分析及低聚果糖制備工藝路線初探[D].北京:北京中醫(yī)藥大學(xué),2008.

    [6]陳燕,王文平,吳國卿,等.雪蓮果乳酸菌飲料的研制[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(30):15071-15073.

    [7]蒲海燕.雪蓮果的綜合利用與開發(fā)[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2010,31(3):86-90.

    [8]王照波,周文美,徐子婷,等.雪蓮果水溶性低聚糖的提取工藝[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(2):173-176.

    [9]熊偉,張健.低聚糖(FOS)——超強(qiáng)雙歧因子[J].西部探礦工程,2006(12):292-294.

    [10]郝林華.牛蒡寡糖對雙歧桿菌體外生長的促進(jìn)作用[J].海洋科學(xué)發(fā)展,2005,23(3):347-351.

    [11]Ryuichiro tanaka,Masahiko mutai.Improved medium for selective isolation and enumeration of Bifidobacterium[J].Applied and Environmental Microbiology,1980,40(5):886-869.

    [12]陳晉安,劉蓉,鄭忠輝,等.菊芋低聚果糖促進(jìn)雙歧桿菌生長的研究[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2001,40(4):968-972.

    [13]熊德鑫.厭氧體菌分離和鑒定方法[M].南昌:江西科技出版社,1986:9-11.

    [14]黃秀梨,辛明秀.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:高等教育出版社,2008:53-60.

    Study on the growth promoting effect of yacon powder on Bifidobacteria in vitro

    WU San-lin,LIU Fang,HE Qin,LIU Chao,LI Shu-hua
    (College of Chemistryamp;Life Sciences,Leshan Normal University,Leshan 614000,China)

    In this experiment,yacon powder instead of glucose which could be used as acarbohydrate source in the culture medium.The growth of three Bifidobacteria:B.longum,B.breve,B.bifidum in vitro was studied.The results showed that yacon powder had significant effect to promote the growth of the three Bifidobacteria in vitro,the effect was better than that of glucose used as a carbohydrate source.Further more,promoting effect was different for different Bifidobacterium.The most significantly proliferation effect for B.longum,B.breve and B.bifidum were 1.6%~2.4%,0.8%~1.6%,1.2%~2.4%,respectively.

    yacon;Bifidobacterium;smallanthus sonchifolius;fructo-oligosaccharide(FOS)growth promoting

    TS201.3

    A

    1002-0306(2012)14-0176-03

    2011-07-18

    吳三林(1963-),男,本科,副教授,研究方向:植物生理生化。

    四川省教育廳科研項(xiàng)目(10ZC018)。

    猜你喜歡
    果粉低聚糖雪蓮
    4種哺乳動物乳中低聚糖的定性和定量分析研究進(jìn)展
    貯藏模式對番石榴果粉品質(zhì)的影響
    葡萄果粉積累規(guī)律及結(jié)構(gòu)分析
    為什么雪蓮不怕嚴(yán)寒
    不同干燥方式對黃刺玫果粉品質(zhì)的影響
    雪蓮: 高處的綻放
    中國三峽(2017年4期)2017-06-06 10:44:23
    大豆低聚糖——多功能的抗癌物質(zhì)
    大豆科技(2016年6期)2016-03-11 15:30:21
    果膠低聚糖的制備及其生物活性的研究進(jìn)展
    半干法酶解制備的魔芋葡甘低聚糖性質(zhì)
    怕打針
    亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产精品久久久久久av不卡| 人妻少妇偷人精品九色| 在线观看人妻少妇| 观看免费一级毛片| 精品午夜福利在线看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 两个人的视频大全免费| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 男女边摸边吃奶| 精品久久久久久久久亚洲| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品国产三级专区第一集| 日本wwww免费看| 少妇人妻 视频| 亚洲国产精品专区欧美| 日韩伦理黄色片| 日韩三级伦理在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 色吧在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲av男天堂| 亚洲精品乱久久久久久| 丰满乱子伦码专区| 免费大片18禁| 舔av片在线| 亚洲第一区二区三区不卡| 日本黄大片高清| 1000部很黄的大片| 亚洲精品aⅴ在线观看| 中文天堂在线官网| 亚洲欧美日韩无卡精品| 在线看a的网站| 制服丝袜香蕉在线| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 美女cb高潮喷水在线观看| 三级国产精品片| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美人与善性xxx| 国产精品一区二区性色av| 少妇被粗大猛烈的视频| 久久ye,这里只有精品| 亚洲精品成人久久久久久| 99re6热这里在线精品视频| 国产男女超爽视频在线观看| 午夜福利高清视频| 亚洲av.av天堂| 大片电影免费在线观看免费| 观看美女的网站| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲av免费高清在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 我的老师免费观看完整版| 国产伦在线观看视频一区| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产午夜福利久久久久久| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 美女国产视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 嫩草影院入口| 久久久久网色| 一级黄片播放器| tube8黄色片| 免费人成在线观看视频色| 亚洲最大成人中文| 天天一区二区日本电影三级| av福利片在线观看| 一区二区三区精品91| 黑人高潮一二区| 综合色丁香网| 在线 av 中文字幕| 99热这里只有精品一区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲,欧美,日韩| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美+日韩+精品| 一个人看的www免费观看视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 成人黄色视频免费在线看| 看非洲黑人一级黄片| 高清av免费在线| 91久久精品国产一区二区成人| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产乱来视频区| 成人二区视频| 如何舔出高潮| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 免费观看无遮挡的男女| 日韩亚洲欧美综合| 国产 精品1| 免费看日本二区| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品久久久久久久久免| 秋霞在线观看毛片| 国产精品一区www在线观看| av女优亚洲男人天堂| 在线免费十八禁| 免费观看的影片在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 婷婷色综合www| 久久韩国三级中文字幕| 在线观看国产h片| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产男女内射视频| 午夜激情久久久久久久| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲国产欧美人成| 成人漫画全彩无遮挡| 69av精品久久久久久| 性色av一级| 中文字幕久久专区| 亚洲成色77777| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产视频内射| 亚洲久久久久久中文字幕| 特级一级黄色大片| av在线蜜桃| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产老妇女一区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 少妇丰满av| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品久久久久久精品古装| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 精品一区在线观看国产| 一级黄片播放器| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 久久久精品免费免费高清| 日韩一本色道免费dvd| 午夜激情久久久久久久| 在线 av 中文字幕| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲av欧美aⅴ国产| 综合色av麻豆| 一级黄片播放器| 亚洲国产精品999| 亚洲成人精品中文字幕电影| av在线播放精品| 亚洲人成网站在线播| 黄色日韩在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲成人一二三区av| 免费看光身美女| 亚洲天堂av无毛| 69av精品久久久久久| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲国产av新网站| 丰满少妇做爰视频| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲经典国产精华液单| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 一个人看的www免费观看视频| 亚洲综合色惰| 免费观看的影片在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品一及| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 少妇的逼水好多| 国产精品无大码| 69av精品久久久久久| 99久久人妻综合| 在线a可以看的网站| 精品一区二区免费观看| 热99国产精品久久久久久7| 联通29元200g的流量卡| 国产永久视频网站| 久久久久久久午夜电影| 日本黄色片子视频| 国产成人freesex在线| 亚洲美女视频黄频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 天堂中文最新版在线下载 | 秋霞在线观看毛片| 久久久欧美国产精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 国产91av在线免费观看| 高清午夜精品一区二区三区| xxx大片免费视频| 亚洲欧美清纯卡通| av专区在线播放| 免费看a级黄色片| 午夜福利视频精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 日韩一本色道免费dvd| 黄色怎么调成土黄色| 欧美成人午夜免费资源| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲内射少妇av| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲色图av天堂| 中国三级夫妇交换| 亚洲成人久久爱视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 日本一二三区视频观看| 免费少妇av软件| 街头女战士在线观看网站| 91久久精品国产一区二区成人| 国产成人精品一,二区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久99热这里只频精品6学生| 国产久久久一区二区三区| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲精品国产成人久久av| 18禁动态无遮挡网站| 大陆偷拍与自拍| 99久久中文字幕三级久久日本| 在现免费观看毛片| 亚洲三级黄色毛片| freevideosex欧美| 我要看日韩黄色一级片| 国产精品蜜桃在线观看| 国产成人精品福利久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 好男人视频免费观看在线| 97在线人人人人妻| 老司机影院毛片| 最近最新中文字幕免费大全7| 欧美成人一区二区免费高清观看| 丝袜喷水一区| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| 秋霞在线观看毛片| 国产精品99久久久久久久久| 日本色播在线视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 99热这里只有精品一区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 深夜a级毛片| 69av精品久久久久久| 久久久a久久爽久久v久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久精品综合一区二区三区| 国产中年淑女户外野战色| 高清视频免费观看一区二区| 日本色播在线视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久久性生活片| 天天一区二区日本电影三级| 婷婷色综合大香蕉| 大片免费播放器 马上看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久久久久九九精品二区国产| 99九九线精品视频在线观看视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 九草在线视频观看| 日韩大片免费观看网站| 国产精品熟女久久久久浪| 天堂网av新在线| 中文字幕av成人在线电影| 男女国产视频网站| 日本黄色片子视频| 白带黄色成豆腐渣| 亚州av有码| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲精品一二三| 免费看a级黄色片| 久久韩国三级中文字幕| 观看免费一级毛片| 国产免费福利视频在线观看| 各种免费的搞黄视频| 久久久色成人| 午夜免费观看性视频| av在线观看视频网站免费| 久久精品久久精品一区二区三区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 熟女电影av网| 激情五月婷婷亚洲| 免费看av在线观看网站| 黄色一级大片看看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产美女午夜福利| 99re6热这里在线精品视频| 成人国产av品久久久| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 免费黄网站久久成人精品| av.在线天堂| 精品久久国产蜜桃| 欧美日韩亚洲高清精品| 一个人看的www免费观看视频| 国产男女内射视频| 亚洲精品第二区| 久久久久久久久久久免费av| 一本色道久久久久久精品综合| 久久精品夜色国产| 欧美日本视频| 最新中文字幕久久久久| 99久国产av精品国产电影| 亚洲国产精品999| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久久久九九精品影院| 成年女人在线观看亚洲视频 | 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 观看免费一级毛片| h日本视频在线播放| 亚洲美女视频黄频| 一区二区三区免费毛片| 黄色欧美视频在线观看| 一区二区三区精品91| av国产精品久久久久影院| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 纵有疾风起免费观看全集完整版| 成人特级av手机在线观看| 性色av一级| 午夜福利网站1000一区二区三区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲不卡免费看| 国产爱豆传媒在线观看| 精品久久久久久久末码| 男女无遮挡免费网站观看| 少妇丰满av| 亚洲欧美一区二区三区国产| 伦理电影大哥的女人| 亚州av有码| 午夜爱爱视频在线播放| 国产伦在线观看视频一区| 国产精品av视频在线免费观看| 91久久精品国产一区二区成人| 国产色爽女视频免费观看| 日韩av不卡免费在线播放| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99热这里只有是精品在线观看| 国产淫语在线视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 一个人看的www免费观看视频| 美女国产视频在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品一区二区性色av| 亚洲欧洲日产国产| 日韩一区二区三区影片| 赤兔流量卡办理| 一区二区三区精品91| 久久久久久久精品精品| 女人被狂操c到高潮| 伊人久久精品亚洲午夜| 日本色播在线视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲成人一二三区av| 伦理电影大哥的女人| 日韩制服骚丝袜av| 男人和女人高潮做爰伦理| 极品教师在线视频| av天堂中文字幕网| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 中文字幕av成人在线电影| 丰满少妇做爰视频| 亚洲欧美日韩东京热| 一级a做视频免费观看| 免费黄网站久久成人精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 婷婷色综合www| 日韩国内少妇激情av| 日韩三级伦理在线观看| 免费看日本二区| 男女边摸边吃奶| 婷婷色综合www| 五月开心婷婷网| 精品一区在线观看国产| 亚洲人成网站高清观看| av免费观看日本| 亚洲精品第二区| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲欧洲日产国产| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲精品亚洲一区二区| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日本熟妇午夜| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 免费在线观看成人毛片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 欧美另类一区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 中文字幕av成人在线电影| 久久久久九九精品影院| 特级一级黄色大片| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩成人伦理影院| 免费av毛片视频| 国产亚洲一区二区精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产在线男女| 国产成人免费观看mmmm| 又爽又黄无遮挡网站| 三级国产精品欧美在线观看| 国精品久久久久久国模美| 人人妻人人看人人澡| 亚州av有码| 免费黄网站久久成人精品| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产毛片在线视频| 精品午夜福利在线看| 亚洲精品国产av蜜桃| 日韩欧美 国产精品| 卡戴珊不雅视频在线播放| 秋霞伦理黄片| 婷婷色综合大香蕉| 日本欧美国产在线视频| 三级经典国产精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产视频内射| 国产有黄有色有爽视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 18+在线观看网站| 久久久国产一区二区| av在线app专区| 国产午夜福利久久久久久| 免费大片18禁| 国产色婷婷99| 少妇丰满av| 国产69精品久久久久777片| 精品熟女少妇av免费看| 免费观看无遮挡的男女| 日韩视频在线欧美| 欧美bdsm另类| 亚洲人与动物交配视频| 国产有黄有色有爽视频| 免费观看性生交大片5| 国产日韩欧美亚洲二区| 一区二区三区精品91| 日本一二三区视频观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚州av有码| 久热久热在线精品观看| 男人舔奶头视频| 久久久久网色| 在线a可以看的网站| 激情五月婷婷亚洲| 男人添女人高潮全过程视频| 美女国产视频在线观看| 超碰97精品在线观看| 欧美bdsm另类| 国产一区有黄有色的免费视频| xxx大片免费视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 少妇的逼好多水| 国产淫语在线视频| 精品少妇久久久久久888优播| 国产伦在线观看视频一区| 国产精品女同一区二区软件| 国产高清不卡午夜福利| 国产成人aa在线观看| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲国产精品国产精品| 97在线视频观看| 亚洲最大成人中文| 亚洲四区av| 久久99精品国语久久久| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产黄a三级三级三级人| 久久久久久久久久成人| 国产在视频线精品| 日韩一本色道免费dvd| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费av毛片视频| a级一级毛片免费在线观看| 久久精品久久精品一区二区三区| av.在线天堂| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲av成人精品一二三区| 国产探花在线观看一区二区| 青青草视频在线视频观看| 成人亚洲精品一区在线观看 | 久久精品久久久久久久性| 男女下面进入的视频免费午夜| 在线观看人妻少妇| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 久久久久久久午夜电影| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久久九九精品影院| 免费高清在线观看视频在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 黄色配什么色好看| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美日韩视频精品一区| 成人美女网站在线观看视频| 色视频在线一区二区三区| 久久久久久久久久久免费av| 水蜜桃什么品种好| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产淫语在线视频| 欧美zozozo另类| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品乱久久久久久| 熟女av电影| 能在线免费看毛片的网站| 在线观看av片永久免费下载| 免费黄网站久久成人精品| 国产男女内射视频| 白带黄色成豆腐渣| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久这里有精品视频免费| 欧美zozozo另类| 亚洲精品aⅴ在线观看| 香蕉精品网在线| 欧美精品国产亚洲| 国产欧美亚洲国产| 精品人妻熟女av久视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 色播亚洲综合网| 午夜福利网站1000一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 啦啦啦在线观看免费高清www| 十八禁网站网址无遮挡 | 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲av国产av综合av卡| 涩涩av久久男人的天堂| 在线观看国产h片| 熟女电影av网| 免费看av在线观看网站| 各种免费的搞黄视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久久色成人| 日韩伦理黄色片| 日韩欧美一区视频在线观看 | 久久综合国产亚洲精品| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 韩国高清视频一区二区三区| 色吧在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 在现免费观看毛片| 26uuu在线亚洲综合色| 久热这里只有精品99| 精品久久久久久久末码| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产高清三级在线| 嫩草影院新地址| 大话2 男鬼变身卡| 中文字幕免费在线视频6| 国产男女内射视频| 久久女婷五月综合色啪小说 | 交换朋友夫妻互换小说| 丝瓜视频免费看黄片| 我要看日韩黄色一级片| 熟女电影av网| 嘟嘟电影网在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 黄色日韩在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 丰满人妻一区二区三区视频av| 搞女人的毛片| 人妻少妇偷人精品九色| 中国三级夫妇交换| 国产一区二区三区综合在线观看 | 国产午夜精品一二区理论片| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产一区有黄有色的免费视频| av国产精品久久久久影院| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 别揉我奶头 嗯啊视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 全区人妻精品视频| 一级av片app| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲成色77777| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲自偷自拍三级| 黄色配什么色好看| 国产中年淑女户外野战色| 各种免费的搞黄视频| 国产成人精品福利久久| 久久精品夜色国产| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 成人特级av手机在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 超碰97精品在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 少妇丰满av| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲四区av| 欧美bdsm另类| 国产成人精品一,二区| 一级二级三级毛片免费看| 欧美最新免费一区二区三区| 精品久久国产蜜桃| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 不卡视频在线观看欧美| 最后的刺客免费高清国语| 成年女人看的毛片在线观看|